廖文军
- 作品数：10 被引量：38H指数：5
- 供职机构：广西兽医研究所更多>>
- 发文基金：广西壮族自治区科技攻关计划广西壮族自治区自然科学基金南宁市科学研究与技术开发计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 抗人红细胞单链抗体与猪伪狂犬gE蛋白双功能融合蛋白的构建及生物学活性检测
- 为构建既具有凝集性又具有抗原性的双功能融合蛋白,本研究利用特异性引物从重组质粒PMD-2E8ScFv和PMD-gE中PCR扩增得2E8基因（抗人红细胞H抗原单链抗体基因）和kgE基因（PRVgE主要抗原编码区）,采用重叠...
- 廖文军覃绍敏吴健敏王仰杰白安斌覃建飞
- 关键词：猪伪狂犬病毒GE基因
- 文献传递
- 1986--2011年广西猪瘟流行监测及遗传变异分析被引量：7
- 2013年
- 采用Nested-PCR方法对采自广西各地1986-2011年间,199个猪场(养殖户)的1 521份样品进行CSFV、PRRSV、PCV2、PRV、HPS等病原的检测及流行病学调查,结果发现广西猪瘟以混合感染为主,病性复杂。尽管保育猪发病仍占第1位,但近年来母猪繁殖障碍、无症状带毒感染的发病率已明显提高。通过对25年来收集的77株广西CSFV流行株E2基因的比较分析,发现广西猪瘟流行株分为基因I群和II群,目前仍未发现基因III群。起源于欧洲大陆的S2.1亚型毒株已经成为广西的优势流行株,多引起临床的急性和亚急性感染;以SHIMEN株为代表的中国经典毒株S1.1亚型是造成母猪繁殖障碍、隐性带毒感染的主要毒株。流行于20世纪80-90年代间的基因S2.2及S2.3亚型毒株已经基本消失,值得进一步研究。广西CSFV流行株E2蛋白部分关键氨基酸位点已经发生变异,可能会导致疫苗的不完全保护。
- 谭颖翌毛燕吴健敏覃绍敏马玲白安斌廖文军欧阳康周松峰
- 关键词：CSFVE2
- 抗人红细胞单链抗体(ScFv)-伪狂犬病毒(PRV)gE蛋白双功能融合蛋白的构建及生物学活性检测
- 本研究利用特异性引物从重组质粒pMD-2E8ScFv和pMD-gE中PCR扩增得2E8基因(抗人红细胞H抗原单链抗体基因)和kgE基因(PRVgE主要抗原编码区)，采用重叠延伸(SOE)PCR法拼接成融合的双功能分子2E...
- 廖文军覃绍敏吴健敏王仰杰白安斌覃建飞
- 关键词：免疫生物学
- 文献传递
- 检测猪伪狂犬病病毒gE抗体红细胞凝集试验的建立及应用被引量：10
- 2010年
- 以纯化的抗人红细胞单链抗体(ScFv)—猪伪狂犬病病毒(PRV)gE蛋白双功能融合蛋白为抗原,建立了检测猪伪狂犬病毒gE抗体的红细胞凝集试验。利用方阵滴定试验筛选出最佳抗原工作浓度为55μg/mL,血清最佳稀释度为1∶20,作用时间15 min,与猪瘟(CSF)、猪细小病毒(PPV)、猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)、猪乙型脑炎(JE)、猪布氏杆菌病(Brucellosis)阳性血清和PRV gE缺失疫苗接种的猪免疫血清均不出现红细胞凝集现象,与PRV标准阳性血清反应出现肉眼可见的凝集圈。与美国进口的PRV抗体检测gE-ELISA诊断试剂盒检测结果比较,50份猪血清的阴、阳性检出符合率均为100%。红细胞凝集试验检测方法具有操作简便、敏感性和特异性较高的特点,可用于PRV野毒感染的快速筛查。
- 廖文军吴健敏覃绍敏袁书智陈凤莲华俊谢彬
- 关键词：猪伪狂犬病病毒GE基因抗体检测
- 猪伪狂犬病毒gE抗体检测红细胞凝集试验方法和金标免疫层析法的建立及应用
- 伪狂犬病(Pseudorabies，PR)是由伪狂犬病毒(Pseudorabies Virus，PRV)引起的家畜和野生动物以发热、奇痒（猪除外）及脑脊髓炎为主要症状一种高度接触性传染病。目前，针对国内广泛使用PRVgE...
- 廖文军
- 关键词：伪狂犬病毒金标免疫层析法
- 文献传递
- 伪狂犬病病毒主要抗原表位基因KgE的表达及纯化被引量：1
- 2011年
- 从伪狂犬病病毒(PRV)基因组中克隆出KgE抗原表位基因,并将其插入到原核表达载体pET-Trx中,构建了原核表达质粒pET-Trx-KgE,将pET-Trx-KgE转化至BL21(DE3)plysS中,在IPTG诱导下进行表达。SDS-PAGE分析表明,KgE基因在BL21(DE3)plysS中获得高效表达,表达量占菌体总蛋白的32.8%,主要以包涵体形式存在,分子质量约为36ku。将表达的蛋白以亲和层析法进行纯化并通过谷胱甘肽还原法进行复性,纯化后蛋白纯度达到99.2%。Western blot检测发现,表达的KgE蛋白能够与PRV高免血清发生特异反应,但与猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒等阳性血清不发生反应,表明KgE蛋白具有良好的抗原性。
- 周松峰吴健敏关忠宜廖文军白安斌
- 关键词：伪狂犬病病毒原核表达
- 猪伪狂犬病病毒gE抗体胶体金免疫层析检测方法的建立及应用被引量：11
- 2010年
- 以纯化的抗人红细胞单链抗体(ScFv)-猪伪狂犬病病毒(PRV)gE蛋白双功能融合蛋白为诊断抗原和胶体金标记物,以羊抗猪IgG包被硝酸纤维膜作为质控带,制作检测猪伪狂犬病毒gE抗体的双抗原胶体金试纸条。利用方阵滴定试验筛选出金标抗原最佳工作浓度为17.6μg,检测线诊断抗原最佳标记量为1.76μg,血清最佳稀释度为1∶10,作用时间15 min,与猪瘟病毒(CSFV)、猪细小病毒(PPV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪乙型脑炎病毒(JEV)、猪布鲁菌(Brucella)阳性血清和PRVgE缺失疫苗接种的猪免疫血清检测线均不出现红色条带,与PRV标准阳性血清反应检测线出现红色条带。试纸条操作简单,肉眼于15 min内可判定结果;试纸条在室温保存6个月,其特异性和敏感性没有明显变化;与美国IDEXX和法国LSI gE-ELISA抗体检测诊断试剂盒检测结果比较,1 164份猪血清的符合率均为90.55%。制备的胶体金试纸条具有操作简便、敏感性和特异性较高的特点,可用于PRV野毒感染的快速筛查。
- 廖文军吴健敏谭攀覃绍敏陈凤莲马玲张伟
- 关键词：伪狂犬病毒金标免疫层析法GE基因抗体检测
- 可形成生物膜的禽源产色葡萄球菌的分离鉴定及耐药性研究被引量：8
- 2012年
- 从发病鸡关节腔内分离获得1株革兰氏阳性球菌,根据细菌形态、生理生化特性、动物试验,结合16S rRNA基因核苷酸序列测定、系统进化树分析及生物膜半定量检测,确定该分离菌株为可形成生物膜的的产色葡萄球菌,该菌在正常条件下不致病。药物敏感试验和耐药基因检测发现,该菌对磺胺六甲、阿奇霉素、米诺环素等8种药物敏感,对环丙沙星、头孢噻肟钠和复方新诺明中敏,而对万古霉素等13种药物低敏甚至不敏感。检测到该分离菌株包含氨基糖苷类、四环素类和磺胺类的6个耐药基因,说明这是一株多重耐药菌株,推测其耐药性与生物膜的形成有密切关系。
- 马玲谭义俊邵帅吴健敏廖文军黄红梅白安斌
- 关键词：凝固酶阴性葡萄球菌生物膜耐药性
- 抗人红细胞单链抗体与猪瘟E2蛋白双功能融合蛋白的构建及生物学活性检测被引量：5
- 2010年
- 为构建具有凝集性、免疫反应性的双功能融合蛋白,本研究采用重叠延伸PCR方法将2E8ScFv(抗人红细胞H抗原单链抗体基因)和mE2(猪瘟病毒E2蛋白主要抗原编码区基因)拼接成融合基因2E8mE2,并插入原核表达载体pET-DsbA,将重组表达质粒pET-DsbA-2E8mE2转化入大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)PlysS中进行IPTG诱导表达,表达的融合蛋白经SDS-PAGE和Western blotting分析鉴定,结果表明:2E8mE2融合基因在大肠杆菌中获得了表达,表达产物以包涵体形式存在,分子量约为65kDa,与预期的大小一致。分别采用亲和层析法和谷胱甘肽再氧化法对融合蛋白进行纯化和复性,红细胞凝集试验证实:2E8mE2融合蛋白复性效果良好,既能够与人红细胞结合,又能够与猪瘟病毒抗体反应,具有双功能特性。
- 覃绍敏白安斌吴健敏廖文军袁书智华俊关忠谊
- 关键词：猪瘟病毒单链抗体
