陈菲菲
- 作品数：6 被引量：17H指数：3
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- 肿瘤增殖细胞核抗原的人白细胞抗原-A2限制性细胞毒T淋巴细胞表位鉴定被引量：2
- 2010年
- 目的 鉴定肿瘤增殖细胞核抗原（PCNA）的人白细胞抗原（HLA）-A2限制性细胞毒T淋巴细胞（CTL）表位,为肿瘤疫苗制备提供依据.方法 根据PCNACTL表位评分结果,合成8条候选肽;采用经典T2-肽结合实验检测候选肽与HLA-A2分子亲和力;采用酶联免疫斑点法（ELISPOT）检测候选肽刺激的HLA-A2阳性CTL分泌干扰素（IFN）-γ能力.结果 T2-肽结合实验结果显示PCNA 14-22、110-118位置候选肽与HLA-A2分子结合力较强,其荧光系数FI值最高,分别为0.30和0.34,显著高于其他候选肽.ELISPOT检测结果显示14-22和39-47位置候选肽形成的IFN-γ斑点数目（477.25±52.08、640.50±145.74）明显高于阴性对照（0.75±0.50）及其余候选肽.结论 PCNA抗原14-22位置候选肽KVLEALKDL可作为HLA-A2限制性CTL表位用于制备肿瘤疫苗.
- 徐为郭贞李慧中底洁慧陈菲菲张宝福宋文哲李海龙刘俊杰郑骏年
- 关键词：细胞毒T淋巴细胞
- 小鼠双侧杏仁核去5-HT支配后的抑郁样行为学变化及杏仁核内FosB／△FosB的异常表达被引量：2
- 2011年
- 目的探讨双侧杏仁核去5-羟色胺（5-HT）支配后小鼠的行为学变化，投射到杏仁核的5-HT能神经纤维的精确来源以及杏仁核神经元的异常功能活动，为验证杏仁核-中缝核群5-HT在抑郁症发病机制中的联系提供实验资料。方法雄性昆明小鼠32只，随机分为对照组和实验组，每组各16只，应用脑立体定位注射技术向双侧杏仁核注射5，7-双羟色胺（5，7-DHT，5μg／侧），悬尾实验和强迫游泳实验检测抑郁行为；脑石蜡切片H—E染色检测5-HT能投射神经元的位置；脑冰冻切片免疫组织化学染色检测杏仁核FosB／AFosB的表达。结果①行为学检测：实验组小鼠强迫游泳无动时间和悬尾无动时间较对照组显著减少（P〈0．01）；②H—E染色：实验组小鼠中缝背核尾侧份与中缝正中核嘴侧份的部分神经元胞体皱缩变形，胞质呈深紫伊红色染色，尼氏小体溶解或消失，胞核缩小或消失；③免疫组织化学染色：FosB／△FosB阳性神经元在实验组小鼠杏仁核明显增多，与对照组相比差异显著（P〈0．01）。结论杏仁核的5-HT能纤维投射主要来自中缝背核的尾侧和中缝正中核的嘴侧；单独的杏仁核去5-HT支配即可引发小鼠产生抑郁样行为；杏仁核内的即早基因FosB／△FosB在抑郁样行为形成的相关精神病理学机制中占有重要地位。
- 陈菲菲刘君涛刘芳宋亮马传响陈幽婷
- 关键词：小鼠杏仁核行为学中缝核群
- Ki-67启动子转录调控结构与功能研究被引量：5
- 2010年
- 目的 观察Ki-67核心启动子调控元件对转录调控的影响.方法 根据Ki-67启动子结构软件分析结果,对Ki-67核心启动子（-223～＋30）内的5个调控区域,包括（＋13～＋30）及4个潜在Sp1结合位点（-198～-172）、（-170～-144）、（-63～-37）和（-14～＋12）进行内部缺失,目的片段缺失的Ki-67核心启动子插入pGL3-Basic载体,构建报告基因重组体质粒.将重组体分别转染肿瘤Hela、SW1990、SGC-7901、A549细胞株,使用双荧光素酶报告基因检测系统测定其转录活性,并与Ki-67核心启动子质粒pGLBK2＋转录活性比较.结果 缺失（＋13～＋30）的启动子重组体质粒在4种肿瘤细胞的转录功能均有显著提高,分别达到缺失前的1.2、2.0、1.7、1.4倍.缺失潜在Sp1结合位点的4个启动子重组体在4种肿瘤细胞的转录功能均有显著降低,其中缺失（-170～-144）后转录活性最小,在4种肿瘤细胞中分别降至未缺失前的16.2%、10.4%、6.7%、12.2%.结论 Ki-67启动子（＋13～＋30）区包含负性调控元件,对其缺失后形成的新的Ki-67核心启动子（-223～＋12）是更好的调控肿瘤基因治疗的启动子.（-198～-172）、（-170～-144）、（-63～-37）和（-14～＋12）可能存在潜在的Sp1顺式作用元件,其中-170～-144区域的顺式作用元件最为重要.
- 李中林钱国伟徐为李望张宝福刘俊杰陈菲菲田卉章龙珍郑骏年
- 关键词：KI-67基因启动子转录调控
- RUNX3参与抑制人前列腺癌迁移和血管发生被引量：6
- 2014年
- 目的研究RUNX3基因对前列腺癌的发生与迁移的影响，并探讨其分子作用机制。方法运用肿瘤组织芯片（tissue microarray，TMA）技术评估RUNX3在前列腺癌发生过程中的作用；分别用RUNX3的真核表达载体pFlag—RUNX3和对照载体pFlag—control转染人前列腺癌细胞系PC3和DU145细胞；细胞迁移实验、细胞侵袭实验和微血管形成实验分别检测RUNX3基因高表达对2种前列腺癌细胞迁移、侵袭和促血管生成能力的影响；利用RT—PCR和Western blot检测RUNX3基因表达后对2种前列腺癌细胞中基质金属蛋白酶抑制因子-2（tissue inhibitor of metalloproteinase-2，TIMP-2）和基质金属蛋白酶-2（metalloproteinase-2，MMP-2）mRNA和蛋白表达的影响；明胶酶谱实验和ELISA实验检测RUNX3基因表达后对2种前列腺癌细胞分泌活性MMP-2和血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）的影响。结果相较于癌旁组织，RUNX3在前列腺癌组织中异常低表达，且与肿瘤分级有关。过表达RUNX3会上调TIMP-2、抑制MMP-2的表达与激活，从而抑制前列腺肿瘤细胞的迁移与侵袭。在前列腺细胞中抑制RUNX3表达会破坏TIMP-2和MMP-2之间的平衡，沉默TIMP-2会抑制MMP-2的表达。恢复RUNX3表达会降低VEGF的分泌，从而抑制内皮细胞生长和血管生成。结论RUNX3通过TIMP-2和VEGF通路对前列腺癌产生抑制作用。
- 陆峥陈菲菲王猛白津刘清华郑骏年
- 关键词：RUNX3前列腺癌血管发生
- Ki-67启动子内Sp1位点与Hela细胞核蛋白结合活性被引量：3
- 2010年
- 目的 观察Ki-67启动子内能与细胞核蛋白结合的转录因子Sp1结合位点,探讨肿瘤细胞Ki-67基因高表达机制.方法 提取Hela细胞核蛋白.针对Ki-67启动子内4个潜在Sp1位点区域A1（-198～-172）、A2（-170～-144）、A3（-63～-37）、A4（-14～＋12）,以及没有Sp1结合位点的阴性对照区域C（-117～-91）,设计相应的Sp1一致性寡核苷酸探针和Sp1突变性寡核苷酸探针,凝胶阻滞电泳实验（EMSA）验证Sp1探针与Hela细胞核蛋白的结合活性.结果 EMSA显示A2、A3、A4一致性探针均可以和Hela细胞核蛋白结合,这种结合可以被相应的100倍浓度非标记的一致性探针竞争抑制,不能被100倍浓度的非标记的突变性探针所抑制.出现结合带的反应中加入Sp1抗体后观察到明显的Supershift现象.A1和C相应探针不能和Hela细胞核蛋白发生结合反应.结论 Ki-67启动子-170～-144、-63～-37和-14～＋12区域上存在能与肿瘤Hela细胞核蛋白结合的Sp1结合位点.
- 李中林钱国伟徐为李望李圆张宝福陈菲菲田卉章龙珍郑骏年
- 关键词：肿瘤细胞KI-67转录因子SP1
- 大鼠视上核和室旁核神经元钾离子氯离子共转运体2表达探讨
- 2008年
- 目的观察神经元特异性标记物钾离子氯离子共转运体2在成年大鼠下丘脑视上核和室旁核的表达。方法成年SD大鼠,4%多聚甲醛灌注固定,取脑,冰冻切片,下丘脑部进行钾离子氯离子共转运体2和神经细胞核抗原免疫荧光染色,激光共聚焦显微镜观察。结果钾离子氯离子共转运体2在视上核和室旁核神经元中表达很弱。结论下丘脑视上核和室旁核部分神经元缺少神经特异性的钾离子氯离子共转运体2表达。
- 王德广张静陈菲菲郑殿杰陈幽婷
- 关键词：视上核室旁核
