郑斌
- 作品数：71 被引量：202H指数：7
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- 相关领域：医药卫生农业科学生物学文化科学更多>>
- GST沉降技术验证弓形虫醛缩酶与肌动蛋白的相互作用被引量：6
- 2011年
- 目的通过GST沉降技术(GST pull-down)验证刚地弓形虫醛缩酶(aldolase)与肌动蛋白(actin)的相互作用。方法 PCR扩增弓形虫cDNA中aldolase和actin基因,分别亚克隆至原核表达质粒pGEX-4T-1和pET30a,转化至大肠埃希菌BL21(DE3),1 mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,亲和层析法纯化表达产物。采用腹部皮内多点注射免疫SD大鼠15只,首次免疫Actin-His6蛋白量为200μg/只,第2次起免疫蛋白量为100μg/只,共免疫4次,每次间隔7 d,末次免疫后5 d收集心脏血,制备Actin-His6抗血清。以纯化的GST-Aldolase蛋白作为探针蛋白与Actin-His6蛋白液进行GST沉降实验,实验产物进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹(Western blotting)分析。结果获得了弓形虫aldolase和actin基因序列,构建了相应的原核表达载体。表达并纯化了GST-Aldolase和Actin-His6蛋白。Actin-His6蛋白免疫SD大鼠后获得其抗血清,经抗体亲和纯化柱纯化,获得Actin-His6多克隆抗体。SDS-PAGE和Western blotting结果显示,GST沉降实验产物中的蛋白条带可被Aldolase-His6多克隆抗体和Actin-His6多克隆抗体识别。结论弓形虫醛缩酶与肌动蛋白存在相互作用。
- 郑斌尹志奎何蔼李卓雅詹希美
- 关键词：刚地弓形虫醛缩酶肌动蛋白蛋白相互作用
- 丝光绿蝇室内连续5代成虫产卵特征观察被引量：3
- 2002年
- 目的 观察丝光绿蝇室内连续人工饲养的各代成虫产卵特征。 方法 将丝光绿蝇引入室内 ,采用人工配制的幼虫饲料在室内进行连续饲养 ,观察记录其室内第 1～ 5代成虫产卵结果。 结果 成虫第 1～ 5代产卵天数 (x± s)分别为 :5 .5 0± 0 .17,8.2 5± 0 .96 ,8.2 5± 0 .5 0 ,7.2 5± 1.5 0 ,8.5 0± 1.2 9;产卵次数分别为 :18.0 0± 1.41,2 7.75± 9.0 0 ,2 3.0 0± 8.12 ,2 3.5 0± 11.5 6 ,33.2 5± 12 .89;第 1、2、4、5代产卵指数分别为 :0 .36 0± 0 .0 18,0 .788± 0 .32 0 ,0 .6 42± 0 .2 91,0 .819± 0 .40 6。室内第 1代产卵天数少于第 2、3、5代 (P<0 .0 5 ) ,与第 4代无显著性差异 ,第 2～ 5代间产卵天数均无显著性差异 ;产卵次数及产卵指数室内第 1～ 5代间均无显著性差异。 结论 本次实验丝光绿蝇引入室内连续饲养的各代成虫产卵特征比较稳定。
- 艾予川许兵红李彩莲彭冬君郑斌
- 关键词：丝光绿蝇饲养产卵
- α-硫辛酸对缺血再灌注脑神经元凋亡的作用被引量：13
- 2005年
- 尹志奎郑斌崔旭黄能慧李诚秀
- 关键词：Α-硫辛酸脑缺血再灌注损伤凋亡
- 弓形虫MIC 6羧基端蛋白片段的表达及其多克隆抗体的制备被引量：7
- 2009年
- 目的克隆表达刚地弓形虫微线体蛋白6羧基端蛋白片段(Tg MIC6C),制备多克隆抗体。方法PCR扩增目的基因片段,克隆到pGEX-4T-1载体上,构建MIC6C/pGEX-4T-1原核表达系统;IPTG诱导表达GST-MIC6C融合蛋白,亲和层析融合蛋白;用纯化的融合蛋白混合免疫佐剂免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体,纯化并分析抗体的特异性。结果构建了MIC6C/pGEX-4T-1原核表达系统并获得纯化的GST-MIC6C融合蛋白;获得了抗目的蛋白的多克隆抗体,抗体能特异地识别目的蛋白,抗体效价为1∶8 000。结论在体外获得了纯化的GST-MIC6C融合蛋白及其多克隆抗体,为后续GSTpull-down筛选与MIC6相互作用的蛋白奠定了基础。
- 郑斌何蔼李卓雅郑小英张瑞琳杨潇詹希美
- 关键词：刚地弓形虫多克隆抗体
- 印度对中国的认知与中国的对策——以《印度时报》(Times of India)2010年对华报道为视角
- 作为两个相邻的发展中大国，中国和印度在当今国际舞台上具有举足轻重的地位。显然，两国间的关系如何，不仅对亚洲地区的繁荣稳定至关重要，而且也对整个世界的和平发展产生深远影响。然而，中印两国友好关系的维护和发展，除了政府层面的...
- 郑斌
- 关键词：国际政治中印关系互动机制
- 丝光绿蝇室内饲养方法的改进被引量：11
- 2002年
- 许兵红艾予川郑斌史明珠彭冬君
- 关键词：丝光绿蝇虫种
- Ⅲ类内含子及其对基因表达的影响被引量：6
- 2005年
- 内含子是指断裂基因中的非编码区序列。根据内含子的核苷酸序列和RNA潜在折叠方式不同,可分成四种类型:I类内含子、Ⅱ类内含子、Ⅲ类内含子和Ⅳ类内含子。Ⅲ类内含子为真核细胞前mRNA中的内含子。它可以启动某些基因的表达,影响基因的表达量;增加mRNA分子的稳定性;并通过选择性剪接调控基因的表达。Ⅲ类内含子可以提高转基因动物基因的表达效率。因此,基因工程中,为了提高表达效率,是选用基因组基因还是cDNA基因,应视具体基因而定。
- 郑斌詹希美
- 关键词：内含子MRNA基因表达选择性剪接转基因动物
- 弓形虫actin蛋白多克隆抗体的制备及纯化
- 2013年
- 目的制备弓形虫肌动蛋白(actin)的多克隆抗体并纯化。方法以弓形虫cDNA链为模板PCR扩增1 131bp actin基因,亚克隆至pET30a载体后转化入大肠埃希菌BL21中,用1mmol/L IPTG诱导表达actin-His6蛋白,采用亲和层析法纯化;取200μg纯化蛋白加等量佐剂混合,免疫SD大鼠4次,收集抗血清,用亲和纯化柱纯化。结果 PCR扩增出actin基因并成功构建actin/pET30a/BL21表达系统,获得actin-His6蛋白,制备的大鼠源性actin-His6蛋白多克隆抗体纯化后为单一蛋白抗体。结论制备并纯化了抗弓形虫actin的多克隆抗体,为弓形虫入侵机制的研究奠定了基础。
- 郑斌尹志奎詹希美
- 关键词：弓形虫肌动蛋白多克隆抗体
- 刚地弓形虫醛缩酶蛋白的表达及其多克隆抗体的纯化被引量：8
- 2011年
- 目的:体外制备弓形虫醛缩酶(aldolase)蛋白及其多克隆抗体。方法:以弓形虫cDNA链为模板,PCR扩增醛缩酶基因,构建aldolase/pET30a原核表达系统;IPTG诱导表达aldolase-His6蛋白;用纯化的蛋白加免疫佐剂免疫SD大鼠,收集抗血清,制备多克隆抗体,亲和层析纯化并分析抗体的效价。结果:构建了aldolase原核表达系统,表达并纯化了aldolase-His6蛋白;获得了抗该蛋白的大鼠源性抗血清,纯化后的多克隆抗体效价为1∶4000。结论:在体外制备并纯化了aldolase-His6蛋白及其多克隆抗体,为后续研究aldolase的功能奠定了基础。
- 尹志奎邓智建郑斌
- 关键词：刚地弓形虫醛缩酶蛋白表达多克隆抗体
- 毛叶香茶菜二萜成分的提纯鉴定及抗肿瘤作用
- 白素平张小毅魏贻坡雒国胜郑斌邱培勇杨利敏尹延彦陈洪涛张洁
- 所属学科领域：该项目属于药物与生物医学院工程学科，天然药物研究与开发领域。主要内容项目以广泛分布于河南省民间用于治疗各种癌症的毛叶香茶菜(Isodonjaponica)及其变种蓝萼香茶菜(Isodonjaponicava...
- 关键词：
- 关键词：抗肿瘤作用天然抗肿瘤药物
