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胡西华

作品数：1 被引量：1H指数：1
供职机构：中国医科大学更多>>
发文基金：辽宁省高校创新团队支持计划国家自然科学基金更多>>
相关领域：生物学更多>>

合作作者

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇生物学

主题

  • 1篇转染
  • 1篇细胞
  • 1篇DOC-1R
  • 1篇HELA细胞

机构

  • 1篇中国医科大学

作者

  • 1篇刘琦
  • 1篇高锦兰
  • 1篇罗阳
  • 1篇胡西华
  • 1篇刘杏

传媒

  • 1篇解剖科学进展

年份

  • 1篇2012
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
DOC-1R基因重组表达载体构建及其在HeLa细胞中的表达被引量：1
2012年
目的 构建人DOC-1R基因重组逆转录病毒表达载体,实现该基因在体外培养细胞中的大量表达,从而研究表达蛋白的功能。方法 通过重组技术将含有FLAG标签序列的DOC-1R cDNA编码区全长克隆至逆转录病毒载体pLXSN,菌落PCR鉴定、限制性内切酶双酶切及测序验证重组载体的构建。将重组载体转染至GP-293细胞进行病毒包装并以所包装的病毒感染HeLa细胞,通过Western blot及间接免疫荧光染色检测重组DOC-1R蛋白的表达及细胞内定位。结果 测序结果表明重组载体中插入的重组片段序列及开放阅读框架正确,逆转录病毒表达载体pLXSN-FLAG-DOC-1R成功构建。Western blot及间接免疫荧光染色结果证实,逆转录病毒介导的重组DOC-1R蛋白在HeLa细胞中高效表达,表达效率明显高于真核表达载体介导的重组蛋白表达。结论 DOC-1R基因逆转录病毒表达载体成功构建,重组蛋白在体外培养细胞正确高效表达。
刘琦刘杏高锦兰胡西华罗阳
关键词：DOC-1R转染
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