罗阳
- 作品数：102 被引量：163H指数：7
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- 相关领域：医药卫生生物学农业科学文化科学更多>>
- cyclinG2表达载体的构建及其对人胃癌细胞生长的作用
- 2006年
- 目的:构建包含人cyclinG2基因的真核表达载体,并探讨其对人胃癌细胞体外生长的作用。方法:从POE4细胞总RNA反转录产物中扩增出cyc-linG2cDNA,亚克隆至双顺反子真核表达载体pIRESneo中获得pIRES-G2重组质粒,基因转染SGC-7901细胞,G418筛选阳性克隆,免疫蛋白印迹杂交方法检测cyclinG2蛋白表达情况,平板克隆形成能力和四甲基噻唑蓝(MTT)比色法对转染后细胞的增殖活性进行分析。结果:成功构建包含cyclinG2基因真核重组表达载体pIRES-G2;转染pIRES-G2的SGC-7901细胞克隆的增殖活性明显下降。结论:cyclinG2基因转染后SGC-7901细胞体外增殖能力下降。
- 刘洁田玉楼崔泽实罗阳满晓辉张学
- 关键词：细胞周期蛋白类转染胃肿瘤基因
- 丝裂霉素C与C_2-神经酰胺联合应用治疗膀胱癌被引量：5
- 2006年
- 目的观察丝裂霉素C(MMC)与C2-神经酰胺(C_2-cer)联合应用对人膀胱癌细胞的作用效果,并探讨其机制。方法不同浓度MMC与C_2-cer单独及联合作用于人膀胱癌BIU-87细胞后,应用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞生长抑制率,计算合用指数(CI),流式细胞仪(FCM)检测BIU-87细胞凋亡率,吖啶橙(AO)荧光染色观察凋亡形态学变化,Western blot检测细胞色素C在细胞内分布变化,并检测Caspase-3活性改变。结果单独应用时MMC与C_2-cer的中效浓度分别是159和28μmol/L,联合用药时下降为55和11μmol/L,CI=0．74。MMC与G_2-cer单独及联合应用均可导致BIU-87细胞出现凋亡的形态学变化。两种药物联合应用时的凋亡率高于各自单用(P＜0．05)。线粒体细胞色素C含量在MMC与C_2-cer单独及联合应用时均较对照组减少,联合用药时减少最为明显,细胞质内细胞色素C含量在联合用药时增加也最为明显(P＜0．05)。Caspase-3活性在MMC与C_2-cer单独及联合应用时均较对照组升高,联合用药时升高最为明显(P＜0．05)。结论MMC与C_2-cer联合应用可以通过共同诱导细胞凋亡,协同抑制膀胱癌细胞生长。线粒体细胞色素C释放和Caspase-3活性变化可能发挥重要作用。
- 时京孔垂泽孙志熙王侠罗阳刘奔张莹刘博
- 关键词：膀胱肿瘤丝裂霉素C神经酰胺脱噬作用
- 人EPHA2基因突变表达载体的构建及鉴定
- EPHA2基因位于人类染色体1p36,其编码的EPHA2蛋白属酪氨酸蛋白激酶受体,在人类晶体上皮细胞和纤维细胞有大量表达,通过与其配体ephrin的结合指导细胞间的相互作用,来维持晶体细胞正常形状和高度有序排列,从而终生...
- 李靖岩罗阳王述森张学
- 关键词：先天性白内障EPHA2真核表达载体
- Cornelia de Lange综合征致病基因突变分析
- 目的 Cornelia de Lange综合征(Cornelia de Lange Syndrome)是一类罕见的累及多器官系统的遗传异质性疾病,主要特征是特殊面容、胎儿宫内及出生后生长迟滞、多毛症、上肢复位缺陷,常见的...
- 邢雪莎刘双黎芳麻宏伟罗阳
- 关键词：DE突变分析
- 胃癌与癌旁组织miRNA差异表达谱的研究被引量：3
- 2010年
- 目的研究胃癌中表达失调的miRNA及其生物学功能，从而进一步阐明miRNA在胃癌发生中的分子机制。方法将总RNA加ploy（A）尾后进行反转录PCR扩增特异miRNA，使用QuantityOne软件进行定量分析，计算每对样本胃癌与癌旁组织比值（T／NRatio），使用SAM软件进行统计分析。MTT法检测miR-21和miR-17-5p对胃癌细胞系生长的影响。结果在8对胃癌及癌旁组织样本中对237个miRNA进行了表达谱分析。对于检测到表达的161个miRNA，使用SAM软件进行统计分析，确认22个在胃癌中表达上调，2个在胃癌中表达下调（FDR=0．0963）。进一步通过生长抑制试验证实在胃癌组织中表达异常增高的miR-21和miR-17-5p对胃癌细胞的生长有明显的促进作用。结论这些在胃癌中异常表达的miRNAs具有成为新一代胃癌标记物的潜力，能够为胃癌的精确诊断分型提供依据，同时针对这些靶点可以开发新的核酸治疗技术，通过抑制或增强其功能来达到治疗胃癌的目的。
- 张岱王振宁罗阳徐岩刘彦山杨威张学
- 关键词：胃癌MIRNA表达谱MIR-21
- 基因诊断佩-梅病一例
- 2009年
- 患儿男，11个月，因“不能扶站”到我院发育儿科门诊就诊。患儿系第1胎第1产，足月，剖宫产，出生体重5妇，否认窒息史。母亲描诉患儿生后眼球水平震颤持续9个月，发育落后于同龄儿，6个月方能抬头，7个月会翻身，8个月会坐，一直不会扶站，语言发育与同龄儿基本相似。无癫痫发作，无吞咽困难和喘鸣。父母非近亲结婚，母孕5个月时有过一次感冒，未发烧，无用药史，无X射线接触史，否认家族史（患儿3位舅舅均正常）。查体：身长80cm，体重11kg，头围46cm，
- 麻宏伟鹿蕾娜马健张阳刘芳罗阳戴晓梅
- 关键词：基因诊断出生体重发育落后门诊就诊语言发育近亲结婚
- DOC-1R基因重组表达载体构建及其在HeLa细胞中的表达被引量：1
- 2012年
- 目的 构建人DOC-1R基因重组逆转录病毒表达载体,实现该基因在体外培养细胞中的大量表达,从而研究表达蛋白的功能。方法 通过重组技术将含有FLAG标签序列的DOC-1R cDNA编码区全长克隆至逆转录病毒载体pLXSN,菌落PCR鉴定、限制性内切酶双酶切及测序验证重组载体的构建。将重组载体转染至GP-293细胞进行病毒包装并以所包装的病毒感染HeLa细胞,通过Western blot及间接免疫荧光染色检测重组DOC-1R蛋白的表达及细胞内定位。结果 测序结果表明重组载体中插入的重组片段序列及开放阅读框架正确,逆转录病毒表达载体pLXSN-FLAG-DOC-1R成功构建。Western blot及间接免疫荧光染色结果证实,逆转录病毒介导的重组DOC-1R蛋白在HeLa细胞中高效表达,表达效率明显高于真核表达载体介导的重组蛋白表达。结论 DOC-1R基因逆转录病毒表达载体成功构建,重组蛋白在体外培养细胞正确高效表达。
- 刘琦刘杏高锦兰胡西华罗阳
- 关键词：DOC-1R转染
- 野生型ADAR1蛋白与其R916W突变体在哺乳动物细胞中相互作用的研究被引量：1
- 2007年
- 目的:应用酵母双杂交和哺乳动物双杂交系统研究野生型双链RNA腺苷酸脱氨基酶ADAR1蛋白(ADAR1WT)与其突变体R916W(ADAR1R916W)之间的相互作用,从而探讨ADAR1基因错义突变在遗传性对称性色素异常症中的分子致病机制。方法:通过RT-PCR方法从患者外周血白细胞中获得含ADAR1基因R916W突变的全长cDNA,将野生型和突变cDNA分别克隆到相关质粒载体上,利用MatchmakerTMGAL4酵母双杂交系统3和CheckMateTM哺乳动物双杂交系统检测蛋白单体间的相互作用。结果:在酵母细胞中未检测到野生型-野生型ADAR1蛋白及野生型-突变体ADAR1蛋白间的相互作用;与对照细胞相比,pBIND-ADAR1WT和pACT-ADAR1WT共转染的HeLa细胞中荧光素相对活性显著升高(P<0.05);与共转染pBIND-ADAR1WT和pACT-ADAR1WT的HeLa细胞比较,pBIND-ADAR1R916W和pACT-ADAR1WT共转染的细胞中荧光素相对活性明显降低(P<0.05),为前者的66%。结论:在哺乳动物细胞中ADAR1WT自身相互作用,ADAR1WT和ADAR1R916W突变体蛋白相互作用依然存在但作用明显减弱。
- 刘扬柳青赵谨吕丹华芮罗阳张学
- 关键词：酵母双杂交系统
- Cyclin G2抑制胃癌细胞增殖的实验研究被引量：4
- 2007年
- 目的研究cyclinG2对体外培养胃癌细胞增殖能力的影响,探讨cyclinG2作为肿瘤干扰阻断药靶的有效性和临床使用性。方法应用脂质体转染技术将包含有cyclinG2cDNA的pIRES-G2和对照空质粒pIRES-neo分别转染胃癌细胞株SGC-7901,经G418(400μg/mL)选择性培养基筛选两周后获得转入cyclinG2基因的细胞克隆,通过细胞化学法和免疫蛋白印迹杂交检测外源性cyclinG2蛋白表达情况;倒置显微镜下观察克隆细胞形态,Giemsa染色后进行克隆计数。结果转染pIRES-G2获得的细胞克隆中cyclinG2蛋白的表达水平明显高于转染pIRESneo,表明cyclinG2基因被成功地转入SGC-7901细胞稳定表达;转染pIRES-G2组的阳性细胞集落数目明显减少,pIRESneo组的集落数为(87±3),pIRES-G2组的集落数为(53±4),占对照组的60.1%(P<0.01);与对照组相比,pIRES-G2组集落内细胞数目减少,细胞皱缩,形态变得不规则,胞质内出现大量颗粒和空泡。结论cyclinG2可显著抑制体外培养胃癌细胞的增殖,并可能和肿瘤细胞信号传导系统存在某种联系。
- 刘洁崔泽实罗阳满晓辉张学
- 关键词：CYCLING2胃癌基因转染细胞抑制
- 人氨基肽酶N的基因变异研究
- 氨基肽酶N(aminopeptidase N,APN)(又称CD13)是人类呼吸冠状病毒229E(HCoV-229E)和猪传染性胃肠炎病毒(TGE)等血清Ⅰ型(serogroup Ⅰ)冠状病毒S蛋白的细胞受体。SARS-...
- 罗阳姜莉敖雪吕志张学
- 关键词：SARS冠状病毒变性高效液相色谱单核苷酸多态
- 文献传递
