公共文化服务平台

共 5 条记录，以下是 1-5

全选清除导出

排序方式：

肝脏去唾液酸糖蛋白受体特异性RNA适配子的SELEX筛选与鉴定被引量：2: 2009年; 目的获得能够特异性高亲和力结合肝脏特异性去唾液酸糖蛋白受体（asialoglycoprotein receptor，ASGPR）的RNA适配子，为开发诊断和治疗肝脏疾病的靶向性试剂和药物奠定基础。方法合成一个长度为115nt含有25个随机序列的单链DNA随机文库，通过体外转录构建出单链RNA适配子随机文库，以肝脏ASGPR大亚基为靶蛋白，采用SELEX（systematic evolution of ligands by exponential enrichment）技术筛选具有高亲和力的AsGPR特异性RNA适配子；通过膜结合测定实验、凝胶阻滞实验鉴定筛选适配子对靶蛋白的特异性和亲和力。结果经过12轮筛选获得了具有高亲和力的肝脏ASGPR特异性RNA适配子。结论成功地筛选出了具有离亲和力的肝脏ASGPR特异性RNA适配子库。; 刘嘉杨燕胡斌马智勇余源黄红平陆蒙吉冯新华郭培宣杨东亮; 关键词：适配子 SELEX技术去唾液酸糖蛋白受体

表达HBsAg特异性siRNA的重组腺相关病毒载体的构建被引量：6: 2010年; 目的构建表达针对HBsAg小发卡RNA(shRNA)的重组腺相关病毒载体,以观察该病毒在体外对HBsAg和HBeAg的抑制作用。方法将表达针对HBsAg的shRNA定向克隆到pAAV/U6-hrGFP质粒中,获得重组表达质粒(pAAV-shHBs-hrGFP);采用磷酸钙转染法将该质粒与包装质粒pAAV-RC和辅助质粒pHelper共同转染AAV293细胞,进行rAAV-shHBs-hrGFP重组病毒包装。收获病毒感染HepG2.215细胞;采用ELISA法检测HBsAg和HBeAg水平。结果酶切鉴定、测序结果表明,pAAV-shHBs-hrGFP载体成功构建。包装收获的rAAV-shHBs-hrGFP病毒液可以感染HepG2.215细胞,并且可以抑制HBsAg和HBeAg的表达。结论制备的rAAV-shHBs-hrGFP病毒载体能够抑制HBV在体外的抗原表达。; 胡斌杨燕刘嘉马智勇黄红平余源刘慎沛杨东亮; 关键词：RNA干扰 HBSAG

三种常见肝细胞系免疫相关分子的表达被引量：2: 2010年; 目的探讨三种常见肝细胞系Huh7、HepG2、HepG2.2.15免疫相关分子的表达。方法提取三种细胞的RNA并逆转录合成cDNA,用PCR方法检测细胞因子及其受体、MHC分子的表达情况。结果三种细胞均能表达Ⅰ型干扰素及干扰素受体、IL-7、IL-15等细胞因子,也能表达HLA-A、HLA-B、HLA-DP、HLA-DR及非经典的CD1d、MICB等MHC分子及其相关基因,HepG2、HepG2.2.15表达MICA。三种细胞均不表达IL-4、IL-5、IL-6、IFN-γ等细胞因子。与内参相比,IL-7及IL-15、HLA-A等的表达在HepG2和HepG2.2.15之间存在一定的差异。结论三种肝细胞系能表达Ⅰ型干扰素及干扰素受体、IL-7、IL-15、HLA等一系列的免疫相关分子。; 刘敏郝友华胡斌宋景娇马德强徐春利陆蒙吉杨东亮; 关键词：肝细胞干扰素白细胞介素

抗人ASGPR大亚基异构体蛋白H1b多克隆抗体的制备和鉴定被引量：3: 2009年; 目的:制备小鼠抗人ASGPR大亚基异构体蛋白H1b的多克隆抗体,并鉴定其特异性。方法:合成H1b特异性多肽,以匙孔血蓝蛋白(KLH)作为载体构建多肽免疫原,通过致敏小鼠,制备小鼠抗人H1b蛋白的多克隆抗体;ELISA法检测抗体效价,通过Western blot和免疫组织化学检测,鉴定抗体的特异性与适用范围。结果:得到小鼠抗人H1b蛋白的多克隆抗体,效价达1∶105。纯化后的抗体用于Western blot可高特异性识别真核表达的H1b蛋白,并可用于免疫组织化学实验。结论:成功制备小鼠抗人H1b蛋白的多克隆抗体,该抗体具有较高的效价以及特异性,能区分ASG-PR大亚基的两种剪接异构体,从而为进一步研究H1b蛋白的生理功能及其在人类疾病中的意义提供了有利工具。; 刘嘉丁红晖杨燕胡斌余源黄红平陆蒙吉杨东亮; 关键词：去唾液酸糖蛋白受体多克隆抗体剪接异构体

表达人去唾液酸糖蛋白受体分子细胞系的建立: 2009年; 目的构建稳定表达人肝细胞表面分子去唾液酸糖蛋白受体（asialoglycoprotein receptor，ASGPR）的细胞系。方法逆转录PCR扩增人肝组织ASGPR大亚基H1全编码序列，插入到真核表达载体plRES2EGFP中，重组质粒pIRES2EGFP／ASGPRH1转染HeLa细胞，G418筛选，RT—PCR，Western印迹及免疫荧光检测ASGPRH1的表达。结果成功构建了pIRES2EGFP／ASGPRH1重组质粒，该质粒转染HeLa细胞后，Western印迹及免疫荧光均检测到ASGPRHI蛋白的表达。结论成功建立了稳定表达人ASGPRH1的细胞系，为进一步研究ASGPR分子奠定了基础。; 胡斌杨燕刘嘉马镭勇郝友华黄红平杨东亮; 关键词：去唾液酸糖蛋白受体真核表达稳定转染

全选清除导出

共1页<1>

胡斌