童涌
- 作品数：5 被引量：1H指数：1
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- 重组细胞株CHO-105C3无血清培养及人促红细胞生成素的表达
- 1997年
- 促红细胞生成素(EPO)是人体红系造血的特异性调节因子,它具有促进红系祖细胞生长、分化发育的功能。许多资料表明,肾脏是EPO的主要来源,严重肾功能紊乱患者。
- 韩凤来周向军范大钧童涌童涌陆德如
- 关键词：人促红细胞生成素细胞计数肾功能紊乱红系造血
- 人血小板生成素cDNA的克隆及在COS-7细胞中的表达
- 1998年
- 目的：克隆人血小板生成素（ｈＴＰＯ）ｃＤＮＡ，并研究其在ＣＯＳ－７细胞中的表达。方法：通过ＲＴ－ＰＣＲ法获得ｈＴＰＯｃＤＮＡ，测序后克隆到真核表达载体ｐＥＤ上，以ＤＥＡＥ－ｄｅｘｔｒａｎ法转染ＣＯＳ－７细胞，巨核细胞集落形成培养法测表达产物活性。结果和结论：获得的ｈＴＰＯｃＤＮＡ和文献报道的序列一致。转染细胞ＲＮＡ斑点杂交结果显示ＴＰＯｃＤＮＡ获得转录，转染后４８和７２ｈ的细胞上清均可测到ＴＰＯ活性。ｐＥＤ是一个表达较高的真核表达载体。
- 童涌戴建新陈蕊雯周永春孙树汉陆德如
- 关键词：人血小板生成素基因表达CDNACOS-7细胞
- 人红细胞生成素cDNA在COS7细胞中高效表达被引量：1
- 1993年
- 利用基因重组、PCR扩增、定点突变及转译优化等程序,构建了人红细胞生成素重组表达载体pCSV-EPO,并利用DEAE-dextran法转染猴细胞系COS7获得了EPO的暂时性高表达,EPO-ELISA定量测定表达水平:转染后48h收集的上清EPO量为25ng/ml,72h为17ng/ml。
- 曹韫旭周向军童涌娄永华温肇荣陆德如
- 关键词：红细胞生成素突变基因转移
- 人促血小板生成素cDNA的分子克隆及其在哺乳动物细胞中的表达
- 促血小板生成素(TPO)可刺激巨核细胞分化、成熟,形成血小板.它存在于人外周血中,对血液中血小板含量进行调节.作为一种细胞因子,TPO通过它的受体c-MPL传递信号,在促血小板生成系统中起着重要的作用.该文以RT-PCR...
- 童涌
- 关键词：促血小板生成素反转录-聚合酶链式反应COS7细胞CHO细胞
- 转译优化对EPO基因在COS7细胞中表达的影响
- 1994年
- 利用COS7细胞暂时表达系统,研究转译起始序列对EPO-cDNA表达的影响。通过DNA重组技术,构建了原EPO-cDNA表达载体pCSV-EPO(1),其转译起始序列为5＇AATTCATGG3＇。同时通过定点突变技术,将起始序列改变成5＇CCACCATGG3＇,而构建了另一表达载体pCSV-EPO(2)。后者经序列分析证明无误后和前者均通过DEAE-dextran法转染COS7细胞,用ELISA法定量测量EPO表达水平,转染后48小时及72小时收集含pCSV-EPO(1)的COS7细胞上清,测定结果为1580pg/ml及954pg/ml,而含pCSV-EPO(2)的上清则为25300pg/ml和17450pg/ml。这表明经优化起始序列的基因表达远高于未经优化的。
- 童涌周向军曹韫旭温肇荣陆德如
- 关键词：促红细胞生成素基因表达COS7细胞
