娄永华
- 作品数：60 被引量：172H指数：7
- 供职机构：上海长征医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金“九五”国家科技攻关计划国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程轻工技术与工程更多>>
- 重组人可溶性血管内皮细胞生长抑制因子对S-180肉瘤生长的抑制作用
- 2002年
- 目的 研究重组人可溶性血管内皮细胞生长抑制因子 (VEGI)对小鼠异体种植 S- 180肉瘤生长的抑制作用。 方法 用不同剂量 VEGI分别治疗皮下和腹腔种植 S- 180肉瘤的小鼠 ,连续 7天。 30天后处死小鼠 ,剥离肿瘤并称重 ,计算每组平均瘤重和抑瘤率 ;记录腹腔种植组小鼠的死亡时间 ,观察治疗制剂对小鼠寿命的影响。采用免疫组织化学 Envision二步法对肿瘤组织进行分析。 结果 VEGI治疗组 (5 .0 ,10 .0 ,2 0 .0μg/ kg)的平均瘤重分别为 2 .92± 2 .0 5 g,1.92± 0 .31g和 1.0 6± 0 .0 5 g,明显小于 PBS对照组 (10 .33± 2 .15 g,P<0 .0 1) ,抑瘤率分别为 71.73% ,81.41%和 89.74% ;并可明显延长腹腔荷 S- 180肉瘤小鼠的生存时间 (P<0 .0 1)。每 mm2 肿瘤组织切片中 ,VEGI治疗组 (10 .0μg/ kg)的阳性血管内皮细胞数为 117± 10个 ,PBS对照组 2 41± 34个 (P<0 .0 5 )。 结论 VEGI通过抑制体内肿瘤组织中血管的生成抑制了恶性肿瘤的生长 ,显示出显著的抗肿瘤活性。
- 刘英苏东辉娄永华焦炳华
- 关键词：血管内皮生长因子肿瘤种植肉瘤新生血管化病理性
- 抗癌新药-重组改构人肿瘤坏死因子
- 焦炳华夏阳王梁华娄永华周丙荣朱玉平马晓鹏郭伟
- 本品是采用蛋白质工程技术，通过对野生型（原型）肿瘤坏死因子定点突变而获得的一个高效、低毒的衍生物，具有自主知识产权（中国发明专利：95331133.X）。该项目分别被列为“八五”、“九五”国家重点科技攻关计划课题（85-...
- 关键词：
- 关键词：肿瘤坏死因子抗癌药物
- 中国姥鲨软骨活性成分及其人同源分子的克隆、表达及活性研究
- 中国姥鲨软骨组织经盐酸肌抽提、超滤、Sephacryl S-200和Superdex 75层析可得到分子量分别为15.2和8.3kDa的活性物质,并分别命名为Sp15和Sp8.Sp8体外可抑制血管内皮细胞增殖,在体内具有...
- 焦炳华陈建鹤缪为民王梁华朱玉平娄永华缪辉南
- 文献传递
- 新型重组人肿瘤坏死因子衍生物及其制法
- 本发明提供了一种人肿瘤坏死因子α衍生物，在人肿瘤坏死因子α衍生物的氨基酸序列中至少在80，90和92中任何一位或二位或三位有变化。更佳地在人肿瘤坏死因子α衍生物的氨基酸序列中80位为丝氨酸和/或90位为组氨酸和/或92位...
- 焦炳华娄永华余伟民周炳荣王梁华
- 文献传递
- 可溶性血管内皮细胞生长抑制因子基因的克隆与表达被引量：5
- 2000年
- 目的 :对可溶性人血管内皮细胞生长抑制因子 (vascular endothelial growth inhibitor,VEGI)基因进行克隆和表达 ,检测表达产物对血管内皮细胞增殖的抑制活性。方法 :将可溶性人 VEGI基因克隆入载体 p U C19后测序 ;再将正确的 VEGI基因亚克隆入表达载体 p PROEXHTb,IPTG诱导表达 ;初步纯化表达产物 ,检测对新生牛主动脉内皮细胞增殖抑制活性。 结果 :可溶性人 VEGI可以直接抑制新生牛主动脉内皮细胞的增殖。结论 :VEGI是一种新的内皮细胞生长抑制因子 ,通过抑制新生血管形成可用于肿瘤治疗。
- 肖扬娄永华王路朱玉平焦炳华
- 关键词：血管内皮细胞生长抑制因子基因克隆基因表达
- 诱导活化的外周血单个核细胞THANK表达的初步研究被引量：2
- 2001年
- 目的分析不同刺激下外周血单个核细胞(PBMC)中THANK基因的表达，并克隆全长的人THANK基因。方法采用将常规方法分离的外周血单个核细胞(PBMC)培养于含100ml/L FCS的RPMI 1640中，并以不同浓度的LPS、TNF-α、IL-2、IFN-γ、PHA及PMA刺激不同时间。以RT-PCR法，分析PMBC中THANK基因的转录表达，并克隆相应的全长人THANK基因。结果RT-PCR分析表明，当用IFN-γ刺激PMBC 72h后，可诱导THANK基因明显表达;而IL-2、LPS、TNF-α、PHA和PMA则不能诱导其表达。采用PCR产物克隆的方法，克隆了人THANK基因，并经DNA序列测定证实。结论克隆得到了人THANK基因，为进一步研究THANK的功能打下了基础。
- 吴东沈锋娄永华焦炳华吴孟超
- 关键词：外周血单个核细胞THANK基因克隆
- 新型重组人肿瘤坏死因子衍生物及其制法
- 本发明提供了一种人肿瘤坏死因子α衍生物，在人肿瘤坏死因子α衍生物的氨基酸序列中至少在80，90和92中任何一位或二位或三位有变化。更佳地在人肿瘤坏死因子α衍生物的氨基酸序列中80位为丝氨酸和/或90位为组氨酸和/或92位...
- 焦炳华娄永华余伟民周炳荣王梁华
- 文献传递
- 重组人肿瘤坏死因子a衍生物3a研究的综合报告被引量：1
- 2002年
- 目的 :将采用点突变技术获取的重组人肿瘤坏死因子α衍生物 3a(rh- TNFα- D3a)研究开发为临床新药。方法 :与野生型 TNFα比较 ,采用动物体内抑瘤试验测定其 ED50 ;急性毒性试验测定 L D50 ;长期毒性试验测定安全剂量并观察毒性反应发生的程度 ; 期临床试验观察人体可耐受的安全剂量 ; - 期临床试验观察其对肿瘤患者的临床疗效。 结果 :rh- TNFα-D3a体内抑瘤的 ED50 为其野生型的 2 / 3;L D50 为野生型的 11倍 ;恒河猴长期毒性的安全剂量为日本同类产品 PT0 5 0的 6 4倍 ; 期临床试验表明 ,≤ 2× 10 6 IU/ (m2· d)× 7d为人体可耐受的安全剂量 ,本品与野生型药物比较 ,其毒性反应的发生率及反应程度远远降低 ; - 期临床试验表明 ,胸腔内注射对恶性胸水 ,静脉途径对多种实体瘤包括恶性淋巴瘤、乳腺癌、恶性黑素瘤和肾癌等均有较好的疗效。 结论 :研制新一代高效。
- 焦炳华娄永华王梁华朱玉平周丙荣
- 关键词：抗肿瘤药
- 大鼠腹腔感染致早期肺损伤的模型制备及机理探讨
- 目的 制备肠源性感染致早期肺损伤的动物模型,并探讨其作用机理.方法 采用大鼠盲肠结扎并穿孔(CLP)造成腹腔感染.分别在0、24、48、72、96、120h处死一组大鼠,检测肺毛细血管通透性、肺湿/干比值,取支气管肺泡灌...
- 朱义用景炳文娄永华
- 文献传递
- 重组人肿瘤坏死因子a衍生物3a的克隆与表达被引量：2
- 2002年
- 目的 :寻找具有更强抗肿瘤活性和 (或 )较低毒副作用的 TNFα突变蛋白。 方法 :应用巨引物二轮 PCR技术对rh- TNFα的第 80、90和 92位氨基酸编码的密码子进行定点突变 ,经过 DNA序列测定证实 DNA突变准确后 ,将突变基因的c DNA插入 p BL载体 ,转化大肠杆菌 DH5α,获得表达 rh- TNFα- D3a的工程菌。 结果 :经巨引物二轮 PCR获得表达 TNFα突变蛋白的基因突变 ,经序列测定结果与设计一致 ,重组蛋白表达量占细菌总蛋白 18.0 % ,大部分为可溶性 ,占 rh- TNFα- D3a总量的 6 0 %以上。重组蛋白经纯化 ,纯度 >98%。 rh- TNFα- D3a对 L 92 9细胞表现出较高的细胞毒性 ,比活性大于 5× 10 8IU / mg。与野生型的 rh- TNFα相比 ,rh- TNFα- D3a的毒性降低为野生型的 1/ 10 ,同时其保留了 TNFα的抗肿瘤活性。 结论 :rh- TNF-αD3a是一个毒性较低 。
- 娄永华焦炳华周丙荣王梁华余伟民朱玉平
- 关键词：点突变聚合酶链反应克隆
