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雷公藤总甙对 T 细胞增殖的抑制作用部分经由 cAMP被引量：6: 1992年; 用0.15μg/mlPHA 诱导 T 细胞活化作模型,发现 TⅡ(5μg/ml)和 Bt_2cAMP(500μm)均能抑制 T 细胞从 Go 相进入 G_1a 相和从 G_1a 进入 G_1b 相,并抑制活化抗原 Tac、Ia、T(?) 和4F2的表达.TⅡ和Bt_2cAMP 还抑制活化 B 细胞在外源性 IL—2诱导下进入 S 相和 G_2/M 相.另外,T Ⅱ和 Bt_2cAMP 还抑制 T细胞在1.5μg/mlPHA 诱导下产生 IL-2。TⅡ和 Bt_2cAMP 的上述作用十分相似.有趣的是,TⅡ和 T细胞一起培养30小时,T 细胞中 cAMP 量明显增多。cAMP 增加程度与 TⅡ剂量正相关。上述结果提示,TⅡ对 T细胞增殖的抑制作用至少部分经由 cAMP.; 朱立平董彦章蒋明王汛阎春丽; 关键词：CAMP 细胞增殖

从人活化B细胞株3D5细胞λgtll cDNA文库筛选到的1529bp cDNA的核苷酸序列分析: 1996年; 对用单抗５Ｃ５和单抗５Ｃ５－Ｇ１的混合物从３Ｄ５细胞λｇｔｌｌｃＤＮＡ文库筛选到的７个阳性ｃＤＮＡ克隆中的１个（３Ｄ５－５）进行了核苷酸序列分析。由于３Ｄ５－５ｃＤＮＡ长１．６ｋｂ左右，不能直接测序，故先依测序用质粒ｐＢＳｃｒｉｐｔ－ＫＳ多克隆位点中的内切酶点行单酶切，经电泳分析画出测序用的物理图谱，再用相应内切酶行单酶酶切。藉低熔点琼脂糖回收各个片段。带质粒ｐＢＳｃｒｉｐｔ－Ｋ５的大片段经直接自身环化，小片段与质粒载体ｐＢＳｃｒｉｐｔ－ＫＳ重组，构建测序用的亚克隆。用双链双脱氧末端终止法测各亚克隆的核苷酸序列，再拚接出全长为１５２９ｂｐ的３Ｄ５－５ｃＤＮＡ全长序列。与国际基因库资料比较，未见有相同的序列。此ｃＤＮＡ中有一个长４６５ｂｐ（从５４０ｂｐ－１００４ｂｐ）的ＯＲＦ，编码１５４个氨基酸的蛋白质。此蛋白质中有二个疏水区（第１～３４位氨基酸及第７９～１０９位氨基酸），提示它可能属Ⅰ类穿膜蛋白。; 石伟朱立平崔莲仙张立新张淑珍王汛李国燕; 关键词：CDNA DNA B细胞

液氮保存细胞表面抗原的流式细胞仪分析: 1992年; 在免疫学研究中,用间接免疫荧光技术检测细胞表面抗原是鉴别细胞种类及细胞亚群分析中常用的方法。近年来,用流式细胞仪替代荧光显微镜以检测细胞表面抗原日益增多。但在临床样品检测中常因仪器或其它原因,不能立即检测,而需把细胞(如外周血单一核细胞)先贮存于液氮中.但液氮冻存细胞常使部分细胞死亡.由于荧光素标记物能穿过死亡细胞壁进入细胞,造成假阳性,使测得值不够准确。因此,如何排除死亡细胞的干扰,成为用流式细胞仪检测液氮冻存细胞表面抗原的一个重要问题。; 蔡也平朱立平王汛; 关键词：细胞表面抗原流式细胞仪液氮

胞膜(Ecto)-6A8α-甘露糖苷酶: 2003年; 68Aα-甘露糖苷酶是本实验室克隆的cDNA(GenBank的登记号为AF044414)编码的一个新的人α-甘露糖苷酶[1].该cDNA长3300bp,其开放阅读框架编码1062个氨基酸的蛋白质.蛋白质的1028～1048aa为穿膜区.6A8α-甘露糖苷酶属工型穿膜蛋白.6A8基因定位于第15号染色体q11～13区.; 朱立平王壮志史耕先刘音王汛赵方萄; 关键词：单克隆抗体糖基化

用单抗5C5和5C5-G1筛选的613bp cDNA的核苷酸序列分析被引量：2: 1996年; 用识别人活化B细胞分化抗原５Ｃ５的单克隆抗体５Ｃ５和５Ｃ５－Ｇ１的混合物从人扁桃体细胞λｇｔ１１ｃＤＮＡ文库筛选到３个阳性克隆。其ｃＤＮＡ插入到质粒ｐＵＣ１８，经双链双脱氧测序法作核苷酸序列分析，知其中一个ｃＤＮＡ长６１３ｂｐ，另二个长４６７ｂｐ，后者与前者的前４６７ｂｐ完全重叠。６１３ｂｐｃＤＮＡ中有一个开放阅读框架，从１０３ｂｐ到４２９ｂｐ，共３２７ｂｐ。Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹分析显示，此６１３ｂｐｃＤＮＡ与人扁桃体细胞和３Ｄ５细胞的ＲＮＡ在２．０ｋｂ左右有杂交带。与国际上有关基因库的资料比较，未发现有任何同源核苷酸序列。由于这是一个新的ｃＤＮＡ序列，ＧｅｎＢａｎｋ已接受（接受号为Ｕ２５０４１）。从此ｃＤＮＡ的读框推断的蛋白质中第２０－３０氨基酸为明显的疏水区，故这个蛋白有典型的膜蛋白结构。; 石伟朱立平崔莲仙张淑珍王汛李国燕; 关键词：分化抗原 CDNA 核苷酸序列

雷公藤总甙在细胞周期多个阶段抑制T细胞增殖被引量：13: 1992年; 用小剂量 PHA(0.15μg/ml)诱导人 T 细胞从 Go 相进入 G_((?)a)和 G_((?)b)相,但不能进入 S 相和 G_2/M 相,和用人 rIL-2诱导上述活化的 T 细胞进入 S 相和 G_2/M 相作模型,用 AO 和 PI 染色在流式细胞仪上分析了雷公藤总甙 T Ⅱ对 T 细胞增殖反应的影响。结果表明 T Ⅱ在细胞周期 Go→G_(?),G_(?)→G_((?)b),G_(?)→S,和 S→G_2/M 多个关键点上抑制 T 细胞的增殖反应。; 朱立平董彦章蒋明王汛阎春丽; 关键词：雷公藤免疫抑制剂 T细胞皂甙

用细胞酶联免疫吸附法筛选分泌抗人B细胞分化抗原单抗的杂交瘤被引量：2: 1995年; 用活化的人Ｂ细胞株３Ｄ５细胞免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，取小鼠脾脏细胞与ＳＰ２／０细胞融合。融合后细胞置甲基纤维素半固体培养基生长。以０．５％甲醛处理的３Ｄ５细胞和ＣＥＭ细胞包被酶标板作为靶细胞，用细胞酶联免疫吸附（ＣＥＬＩＳＡ）试验筛选２９０个杂交瘤细胞克隆，得到３３个与３Ｄ５细胞反应阳性而与ＣＥＭ细胞反应阴性的克隆。再经间接免疫荧光染色后，用流式细胞仪复测以上所得３３个阳性克隆，结果３Ｄ５阳性ＣＥＭ阴性者２７例，占８１．８２％，表明ＣＥＬＩＳＡ法是一个粗筛抗人Ｂ细胞分化抗原的简便有效方法。; 郭彩云石伟王汛朱立平; 关键词：单克隆抗体

单抗5C5-G1识别的分化抗原表达于活化B细胞胞膜被引量：4: 1998年; 目的鉴于５Ｃ５ｃＤＮＡ（６１３ｂｐ）的２～４５０ｂｐ与ＨＳＭＲＰ１７ｍＲＮＡ（１００８ｂｐ）的５６０～１００８ｂｐ的同源性高达９５％，且后者编码的蛋白质（ＭＲＰＬ１２）也在细胞活化后表达，本研究旨在探究两者是否属同一物。方法多个人Ｂ细胞株用单抗５Ｃ５－Ｇ１作间接免疫荧光染色，激光扫描共聚焦显微镜观察。结果５Ｃ５－Ｇ１单抗识别分子表达于膜下近膜胞浆处、也可能在膜表面，但非单纯在膜上，而ＭＥＰＬ１２只表达于线粒体。另外，前Ｂ细胞Ｎａｌｍ－６与单抗５Ｃ５－Ｇ１反应阴性，活化前期Ｂ细胞Ｄａｕｄｉ和３Ｄ５的反应强阳性，分化晚期Ｂ细胞ＳＫＷ６为弱阳性。结论５Ｃ５ｃＤＮＡ与ＨＳＭＲＰ１７ｍＲＮＡ不属同一基因；; 马凤蓉朱立平朱立平张立新张淑珍王汛张淑珍赵方萄王汛; 关键词：B细胞胞膜显微镜检

一个与编码大鼠ERα-甘露糖苷酶同源的人cDNA分子克隆被引量：12: 1997年; 用抗人Ｂ细胞和Ｔ细胞共同分化抗原６Ａ８单克隆抗体从人扁桃体细胞λｇｔ１１ｃＤＮＡ文库克隆到１个长１３５８ｂｐ的ｃＤＮＡ。此ｃＤＮＡ内有一个长１２７８ｂｐ（２６～１３０３ｂｐ）的开放阅读框架，编码４２５个氨基酸的蛋白质。此蛋白质氨基酸序列中第１５７位到２２３位为疏水跨膜区。蛋白质的氨基酸序列与大鼠ＥＲα－甘露糖苷酶（１０４０个氨基酸）的６３２～１０３８位氨基酸序列间的相同性和相似性高达８２．０４５％和８８％。它与酵母Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｖｉｓｉａｅα－甘露糖苷酶（１０８３个氨基酸）的６５９～１０８３位氨基酸序列间的相同性和相似性也有３２．５％和５１．７５％。前者１６３～２７７位间与后者８３２～９４６位间１１５个氨基酸序列间的相同性和相似性达到５７％和７４％。由于６Ａ８ｃＤＮＡ核苷酸顺序未见于国外基因库资料，故已为ＮＩＨＧｅｎＢａｎｋ接受登记，接受号为Ｕ３７２４８。; 张立新朱立平朱立平石伟祝庆麟马凤蓉王汛李国燕; 关键词：分化抗原甘露糖苷酶 CDNA 分子克隆

编码与大鼠ERα-甘露糖苷酶同源的人6A8cDNA在真核细胞的表达被引量：7: 1998年; 目的观察６Ａ８ｃＤＮＡ（１３５８ｂｐ）在真核细胞的表达。方法Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ，构建６Ａ８ｃＤＮＡ表达载体ｐＲｃ／ＣＭＶ－６Ａ８ｃＤＮＡ，转染ＣＯＳ－７细胞，及基因免疫小鼠。结果６Ａ８ｃＤＮＡ有４．３ｋｂ和３．５ｋｂ两种ｍＲＮＡ转录形式。４．３ｋｂｍＲＮＡ以外周血白细胞最丰富，其次为淋巴结、脾脏和骨髓，胸腺组织表达较少，胎肝则缺如。３．５ｋｂ者也以外周血白细胞最丰富，其次为肝脏、淋巴结和骨髓，胸腺和脾脏表达量最少。ｐＲｃ／ＣＭＶ－６Ａ８ｃＤＮＡ在ＣＯＳ－７细胞表达了分子量４５０００左右的蛋白质，与单抗６Ａ８有反应。ｐＲｃ／ＣＭＶ－６Ａ８ｃＤＮＡ基因免疫小鼠，６／１０只小鼠血清与人活化Ｂ细胞株３Ｄ５细胞膜有反应，５／５只对照小鼠血清呈阴性反应。结论６Ａ８ｃＤＮＡ（１３５８ｂｐ）在真核细胞获得表达，但此ｃＤＮＡ非为全长。; 张立新马凤蓉朱立平李波石伟张淑珍李国燕王汛赵方萄; 关键词：RNA 信使甘露糖苷酶真核细胞

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王汛

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