张淑珍
- 作品数：13 被引量：23H指数：3
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院基础医学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国医学科学院基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 用单抗5C5和5C5-G1筛选的613bp cDNA的核苷酸序列分析被引量：2
- 1996年
- 用识别人活化B细胞分化抗原５Ｃ５的单克隆抗体５Ｃ５和５Ｃ５－Ｇ１的混合物从人扁桃体细胞λｇｔ１１ｃＤＮＡ文库筛选到３个阳性克隆。其ｃＤＮＡ插入到质粒ｐＵＣ１８，经双链双脱氧测序法作核苷酸序列分析，知其中一个ｃＤＮＡ长６１３ｂｐ，另二个长４６７ｂｐ，后者与前者的前４６７ｂｐ完全重叠。６１３ｂｐｃＤＮＡ中有一个开放阅读框架，从１０３ｂｐ到４２９ｂｐ，共３２７ｂｐ。Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹分析显示，此６１３ｂｐ ｃＤＮＡ与人扁桃体细胞和３Ｄ５细胞的ＲＮＡ在２．０ｋｂ左右有杂交带。与国际上有关基因库的资料比较，未发现有任何同源核苷酸序列。由于这是一个新的ｃＤＮＡ序列，ＧｅｎＢａｎｋ已接受（接受号为Ｕ２５０４１）。从此ｃＤＮＡ的读框推断的蛋白质中第２０－３０氨基酸为明显的疏水区，故这个蛋白有典型的膜蛋白结构。
- 石伟朱立平崔莲仙张淑珍王汛李国燕
- 关键词：分化抗原CDNA核苷酸序列
- 转染反义6A8cDNA对人鼻咽癌细胞肺转移的抑制被引量：2
- 1999年
- 人鼻咽癌高肺转移克隆株CNE 2L2转染编码人α 甘露糖苷酶的cDNA( 6A8cDNA ,GenBank接受号为U3 72 48)的重组反义表达载体 ( pRc/CMV 反义6A8cDNA)后 ,与转染空载质粒pRc/CMV及未作任何转染的细胞相比 ,其生长受一定程度抑制 .接种于无胸腺鼠皮下 2个月 ,野型CNE 2L2细胞组有肺转移的小鼠数为 9/10 ( 90 % ) ,其中Ⅲ级 8只 ,Ⅱ级 1只 ;转染空载质粒pRc/CMV ,有肺转移者为6/8( 75 % ) ,其中Ⅲ级 1只 ,Ⅱ级 2只 ,Ⅰ级 3只 ;转染pRc/CMV 反义 6A8cDNA ,有肺转移者为 3 /10 ( 3 0 % ) ,全部为Ⅰ级 .
- 张立新刘玉琴马凤蓉顾蓓史耕先赵雪梅李波高进赵方萄张淑珍李国燕王讯朱立平
- 关键词：CDNA转染鼻咽癌细胞株肺转移
- 人膀胱癌上皮细胞株T24分泌LAK细胞诱导因子(LAK—IF)
- 1993年
- 从人膀胱上皮癌细胞株T24的亚克隆株T24-8的无血清培养上清液经55%硫酸铵沉淀,再对无离子水透析,得到了有诱导LAK 细胞活性的粗提品。有此作用的因子称为LAK 细胞诱导因子(LAK-IF)。它的分子量为67KD,等电点为pH3.1～3.5。抗人IL-6单抗不能阻断LAK-IF 的作用。LAK-IF 粗提品经Mono-Q 柱快速蛋白液相层析见3个峰。第2峰蛋白质有LAK-IF 活性。
- 蔡也平朱立平崔莲仙曲昆姜喆郭北初张淑珍刘杨姚宁苏盛
- 关键词：T24细胞
- 人B细胞生长因子的分离提纯被引量：1
- 1991年
- 本工作用对B细胞生长因子(BCGF)有特异反应的3D5细胞检测BCGF活性,并利用对弱离子交换介质羟基磷灰石结合特性的不同,有效地从有丝分裂原刺激的人T细胞培养上清液中除去IL-2,得到了部分纯化的BCGF。最终凝胶过滤组份经SDS-PAGE分析显示有三条蛋白带,其中12KD蛋白带有BCGF活性。电泳分析比较表明,从制备低分子量BCGF这点来看,我们分离到的BCGF优于Cellular Product公司生产的cpBCGF(产品号16189)。
- 郭北初朱立平崔莲仙张淑珍
- 关键词：B细胞提纯
- 从人活化B细胞株3D5细胞λgtll cDNA文库筛选到的1529bp cDNA的核苷酸序列分析
- 1996年
- 对用单抗５Ｃ５和单抗５Ｃ５－Ｇ１的混合物从３Ｄ５细胞λｇｔｌｌｃＤＮＡ文库筛选到的７个阳性ｃＤＮＡ克隆中的１个（３Ｄ５－５）进行了核苷酸序列分析。由于３Ｄ５－５ｃＤＮＡ长１．６ｋｂ左右，不能直接测序，故先依测序用质粒ｐＢＳｃｒｉｐｔ－ＫＳ多克隆位点中的内切酶点行单酶切，经电泳分析画出测序用的物理图谱，再用相应内切酶行单酶酶切。藉低熔点琼脂糖回收各个片段。带质粒ｐＢＳｃｒｉｐｔ－Ｋ５的大片段经直接自身环化，小片段与质粒载体ｐＢＳｃｒｉｐｔ－ＫＳ重组，构建测序用的亚克隆。用双链双脱氧末端终止法测各亚克隆的核苷酸序列，再拚接出全长为１５２９ｂｐ的３Ｄ５－５ｃＤＮＡ全长序列。与国际基因库资料比较，未见有相同的序列。此ｃＤＮＡ中有一个长４６５ｂｐ（从５４０ｂｐ－１００４ｂｐ）的ＯＲＦ，编码１５４个氨基酸的蛋白质。此蛋白质中有二个疏水区（第１～３４位氨基酸及第７９～１０９位氨基酸），提示它可能属Ⅰ类穿膜蛋白。
- 石伟朱立平崔莲仙张立新张淑珍王汛李国燕
- 关键词：CDNADNAB细胞
- 一种白细胞共同抗原的鉴定及其对B细胞活化的影响
- 1999年
- 目的：用单克隆抗体鉴定白细胞共同抗原并对其性质进行初步分析。方法：用Ｂ细胞株３Ｄ５免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠得到单抗５Ｈ１２，借助间接免疫荧光及流式细胞仪分析，检测５Ｈ１２抗原在多种白细胞表面的表达情况，并从白细胞膜中提取５Ｈ１２抗原，通过增殖试验、聚丙烯酰胺凝胶电泳及免疫印迹对其特性进行初步分析。结果：５Ｈ１２抗原表达于多种白细胞表面，包括休止Ｔ细胞、休止Ｂ细胞、单核细胞、中性粒细胞、体外ＰＨＡ激活的Ｔ细胞、体外ａｎｔｉμ激活的Ｂ细胞、也表达在Ｔ细胞株（Ｊｕｒｋａｔ、Ｐｅｅｒ）、Ｂ细胞株（３Ｄ５、Ｄａｕｄｉ、ＣＥＳＳ、ＢＪＡＢ）、单核细胞株Ｕ９３７和髓细胞株Ｋ６５２表面。增殖试验表明，该抗原与相应单抗结合后导致Ｂ细胞活化抑制。对抗原的初步分析显示：５Ｈ１２是一种单链蛋白质分子，分子量为２２ｋＤ。结论：５Ｈ１２是一种单链膜蛋白分子，属于白细胞共同抗原。
- 王运平张淑珍张淑珍
- 关键词：白细胞共同抗原分子量B细胞
- 分化抗原6A8在B淋巴细胞膜和胞浆中的表达
- 1998年
- 采用间接免疫荧光染色、流式细胞仪、激光扫描共聚焦显微镜、Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ及Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析研究分化抗原６Ａ８在人淋巴细胞的表达。流式细胞仪分析显示，单抗６Ａ８与所检测的Ｂ细胞株３Ｄ５、ＣＥＳＳ和Ｄａｕｄｉ有反应，与人组织细胞瘤细胞株Ｕ９３７也有反应，与慢性髓性白血病细胞株Ｋ５６２及所检测的Ｔ细胞株Ｊｕｒｋａｔ和Ｐｅｅｒ不反应。Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ检测支持上述现象，３Ｄ５和Ｕ９３７细胞ｍＲＮＡ转录较丰富，ＣＥＳＳ细胞次之，而Ｊｕｒｋａｔ与Ｐｅｅｒ细胞的ｍＲＮＡ转录很少。激光扫描共聚焦显微镜观察显示，单抗６Ａ８识别的分化抗原见于３Ｄ５细胞浆和胞膜。可见在人Ｂ细胞株３Ｄ５，分化抗原６Ａ８不仅表达于胞膜，也表达于胞浆。
- 张立新朱立平朱立平马凤蓉石伟张淑珍石伟李国燕张淑珍
- 关键词：分化抗原B细胞单克隆抗体
- 3 D 5细胞上低分子量B细胞生长因子(LMW-BCGF)受体的研究
- 利用对BCGF有特异反应的人活化B细胞株3D5细胞作检测LMW-BCGF活性的靶细胞,用硫酸铵分级沉淀和多步层析,从人T淋巴细胞条件培养上清液中分离纯化到LMW-
- 朱立平郭北初崔莲仙张淑珍
- 文献传递
- 编码与大鼠ERα-甘露糖苷酶同源的人6A8cDNA在真核细胞的表达被引量：7
- 1998年
- 目的观察６Ａ８ｃＤＮＡ（１３５８ｂｐ）在真核细胞的表达。方法Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ，构建６Ａ８ｃＤＮＡ表达载体ｐＲｃ／ＣＭＶ－６Ａ８ｃＤＮＡ，转染ＣＯＳ－７细胞，及基因免疫小鼠。结果６Ａ８ｃＤＮＡ有４．３ｋｂ和３．５ｋｂ两种ｍＲＮＡ转录形式。４．３ｋｂｍＲＮＡ以外周血白细胞最丰富，其次为淋巴结、脾脏和骨髓，胸腺组织表达较少，胎肝则缺如。３．５ｋｂ者也以外周血白细胞最丰富，其次为肝脏、淋巴结和骨髓，胸腺和脾脏表达量最少。ｐＲｃ／ＣＭＶ－６Ａ８ｃＤＮＡ在ＣＯＳ－７细胞表达了分子量４５０００左右的蛋白质，与单抗６Ａ８有反应。ｐＲｃ／ＣＭＶ－６Ａ８ｃＤＮＡ基因免疫小鼠，６／１０只小鼠血清与人活化Ｂ细胞株３Ｄ５细胞膜有反应，５／５只对照小鼠血清呈阴性反应。结论６Ａ８ｃＤＮＡ（１３５８ｂｐ）在真核细胞获得表达，但此ｃＤＮＡ非为全长。
- 张立新马凤蓉朱立平李波石伟张淑珍李国燕王汛赵方萄
- 关键词：RNA信使甘露糖苷酶真核细胞
- 编码人分化抗原5D4的全长cDNA克隆及其编码蛋白质的二级结构分析被引量：2
- 1999年
- 用 3D5细胞染色强阳性 ,而Daudi与Jurkat细胞染色弱阳性的单克隆抗体5D4,从一个人扁桃体细胞λgt1 1cDNA文库 (ATCCNo .375 46 )筛选到一个长 1 846bp的cDNA克隆 .RT_PCR显示 3D5细胞、Daudi细胞和Jurkat细胞 5D4mRNA均阳性 ,但 3D5细胞明显强于后两者 . 5D4cDNA中 88～ 1 2 0 9bp为一个开放阅读框架 ,编码374个氨基酸的蛋白质 .Northernblot分析结果和起始密码子前 5′端非编码区有 2个连续的终止密码子表明 ,这是一个全长cDNA .从其开放阅读框架推断的蛋白质的氨基酸序列中 2 95～ 334aa为一强疏水区 ,预测 31 3～ 334aa为一分值极高的跨膜螺旋区 ,其方向最可能是由膜内到膜外 .
- 马凤蓉朱立平汪燚赵方萄史耕先李波李国燕张淑珍王讯刘音
- 关键词：CDNA分化抗原编码蛋白质单克隆抗体
