王朝丽
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- 幽门螺杆菌NCTC11637株Hp1501蛋白的原核表达与纯化
- 2011年
- 目的原核表达并纯化幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)NCTC11637株Hp1501蛋白。方法 PCR扩增H.pylori NCTC11637株Hp1501基因编码功能区序列Hp1501a,定向克隆至pQE30载体,构建重组原核表达质粒pQE30-Hp1501a,转化E.coli XL1-blue,IPTG诱导表达,并分析重组蛋白的表达形式。用Ni-NTA His柱对重组蛋白进行纯化。结果重组表达质粒pQE30-Hp1501a经双酶切鉴定构建正确,测序分析表明插入基因序列完全正确;表达的重组蛋白相对分子质量约为37 000,表达量约占菌体总蛋白的21%,主要以包涵体形式存在,可与兔抗His单克隆抗体特异性结合;纯化的重组蛋白纯度达91%。结论成功原核表达并纯化了H.pylori NCTC11637株Hp1501蛋白,为H.pylori外膜蛋白的生物学功能和疫苗的研究奠定了基础。
- 杨继文杨致邦敬保迁于拽拽熊玉霞王朝丽冯莉
- 关键词：幽门螺杆菌生物信息学原核细胞基因表达纯化
- 幽门螺杆菌NCTC11637株Hp1501基因序列的测定与生物信息学分析
- 2012年
- 目的幽门螺杆菌NCTC11637菌株Hp1501基因进行序列测定,并运用生物信息学软件对其进行分析。方法用聚合酶链反应方法从幽门螺杆菌NCTC11637菌株基因组DNA扩增Hp1501基因,T-A克隆,鉴定后测序,将基因序列向GeneBank提交并申请登录号,用生物信息学软件分析其生物学特性。结果成功获取幽门螺杆菌NCTC11637株Hp1501基因序列,获得GeneBank登录号JF820815。软件分析表明,序列全长为1 164 bp,与幽门螺杆菌国际标准株26695和J99的基因序列一致性为96%～97%,氨基酸序列一致性为97%～98%;软件预测其编码的前59个氨基酸为信号肽,其编码的核心肽为幽门螺杆菌外膜蛋白。结论成功测定幽门螺杆菌NCTC11637菌株Hp1501基因序列并预测出其生物学特性,为进一步研究其功能,阐明其致病机制奠定了基础。
- 杨继文敬保迁王朝丽冯莉
- 关键词：幽门螺杆菌基因生物信息学分析
