江经纬
- 作品数：17 被引量：45H指数：3
- 供职机构：华南农业大学兽医学院更多>>
- 发文基金：广东省科技攻关计划国家农业科技成果转化资金项目更多>>
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- 一种大片段DNA克隆载体的构建方法
- 本发明公开了一种简单快捷构建克隆载体的方法，简称LJY法和用此方法已构建好的4个克隆载体。本发明以pBR322的AmpR基因和ori复制起始点为骨架，通过独特的引物设计方法和平端连接，可简单快速地在新构建的克隆载体质粒中...
- 廖明江经纬郁宏伟周燕芬
- 文献传递
- 使用二重PCR方法快速检测单核细胞增生性李斯特氏菌的研究被引量：2
- 2011年
- 本研究以单核细胞增生性李斯特菌Hly基因和InlA基因作为靶序列设计2对引物,建立了检测单增李斯特菌的二重PCR方法。结果表明,该方法可以同时扩增出单增李斯特菌的Hly基因和InlA基因,而对大肠杆菌、沙门氏菌等食品中的常见致病菌和英诺克李斯特菌均不能扩增出任何条带,表现出良好的特异性。二重PCR方法的最低检测限为104CFU/mL,并能够用于鉴定实验小鼠攻毒后内脏器官的单增李斯特菌分离培养物。该方法表现出良好的特异性、敏感性和通用性,适用于单增李斯特菌的快速鉴别检测。
- 吴晓薇徐成刚李贺江经纬叶贺佳区燕宜徐小芹廖明
- 关键词：单增李斯特菌二重PCR
- 猪流感病毒的分离鉴定及毒力检测被引量：15
- 2007年
- 程珏益徐军徐成刚张海梁任涛罗开健辛朝安江经纬廖明
- 关键词：猪流感病毒A型流感病毒呼吸道传染病正粘病毒科生物学特性
- IB毒株致病性评价方法及免疫效果检测方法的建立
- 传染性支气管炎(Infectious Bronchitis，IB)是鸡的一种病毒性呼吸道和泌尿生殖道疾病，是引起家禽养殖业重大经济损失的疾病之一，临床表现为咳嗽、打喷嚏、体重减轻、产蛋量下降、蛋壳的质量下降等等。
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- 江经纬
- 关键词：传染性支气管炎原核表达载体弱毒疫苗免疫效果
- 文献传递
- 不同时期H_5N_1病毒的HA和NA基因进化树及基因变异率线性回归分析
- 2009年
- 利用Genbank上从1996-2007年的所有的H5N1禽流感病毒的HA基因和NA基因进行进化树分析,基因变异率线性回归分析表明1996-2000年的HA基因和NA基因的变异率要明显低于2000-2007年间的变异率,其原因也许与2000-2007年间东南亚各国大量使用疫苗有关。
- 潘德敏江经纬张停婷
- 关键词：H5N1病毒HA基因NA基因进化树
- 单增李斯特氏菌溶血素基因的克隆及原核表达被引量：1
- 2011年
- 参考GenBank收录的单增李斯特菌Hly基因序列,设计1对引物,采用PCR技术扩增出单增李斯特氏菌的溶血素基因Hly(不含有信号肽部分),得到一条1590bp的条带。将其连入pMD18-T载体,经酶切、PCR鉴定和序列测定法进行鉴定。测序正确后,将该基因插入到pET-28a中构建原核表达载体pET-28a-sHly,将重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,将诱导产物用SDS-PAGE和Western-blot鉴定。结果显示,Hly基因可以在大肠杆菌中获得表达,表达产物分子质量约为65kU,与预期蛋白质分子质量大小一致。经Western-blotting鉴定可知,诱导表达产物以可溶形式存在,可被兔抗LM阳性血清特异识别,具有较好的抗原活性,为进一步研制基于溶解素蛋白的诊断抗原和特异性单克隆抗体,开展LM的致病与免疫机理研究奠定基础。
- 吴晓薇徐成刚马保华江经纬叶贺佳区燕宜徐小芹廖明
- 关键词：单核细胞增生性李斯特氏菌溶血素基因克隆原核表达
- 一种大片段DNA克隆载体的构建方法
- 本发明公开了一种简单快捷构建克隆载体的方法，简称LJY法和用此方法已构建好的4个克隆载体。本发明以pBR322的AmpR基因和ori复制起始点为骨架，通过独特的引物设计方法和平端连接，可简单快速地在新构建的克隆载体质粒中...
- 廖明江经纬郁宏伟周燕芬
- 文献传递
- 猪(杜长大三元杂)白细胞介素-6基因的克隆及序列分析被引量：1
- 2006年
- 分离猪（杜长大三元杂）外周血单核细胞（PBMC）进行体外培乔，经诱导刑LPS或ConA的诱导培养48h后，提取细胞总RNA，应用RT-PCR扩增猪IL-基因，并克隆到pMDl8-T载体后测序。结果成功获得猪IL-6基因重组质粒pMDpIL-6，序列分析发现所获得的猪IL-6cDNA长度为716bp．开放阅读框为636bp，编码211个氨基酸，相对分子质量约24ku，等电点5．5。所获得的猪IL-6与GenBank上已报道的不同来源猪的IL-6有单个氨基酸存在差异；与人和其他动物IL-6氨基酸序列的同源性为78．1％-90．1％，同时反映出IL-6基因具有种的多样性，不同种动物的IL-6基因亲缘关系越近，进化关系也越近。
- 张桂红林海波江经纬詹国英廖明
- 关键词：白细胞介素-6基因克隆
- 广州地区禽产品单核细胞增生性李斯特菌污染情况调查被引量：1
- 2011年
- 单核细胞增生性李斯特菌是食品卫生上重要的病原菌。它广泛存在于自然界,可导致人和动物脑膜炎、流产、败血症等,病死率高达30%～70%,是目前人类最重要的食物源性病原菌之一[1,2]。
- 吴晓薇徐成刚马保华江经纬叶贺佳区燕宜徐小芹廖明
- 关键词：单核细胞增生性李斯特菌污染情况禽产品食品卫生自然界
- 猪白细胞介素-6基因的非融合原核表达研究被引量：2
- 2006年
- 用DNA重组技术,将已克隆的猪IL-6基因阅读框片段插入非融合原核表达质粒pBV220中的适当位置,获得重组质粒pBVpIL-6,转化大肠杆菌DH5α后,42℃诱导阳性表达菌。经SDS-PAGE检测发现目的蛋白获得了高效表达,表达量约占总蛋白的20%。表达的蛋白以包涵体形式存在,包涵体经过变性溶解和复性后用酶联免疫吸附试验(ELISA)做定性定量检测。ELISA结果证实了所表达的蛋白为猪IL-6,复性后具有一定活性,并测出了复性后活性蛋白的浓度。
- 张桂红林海波詹国英廖明任涛罗开健曹伟胜徐成刚江经纬辛朝安
- 关键词：SDS-PAGEELISA
