区燕宜
- 作品数:6 被引量:9H指数:2
- 供职机构:华南农业大学兽医学院更多>>
- 发文基金:广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学轻工技术与工程更多>>
- 冷冻食品中LM污染调查及p60蛋白抗原表位预测与应用
- 单核细胞增生性李斯特菌(Listeria Monocytogenes,LM)是李斯特菌属的重要成员,属于细胞内寄生的革兰氏阳性杆菌。目前在病原学上已被世界普遍公认为一种人畜共患病和食源性疾病的病原菌,能引起人、畜及禽类的...
- 区燕宜
- 关键词:李斯特菌冷冻食品抗原表位预测
- 文献传递
- 单增李斯特氏菌溶血素基因的克隆及原核表达被引量:1
- 2011年
- 参考GenBank收录的单增李斯特菌Hly基因序列,设计1对引物,采用PCR技术扩增出单增李斯特氏菌的溶血素基因Hly(不含有信号肽部分),得到一条1590bp的条带。将其连入pMD18-T载体,经酶切、PCR鉴定和序列测定法进行鉴定。测序正确后,将该基因插入到pET-28a中构建原核表达载体pET-28a-sHly,将重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,将诱导产物用SDS-PAGE和Western-blot鉴定。结果显示,Hly基因可以在大肠杆菌中获得表达,表达产物分子质量约为65kU,与预期蛋白质分子质量大小一致。经Western-blotting鉴定可知,诱导表达产物以可溶形式存在,可被兔抗LM阳性血清特异识别,具有较好的抗原活性,为进一步研制基于溶解素蛋白的诊断抗原和特异性单克隆抗体,开展LM的致病与免疫机理研究奠定基础。
- 吴晓薇徐成刚马保华江经纬叶贺佳区燕宜徐小芹廖明
- 关键词:单核细胞增生性李斯特氏菌溶血素基因克隆原核表达
- 使用二重PCR方法快速检测单核细胞增生性李斯特氏菌的研究被引量:2
- 2011年
- 本研究以单核细胞增生性李斯特菌Hly基因和InlA基因作为靶序列设计2对引物,建立了检测单增李斯特菌的二重PCR方法。结果表明,该方法可以同时扩增出单增李斯特菌的Hly基因和InlA基因,而对大肠杆菌、沙门氏菌等食品中的常见致病菌和英诺克李斯特菌均不能扩增出任何条带,表现出良好的特异性。二重PCR方法的最低检测限为104CFU/mL,并能够用于鉴定实验小鼠攻毒后内脏器官的单增李斯特菌分离培养物。该方法表现出良好的特异性、敏感性和通用性,适用于单增李斯特菌的快速鉴别检测。
- 吴晓薇徐成刚李贺江经纬叶贺佳区燕宜徐小芹廖明
- 关键词:单增李斯特菌二重PCR
- 单核细胞增生性李斯特菌iap基因的原核表达被引量:2
- 2008年
- 该研究利用自行设计的引物通过PCR方法扩增出单核细胞增生性李斯特菌Listeria monocytogenes C5305株的iap基因,在iap基因的5’端和3’端分别引入EcoRⅠ和XhoⅠ2个酶切位点并将其克隆到pET-28a表达载体上,经PCR鉴定、酶切鉴定和核苷酸序列测定后获得重组质粒pET-28a—iap,将该重组质粒转化入大肠杆菌B121(DE3)pLysS,经1mmol/LIPTG诱导4—6h后,通过SDS—PAGE及Westem-blotting鉴定,证明该基因得到表达,表达产物相对分子质量约为60000,以可溶形式存在.
- 区燕宜徐成刚叶贺佳吴晓薇廖明
- 关键词:单核细胞增生性李斯特菌原核表达
- 广州地区禽产品单核细胞增生性李斯特菌污染情况调查被引量:1
- 2011年
- 单核细胞增生性李斯特菌是食品卫生上重要的病原菌。它广泛存在于自然界,可导致人和动物脑膜炎、流产、败血症等,病死率高达30%~70%,是目前人类最重要的食物源性病原菌之一[1,2]。
- 吴晓薇徐成刚马保华江经纬叶贺佳区燕宜徐小芹廖明
- 关键词:单核细胞增生性李斯特菌污染情况禽产品食品卫生自然界
- 单核细胞增生性李斯特菌分离株的生物学特性研究被引量:3
- 2012年
- 对从广州禽产品分离的6株LM进行了药敏试验、pH值的适应范围、动物致病性等生物学特性研究。6株LM分离株对先锋必、氯霉素、卡那霉素、头孢唑啉、庆大霉素等多种药物敏感;而对多黏菌素B、复方新诺明、新生霉素有耐药性。LM分离株在pH值4.0~10.5范围内可存活。以109 CFU剂量感染SPF小鼠、清洁级新西兰兔和健康粤黄鸡,小鼠的致死率达100%,可引起兔结膜炎等症状,但未引起试验鸡的任何不适。6株LM分离株的Hly基因与标准参考株基因相似性达到96.1%以上,说明该基因在LM中较为保守。
- 吴晓薇徐成刚张朝冠江经纬叶贺佳区燕宜徐小芹廖明
- 关键词:单核细胞增生性李斯特菌禽产品生物学特性