杨晓华
- 作品数：26 被引量：81H指数：6
- 供职机构：上海市胸科医院更多>>
- 发文基金：上海市市级医院新兴前沿技术联合攻关项目国家自然科学基金上海市胸科医院科技发展基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学电子电信文化科学更多>>
- 非小细胞肺癌血管内皮Nestin表达与临床病理指标及预后的相关性被引量：1
- 2012年
- 目的检测非小细胞肺癌组织血管内皮中Nestin的表达,分析其与非小细胞肺癌患者临床病理指标及预后的相关性。方法采用免疫组织化学方法检测非小细胞肺癌组织血管内皮中Nestin的表达。采用Mann-WhitneyU检验及Kruskal-Wallis法检验Nestin标志微血管密度(MVD)与临床病理指标的关系,采用Kaplan-Meier生存曲线计算无病生存期和生存时间,采用Log-rank检验进行差异检验,采用Cox分析评估各指标与患者生存之间的关系。结果患者组的Nestin-MVD计数水平显著高于对照组(P<0.01)。患者组中,不同病理类型、病理分期、T分期、N分期及血管侵犯情况患者的Nestin-MVD计数的差异均有统计学意义(P值均<0.05)。其中,腺癌患者的Nestin-MVD中位值(26.6)显著高于鳞癌患者(20.8,P=0.008);Ⅱ期和ⅢA期肺癌患者的Nestin-MVD中位值(23.0、25.1)显著高于ⅠB期患者(15.5,P值均=0.000);T1期和T3期患者的Nestin-MVD中位值(28.6、29.6)显著高于T2期患者(21.3,P值均=0.025);术中有淋巴结转移者(N分期为1～2)的Nestin-MVD中位值(23.7、24.8)显著高于未转移者(17.7,P值均=0.002);存在血管侵犯的肺癌患者的Nestin-MVD中位值(26.6)显著高于无血管侵犯者(21.3,P=0.021)。Nestin-MVD中位值>22.0的患者的中位无病生存期(DFS,16.5个月)、中位生存时间(OS,44.3个月)显著短于Nestin-MVD中位值≤22.0的患者(36.0和58.3个月,P值分别为0.002、0.004),其Nestin-MVD计数与DFS、OS呈负相关(Log-rank值分别为9.679和8.525,P值分别为0.002、0.004)。Cox单因素分析结果显示,病理分期(95%CI为1.222～2.175,P=0.001)、N分期(95%CI为1.175～2.062,P=0.002)、T分期(95%CI为1.050～2.705,P=0.031)、Nestin-MVD计数(95%CI为1.205～2.670,P=0.004)及有无血管侵犯(95%CI为1.007～2.282,P=0.046)均影响患者的OS;而年龄、性别、吸烟史、肿瘤大小、病理类型、分化程度及肿瘤组织有无坏死与患者的生存预后不相关(P值均>0.05)。Cox多因素分析结果
- 钱嘉琳杨晓华冯久贤沙慧芳韩宝惠
- 关键词：非小细胞肺癌NESTIN微血管密度预后
- 耐紫杉醇肺癌细胞BNX动物模型的建立被引量：5
- 2011年
- 目的建立一种耐药性稳定的人肺癌BNX小鼠皮下移植瘤模型,为研究体内肿瘤耐药机制和逆转药物的筛选奠定实验基础。方法将体外培养的对数生长期的肺癌耐药细胞株A549-Taxol,接种在免疫缺陷小鼠的皮下,形成肿瘤,采用肿瘤组织块或肿瘤组织原代培养的细胞,分别于动物皮下接种致瘤;体内外交叉进行致瘤,提高耐药细胞株A549-Taxol的致瘤率和缩短致瘤时间。通过免疫组化鉴定该耐药细胞的特性。用MTT法检测细胞的耐药指数。结果耐药细胞接种于SCID小鼠4个月后在皮下形成肿瘤灶。用该肿瘤组织块或细胞悬液移植于SCID小鼠,通过反复3次后,细胞生长速度变快,2个月后皮下即可形成肿瘤。将该细胞移植于BNX小鼠,以同样的方法将瘤组织体内外交叉进行致瘤,最终BNX小鼠种植成功率达到80%。致瘤时间为3周。耐药细胞和组织块P-gp170、GST-π和MMP-7均高表达。A549-Taxol细胞的紫杉醇半数抑制浓度(IC50)是亲代A549细胞的520倍。结论初步建立了人肺腺癌耐药细胞(A549-Taxol)的动物模型,为肺癌临床个体化治疗及耐药逆转研究等提供了良好的实验动物平台。
- 沙慧芳孙强玲杨晓华
- 关键词：肿瘤抗药性紫杉醇动物模型
- 蛋白质指纹图谱技术在肺癌分子标志物研究中的应用被引量：1
- 2009年
- 目的分析肺癌与肺部良性疾病及正常人血浆蛋白质指纹图谱的变化,建立肺癌血浆标志物诊断模型。方法应用蛋白质指纹图谱(SELDI-TOF-Ms)技术检测108例肺癌患者、40例肺部良性疾病患者和22例正常人血浆标本,采用层次聚类分析和主成分分析建立决策树模型,应用该模型盲筛21例肺部良性疾病和47例Ⅰ期肺癌。结果筛选到23个差异蛋白峰(P<0.001)。盲筛分析显示决策树模型诊断敏感性和特异性分别为72.34%和71.43%,阳性预测值和阴性预测值分别为85.0%和78.95%,诊断正确性为72.06%。结论应用SELDI-TOF-Ms技术初步建立的蛋白质模型为肺癌的早期诊断提供了新的技术平台。
- 沙慧芳叶剑定孙强玲杨晓华包国良冯久贤龚乐罗
- 关键词：蛋白质指纹图谱血浆肺癌蛋白质芯片分子标志物
- 预测Ⅲ期非小细胞肺癌术后骨转移的肿瘤生物标志物模型的建立
- 周箴陈智伟沈岚杨晓华陆舜罗清泉
- 应用差异凝胶电泳及质谱技术筛选肺癌患者血浆差异蛋白被引量：3
- 2010年
- 目的建立健康者、肺部炎症患者和肺癌患者的血浆蛋白表达谱,寻找与肺癌早期发生相关的差异蛋白。方法应用差异凝胶电泳(DIGE)和基质辅助激光解吸飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)对健康者、肺部炎症患者和Ⅰ期肺癌患者血浆进行蛋白质组学比较研究,寻找肺癌相关差异蛋白。结果应用DIGE进行分离后,成功获得了蛋白质组分辨率高、重复性好的双向凝胶电泳图谱;DeCyder 6.5软件分析获得差异大于2倍的蛋白质点共有72个;质谱鉴定去冗余后确定了12种蛋白质,其中7种与肿瘤相关,分别为酰基辅酶A合成酶家族成员3、抗血小板膜糖蛋白Ⅰb特异性抗体、γ-纤维蛋白原、4型血清淀粉样蛋白A、补体因子H、钙结合微丝蛋白、载脂蛋白Ⅰ。结论应用DIGE及MALDI-TOF-MS分离并初步鉴定了12种蛋白质,筛选出7种在肺癌患者血浆中高表达的肿瘤相关蛋白。
- 沙慧芳孙强玲杨晓华储天晴谢银银鲁静包国良冯久贤龚乐罗
- 关键词：蛋白组学血浆肺癌
- 人肺腺癌紫杉醇耐药细胞株的建立及其特性研究被引量：10
- 2009年
- 目的建立耐紫杉醇的人肺腺癌A549(A549/Taxol)细胞株,并初步研究其生物学特性。方法应用抗肿瘤药紫杉醇以体外浓度递增和短时作用法筛选A549细胞株。用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞的耐药指数及对多种抗癌药物的敏感性;免疫细胞化学法检测P-糖蛋白(P170)、β-tubulin等耐药相关蛋白的表达情况。结果A549/Taxol细胞的紫杉醇半数抑制浓度(IC50)是亲代A549细胞的512.8倍,群体倍增时间是亲代细胞的1.28倍,对紫杉醇、丝裂霉素、长春新碱、诺维本的耐药指数依次为512.8、66.48、4.88和2.06;而对顺铂、健择无交叉耐药。A549/Taxol细胞高表达P170,β-tubulin表达水平高于其亲代细胞系。结论成功建立了一株耐紫杉醇的A549/Taxol,并呈多药耐药特性。
- 杨晓华沙慧芳冯久贤孙强玲储天晴高志强
- 关键词：肺腺癌细胞A549多药耐药紫杉醇细胞株
- ERCC1、RRM1和p53表达与Ⅰ-Ⅱ期肺癌术后预后相关性分析被引量：12
- 2009年
- 背景与目的顺铂是肺癌化疗的基础药物,而ERCC1、RRM1、p53表达水平与铂类耐药和预后有关,本研究分析Ⅰ-Ⅱ期NSCLC的ERCC1、RRM1、p53表达与术后生存期的关系,探讨它们与患者预后及与顺铂耐药的相关性。方法收集1992年2月-l994年1月有随访的75例Ⅰ-Ⅱ期NSCLC术后患者,Ⅰ期术后随机分成不化疗组和化疗组,Ⅱ期术后均作化疗,化疗采用以DDP为基础的方案。免疫组化法检测手术标本的ERCC1、RRM1、p53表达,并进行统计分析。结果Ⅰ期ERCC1高表达患者预后明显好于ERCC1低表达,1、3、5年生存率分别为100.00%、91.30%、86.74%和96.43%、60.71%、57.14%(P=0.0058)。Ⅰ期不化疗组ERCC1高表达者生存情况优于ERCC1低表达,中位生存期(MST)分别为72.00+个月和64.67个月(P=0.0327)。Ⅱ期与Ⅰ期相反,ERCC1低表达者预后好,ERCC1低表达者的MST为60.00+个月,而高表达者仅为25.50个月(P=0.0442)。RRM1、p53表达与术后生存率无关。结论ERCC1高表达是Ⅰ期NSCLC术后预后良好的独立指标;含DDP化疗延长了Ⅱ期ERCC1低表达患者的生存,术后可根据ERCC1的水平决定是否选用含DDP化疗;ERCC1表达对NSCLC术后生存期的影响在Ⅰ期和Ⅱ期DDP化疗患者中可能不尽相同,ERCC1高表达在Ⅰ期NSCLC术后展现的是其保护的一面,而Ⅱ期以化疗抵抗为主。
- 王慧敏冯久贤张雪艳杨晓华何卫中沙慧芳韩宝惠
- 关键词：ERCC1RRM1P53预后
- 非小细胞肺癌中蛋白激酶C-α的表达及其意义被引量：6
- 2007年
- 目的:探讨蛋白激酶C-α(protein kinase C-α,PKC-α)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织及细胞株中表达的意义。方法:应用免疫组织化学SP方法检测NSCLC组织芯片中PKC-α蛋白的表达,其中肿瘤组织160例,癌旁组织40例,Ⅰ期91例,Ⅱ～Ⅲ期69例;应用反转录聚合酶链式反应法(RT-PCR)检测NSCLC细胞株A549、耐顺铂A549(A549-DDP)、H460及H1299等细胞株中PKC-αmRNA的表达;应用Western印迹法检测上述细胞株中PKC-α蛋白的表达。结果:PKC-α蛋白在160例NSCLC组织中的表达率为53.1%(85/160),癌旁组织中的表达率为7.5%(3/40),差异有统计学意义(P<0.01);PKC-α蛋白的表达在不同病理类型之间(腺癌、鳞癌及细支气管肺泡癌)的差异无统计学意义(P>0.05);与患者的性别、年龄等因素亦无明显相关性;而与NSCLC,特别是腺癌的临床分期、淋巴结是否转移相关(P<0.05);与腺癌的分化程度相关(P<0.05),但与鳞癌的分化程度无明显相关性;在NSCLC细胞株A549、A549-DDP、H460及H1299中均存在PKC-αmRNA及蛋白的表达,其中以A549-DDP细胞株的表达水平为最高。结论:在NSCLC组织及细胞株中存在PKC-α的表达;PKC-α蛋白表达在NSCLC特别是腺癌的浸润、转移和发展中具有重要作用;在多种NSCLC细胞株中PKC-α的表达水平存在一定差别。
- 高志强杨晓华冯久贤沙慧芳韩宝惠
- 关键词：蛋白激酶CΑ微阵列分析逆转录聚合酶链反应
- 益气养精小复方对Lewis肺癌荷瘤小鼠免疫功能的影响被引量：3
- 2015年
- 目的:探讨益气养精小复方对Lewis肺癌荷瘤小鼠免疫功能的影响及其作用机制。方法:建立Lewis肺癌细胞C57小鼠皮下移植瘤模型,将造模后的荷瘤小鼠随机分为模型组、中药组、顺铂组和中药+顺铂组。模型组不予药物干预,中药组予益气养精小复方中药灌胃,顺铂组予顺铂腹腔注射,中药+顺铂组予顺铂腹腔注射配合益气养精小复方中药灌胃,连续灌胃给药14 d。比较各组荷瘤小鼠体内抑瘤作用;采用流式细胞术检测荷瘤小鼠外周血T细胞亚群和NK细胞水平;双抗体夹心ELISA法检测荷瘤小鼠血清IFN-γ及IL-10浓度。结果:中药组、顺铂组、中药+顺铂组平均瘤重均显著低于模型组(P<0.05),而该3组之间差异无统计学意义(P>0.05),该3组抑瘤率依次为37.75%、44.59%和45.47%。药物干预后,顺铂组的CD4+T细胞百分比、CD4+/CD8+比值及NK细胞水平均显著低于模型组(P<0.05),其CD8+T细胞百分比显著高于模型组(P<0.05);中药组的CD4+T细胞百分比、CD4+/CD8+比值及NK细胞水平均显著高于顺铂组(P<0.05),而其CD8+T细胞百分比显著低于顺铂组(P<0.05);中药+顺铂组的CD4+T细胞百分比、CD4+/CD8+比值及NK细胞水平均显著高于顺铂组(P<0.05)且低于中药组(P<0.05),其CD8+T细胞百分比显著高于中药组(P<0.05)。中药组与中药+顺铂组血清IFN-γ浓度均显著高于模型组和顺铂组(P<0.05),而IL-10浓度则显著低于模型组与顺铂组(P<0.05)。结论:由生黄芪、黄精、灵芝组成的益气养精小复方能够有效升高小鼠CD4+T细胞百分比、CD4+/CD8+比值与NK细胞水平,正向调节IFN-γ浓度,降低CD8+T细胞百分比与IL-10浓度,进而协同发挥抑制肿瘤生长的作用。
- 郭毅峻王倩蕾杨晓华金长娟
- 关键词：LEWIS肺癌免疫功能小鼠
- β-榄香烯逆转人肺腺癌A549/Taxol细胞对紫杉醇耐药的研究
- 目的:探讨β-榄香烯(β-ELE)逆转人肺腺癌A549/Taxol细胞对紫杉醇(Taxol)耐药的机制。方法:采用CCK8法测定β-ELE的细胞毒作用和处理前后肺腺癌细胞对紫杉醇的敏感性变化,通过Western blot...
- 蔡霄月杨晓华张铭沙慧芳
- 关键词：Β-榄香烯耐药磷酸化AKT
- 文献传递
