明欣
- 作品数：6 被引量：12H指数：2
- 供职机构：中国药科大学生物制药学院更多>>
- 发文基金：江苏省应用基础研究计划江苏省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生化学工程更多>>
- 一种新的X-脯氨酰-二肽氨肽酶克隆、表达、纯化与应用研究
- 活性肽表达和加工技术是制约长度为30-70氨基酸的活性肽研究开发的'瓶颈'技术.该实验室已经建立了一套能够高效表达和加工长度为30-70Aa多肽的新系统,应用该系统,几种活性肽能在同一生产线上联合生产.在这一系统中,X-...
- 明欣
- 关键词：克隆表达纯化
- 文献传递
- 一种乳酸球菌来源的X－脯氨酰－二肽氨肽酶及其制法和用途
- 本发明通过基因工程技术克隆到乳酸球菌(Lactococcus lactis)的X－脯氨酰－二肽氨肽酶，该酶能能特异的识别多肽或蛋白质氨基端第二位的脯氨酸，并将其碳端肽键水解，从而去除氨基端的X－脯氨酸二肽。将该酶基因置于...
- 刘景晶明欣肖伟戴翔翎李明慧凌娅扬立丁敏林洁廖正根
- 文献传递
- 假单胞菌海因酶基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达被引量：6
- 2001年
- 目的 :构建海因酶基因工程菌 ,以便实现对羟基苯甘氨酸的工业化生产。方法 :利用PCR技术从恶臭假单胞菌 (Pseudomonasputida) 980 1中扩增得到海因酶基因 ,将该基因插入pMD18 T质粒 ,转化大肠杆菌 (Es cherichiacoli) ,通过地高辛标记原位杂交和海因酶活力测定两种方法 ,筛选出具有海因酶活力的阳性转化子。结果 :工程菌E .coliBL2 1/pMD dht的海因酶活力达到 170 0U/L ,比野生菌恶臭假单胞 980 1菌的酶活力提高 8倍。SDS PAGE显示海因酶的单体分子量约为 5 3KDa ,海因酶的表达量约占菌体总可溶性蛋白的 2 0 %。结论
- 李志强刘景晶胡卓逸王正华明欣
- 关键词：海因酶恶臭假单胞菌基因克隆基因表达大肠杆菌
- 生物活性肽和功能基因片段表达和加工新系统研究
- 刘景晶胡卓逸陈正兰明欣丁敏戴翔翎肖伟凌娅李明慧李泰明吴洁曹荣月唐松山王春晓肖益热杨立张彦凯
- 该课题采用基因工程技术和蛋白质工程技术，设计建立了具有重大应用前景的生物活性肽表达和加工新系统，该系统技术特征如下：构建成可酸水解释放生物活性肽的高效表达系统，事例蛋白表达量占菌体总蛋白40-50%，目标多肽占菌体总蛋白...
- 关键词：
- 关键词：生物活性肽
- 鳖内脏提取物组成成分的研究被引量：1
- 2000年
- Folch’s法和水解法分离提取鳖内脏提取物 ,用GC法 ,Folin酚法 ,HP 10 5 0高效液相色谱仪 ,二苯胺法 ,原子吸收分光光度法分别对脂肪酸、蛋白质、氨基酸、DNA、微量元素进行了分析和测定 ,结果表明 ,鳖内脏提取物中含有的多不饱和脂肪酸达 17 5 5 % ,蛋白质含量为 46 5 % ,精氨酸含量高 ,必需氨基酸组成合理 ,同时含有锌、铁、锰、铜、镁等微量元素 。
- 霍彬徐秀兰李泰明明欣
- 关键词：脂肪酸蛋白质氨基酸微量元素
- 重组乳酸乳球菌X-脯氨酰二-肽酰基-氨基肽酶的纯化及动力学特性(英文)被引量：5
- 2003年
- 重组的乳酸乳球菌X 脯氨酰 二肽酰基 氨基肽酶是一个工具酶 ,它对基因构建的神经肽或活性多肽的转活具有重要意义 .通过细菌细胞的破碎 ,洗涤 ,冷冻离心 ,透析 ,DEAE 纤维素 5 2柱层析等工艺过程达到电泳纯 .该酶比活为 11.92 6U mg ,纯化倍数为 14.37倍和总活性收率为5 5 .5 6% .通过SDS PAGE和凝胶柱层析法 ,测得该二肽酶有单肽链组成 ,分子量 89KD .在该酶的动力学研究中 ,针对特异性底物L 甘氨酰 L 脯氨酰 对 硝基苯胺 ,求得该酶的米氏方程式 1 V =0 0 4 8 [S]+ 0 2 5 66(r =0 994 ) .它的Km 值为 0 1871mmol L ,最大反应速度Vmax为 3 897μmol·L-1·min-1.该酶可被苯甲酰基磺酰氟 ,胰蛋白酶抑制剂和Mn2 +,Ba2 +,Cu2 +andZn2 +等金属离子抑制 ,但可被Mg2 +激活 .进一步试验显示 ,当Cu2 +和Zn2 +浓度增加到 3 72 6mmol L ,抑制作用明显增强 .低浓度的EDTA Na2 (≤ 0 62 12mmol L)不影响酶的活性 .因此 ,该X 脯氨酰 二肽酰基
- 唐松山吴洁谢燕飞明欣胡卓逸刘景晶
- 关键词：丝氨酸蛋白酶动力学特性纯化
