刘景晶
- 作品数：217 被引量：541H指数：12
- 供职机构：中国药科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程农业科学更多>>
- 鼻粘膜免疫融合蛋白Hsp65-6×p277预防NOD小鼠1型糖尿病的发生(英文)被引量：1
- 2006年
- 目的提高多肽p277的免疫原性,从而提高其对自身免疫性糖尿病的预防作用。方法将p2776次重复与Hsp65融合置于pET28a中构建重组Hsp65-6×p277表达质粒。该重组质粒在大肠杆菌BL21中以高效可溶形式表达。依次通过细胞裂解、硫酸铵沉淀、双蒸水透析、DEAE纤维素52柱层析纯化获得目的蛋白。用纯化后的融合蛋白Hsp65-6×p277通过鼻腔给药方式,在不添加任何佐剂的情况下3次免疫4周龄雌性NOD小鼠。每月眼角取血,检测抗体和血糖浓度。结果初步药效学实验表明融合蛋白Hsp65-6×p277可抑制NOD小鼠中1型糖尿病的发生。结论融合蛋白Hsp65-6×p277有可能发展成为一种具有防治胰岛素依赖性糖尿病作用的疫苗。
- 金亮王宇朱爱华刘景晶
- 关键词：热休克蛋白65胰岛素依赖性糖尿病
- 一种新型hPTH(1-34)基因相关肽的制备及其应用的初步研究被引量：4
- 2008年
- 目的:对hPTH(1-34)进行结构改造,提高蛋白水解酶的稳定性,增强酶活性,使之更适合制成滴鼻剂,并验证治疗骨质疏松症的效果。方法:确定将hPTH(1-34)改造成为Pro-Pro-[Arg11]hPTH(1-34)-Pro-Pro后,构建表达质粒pED-4PhPTH(1-34),转化E.coliBL21(DE3)LysE,乳糖诱导表达,经分离纯化获得目的多肽。将目的多肽与二甲基-β-环糊精、聚丙烯酸、EDTA制成滴鼻剂,治疗卵巢摘除大鼠(OVXed Rats)的骨质疏松症。结果:获得纯度较高的Pro-Pro-[Arg11]hPTH(1-34)-Pro-Pro,将制成的滴鼻剂用于卵巢摘除大鼠,与生理盐水滴鼻治疗组相比能显著增加大鼠椎骨骨密度(P<0.01)及股骨头骨小梁厚度(P<0.001),对鼻黏膜没有损伤。结论:Pro-Pro-[Arg11]hPTH(1-34)-Pro-Pro制成滴鼻剂治疗卵巢摘除大鼠的骨质疏松症效果明显,有进一步开发的前景。
- 施小明王春晓庄志华吴洁李泰明曹荣月刘景晶
- 关键词：滴鼻剂骨质疏松症骨密度骨小梁
- 重组人甲状旁腺素1-34分子量测定方法的研究
- 2006年
- 分别采用基质辅助激光解吸离子化-飞行时间质谱法(MALDI-TOF MS)、Tricine-SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(Tricine-SDS-PAGE)和分子排阻色谱法(SEC)测定重组人甲状旁腺素1-34的相对分子质量,为制定该品种的质量标准提供依据。MALDI-TOF/MS测定基质溶液为α-氰基-4-羟基肉桂酸(a-cyano-4-hydroxy-cinnamic acid,CCA);Tricine-SDS-PAGE电泳采用Tris-tricine电极缓冲系统;SEC测定色谱柱为TSK-GELG2 000 SWXL(300mm×7.8mm,5μm);流动相为三氟乙酸-乙腈-水(0.05∶20∶80);检测波长为215nm;流速为0.5 mL.min-1。结果:质谱法测定结果准确,实验值与理论值一致,误差±1;Tricine-SDS-PAGE测定结果与理论值基本一致,误差小于10%;但SEC法测定结果与理论值偏差较大。质谱法适用于产品的质量控制。
- 曾文珊刘景晶徐康森
- 关键词：相对分子质量
- 新的生长激素释放激素类似肽Pro-hGHRH(1-44)-Gly-Gly-Cys的重组和比较活性(英文)被引量：1
- 2009年
- 目的:为了寻找高活性和长半衰期生的GHRH类似肽。方法:通过使用独特的酸敏感水解位点Asp-Pro的原核表达系统,构建了新的Pro-hGHRH(1-44)-Gly-Gly-Cys类似肽。通过重组细菌裂解、包含体洗涤、乙醇分级沉淀、酸水解、SP-SephadexC-25和SephadexG-10柱层析等技术,纯化了高纯度的Pro-hGHRH(1-44)-Gly-Gly-Cys肽。通过使用SDS-PAGE、离子化质谱、雌大鼠垂体和人流产胎儿垂体,测定了多肽的纯度、分子量、生长激素释放活性。结果:Pro-hGHRH(1-44)-Gly-Gly-Cys肽分子量5373Da与实际值吻合,0.1～10μg/ml的肽剂量不论是对人垂体还是大鼠垂体都增加了垂体生长激素的释放,大鼠垂体生长激素的释放具有剂量依赖性。与标准的hGHRH(1-40)肽比较,新的类似肽有较高的GH释放活性。结果也显示了,Pro-GHRH(1-44)Gly-Gly-Cys与Pro-hGHRH(1-44)肽的GH释放活性无统计学差异。结论:新的类似肽有较好的生长激素释放活性、功能选择性和种属特异性。
- 唐松山张娟辉孔欣唐柏山刘景晶
- 一种乳酸球菌来源的X－脯氨酰－二肽氨肽酶及其制法和用途
- 本发明通过基因工程技术克隆到乳酸球菌(Lactococcus lactis)的X－脯氨酰－二肽氨肽酶，该酶能能特异的识别多肽或蛋白质氨基端第二位的脯氨酸，并将其碳端肽键水解，从而去除氨基端的X－脯氨酸二肽。将该酶基因置于...
- 刘景晶明欣肖伟戴翔翎李明慧凌娅扬立丁敏林洁廖正根
- 文献传递
- 抗动脉粥样硬化疫苗的制备及免疫学研究被引量：1
- 2008年
- 为了增强胆固醇酯转移蛋白(CETP)羧基末端的26肽B细胞抗原表位的免疫原性,以大肠杆菌L-门冬酰胺酶II(AnsB)为载体,通过引入2个强的辅助T细胞表位,构建了融合基因AnsB-TTP-PADRE-CET-PC,并在大肠杆菌BL-21(DE3)表达,经过硫酸铵沉淀、DEAE 52纤维素阴离子交换层析、分子筛凝胶过滤层析,最终得到单一电泳条带纯度的目的蛋白。纯化的融合多肽疫苗免疫新西兰大白兔可诱导产生高水平持续存在的抗CETP抗体,从而抑制了CETP酶活力,显著抑制了兔主动脉斑粥样硬化斑的形成和发展。该融合蛋白有希望作为抗动脉粥样硬化疫苗进一步研究开发。
- 孙云霄杨欣龙军李泰明金亮刘景晶
- 关键词：动脉粥样硬化纯化免疫
- 一种Exendin-4类似物
- 本发明属于基因工程制备活性肽领域，公开一种Exendin-4类似物Pro-Pro-Exendin-4(1-35)-Asp肽及其制备方法和应用。采用本实验室的融合表达制备技术平台，构建在大肠杆菌细胞内高效融合表达Pro-P...
- 李泰明谷春娇刘景晶葛晓宇张美由郭凯
- 文献传递
- HSP65重组蛋白质的制备及用途
- 本发明提供一种具有抗肿瘤作用的、源于牛结核分枝杆菌(Mycobacteriiumbovine)热休克蛋白65(国际基因库登录号是M17705)的重组蛋白Hsp65。该蛋白质作用于机体后能显著抑制肿瘤内部及其周围新生血管的...
- 刘景晶谢燕飞鲁勇吴国君林明范豪吴洁曹荣月
- 文献传递
- 聚乙二醇对大肠杆菌L-天冬酰胺酶的化学修饰被引量：21
- 2000年
- 用琥珀酸酐及琥珀酰亚胺两步活化的单甲氧基聚乙二醇对大肠杆菌 L-天冬酰胺酶进行化学修饰。修饰反应的酶活回收率保持在 40 %以上 ,修饰酶的抗热 ,抗胰蛋白酶水解能力有所提高 ,抗原性显著下降。
- 周笑艳刘景晶
- 关键词：化学修饰抗肿瘤
- 一种免佐剂具有防治人胰岛素依赖型糖尿病作用的免疫调节剂
- 本发明提供了一种能用于预防和治疗胰岛素依赖型糖尿病的免疫调节剂。针对抗原多肽的弱免疫原性，将抗原表位多肽基因(源于人HSP60的一段抗原表位p277)六次重复串联反复插入源于牛分枝杆菌(Mycobacterium bov...
- 刘景晶金亮王宇朱爱华陈庆梅李建平熊祺琰曹荣月吴洁
- 文献传递
