徐勇飞
- 作品数：12 被引量：42H指数：4
- 供职机构：江苏省人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金南京市医学科技发展项目南京医科大学科技发展基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- HCV-RNA和抗-HCV的联合检测在丙型肝炎确诊中的临床意义
- 2010年
- 目的:探讨抗-HCV和HCV-RNA的联合检测在丙型肝炎确诊中的临床意义。方法:采用ELISA法检测抗-HCV及实时荧光定量PCR检测HCV-RNA。结果:在急性丙型肝炎组中抗-HCV和HCV-RNA同时阳性所占百分率(29.8%)显著低于慢性丙型肝炎患者(62.3%)(P<0.05);抗-HCV阴性和HCV-RNA阳性在急性丙型肝炎组所占百分率(58.3%)显著高于慢性丙型肝炎患者(24.6%)(P<0.05);经相关性分析,ALT含量与HCV-RNA含量呈正相关性(r=0.725,P<0.05)。结论:临床抗-HCV和HCV-RNA的联合检测有助于丙型肝炎的早期明确诊断。
- 何梅芳赵红霞陈敏潘玉琴何帮顺渠利利徐勇飞
- 关键词：抗-HCVHCV-RNA实时荧光定量PCR丙型肝炎
- CD147-shRNA对胃癌细胞CD147表达的抑制作用
- 2010年
- 目的:构建CD147-shRNA重组质粒并检测其对胃癌细胞SGC7901内源性CD147表达的抑制作用。方法:构建靶向CD147的siRNA表达载体pSilencer-CD147siRNA,稳定转染至SGC7901细胞中,通过Real-time PCR和Western blot法检测转染细胞中CD147表达水平的变化。结果:酶切鉴定和测序证实成功构建pSilencer-siRNA1,pSilencer-siRNA2和pSilencer-negative,转染后SGC7901中CD147表达水平显著降,而以pSilencer-siRNA2抑制作用最为显著。结论:构建pSilencer-CD147siRNA成功,并筛选出基因抑制效果抑制最佳的pSilencer-siRNA2,为进一步实验打下了基础。
- 渠利利王波徐勇飞何帮顺潘玉琴朱婵王书奎
- 关键词：RNA干扰CD147胃癌
- shRNA抑制CD147表达对喉癌细胞株Hep2增殖和侵袭能力的影响被引量：1
- 2011年
- 目的:研究shRNA抑制喉癌细胞株Hep2中CD147表达对喉癌细胞增殖及侵袭能力的影响。方法:将前期构建的重组质粒pSilencer-shRNA1和pSilencer-shRNA2分别转染至喉癌细胞Hep2中,同时以转染空载质粒pSilencer-shRNA-control和空白细胞作为对照,G418筛选稳定转染细胞系。筛选后的4组细胞分别命名为Hep2、Hep2/shRNA-control、Hep2/shRNA1和Hep2/shRNA2。实时荧光定量PCR法和Western blot检测CD147的表达。采用MTT法检测4组细胞增殖能力。采用Transwell法检测4组细胞的体外侵袭能力。结果:转染后的喉癌细胞株Hep2/shRNA1和Hep2/shRNA2中CD147的mRNA和蛋白表达水平与Hep2相比显著下调,细胞增殖能力分别下降到67.49%(P<0.01)和61.37%(P<0.01),侵袭能力也分别下降了61.80%(P<0.01)和73.58%(P<0.01)。结论:CD147 shRNA能下调喉癌细胞株Hep2中CD147的表达,抑制喉癌细胞Hep2的增殖和侵袭能力。
- 朱婵何帮顺潘玉琴徐勇飞王书奎
- 关键词：CD147喉癌
- IGF2基因组印迹系统人重组腺病毒载体的构建与鉴定
- 2009年
- 目的:构建携带IGF2印迹系统的腺病毒载体,并验证其在肿瘤细胞及正常细胞中的功效,为IGF2印迹在肿瘤靶向治疗中的应用提供理论基础。方法:将人源的IGF2印迹系统启动子H19、增强子enhancer及甲基化区域CTCF克隆至穿梭质粒pDC-312中构建IGF2基因印迹系统,从pDC-315-EGFP质粒中扩增出EGFP片段插入到构建好的IGF2印迹系统中,然后与腺病毒骨架Ad5通过脂质体Lipofectamine 2000介导共转染HEK293细胞,包装成有感染能力的腺病毒Ad-H19-CTCF-enhancer-EGFP,命名为Ad-EGFP;构建好的腺病毒分别感染IGF2基因印记保持的细胞MCF-7和GES-1及IGF2基因印迹丢失的细胞HRT-18,荧光显微镜下观察EGFP在三种细胞中表达的差异。结果:转染腺病毒载体的HEK293细胞表达EGFP随着时间逐渐增强,并且出现明显的细胞病变效应,EGFP在HRT-18细胞中有大量表达,在MCF-7和GES-1细胞中不表达或仅有少量表达。结论:成功构建了携带IGF2基因印迹系统的腺病毒载体,证明其在IGF2基因印迹丢失的肿瘤细胞中特异性的表达,在正常细胞及IGF2基因印迹保持细胞中不表达,为IGF2基因印迹系统应用于肿瘤细胞的靶向治疗提供了理论基础。
- 张丽荣渠利利王波何帮顺潘玉琴徐勇飞朱蝉王书奎
- 关键词：基因印迹IGF2靶向治疗
- 内皮抑素治疗肿瘤的研究进展被引量：9
- 2010年
- 内皮抑素(endostain,ES)是一种内源性肽段,可抑制内皮细胞生长进而抑制新血管的生成,具有广谱抗肿瘤活性。尽管ES具有较低的毒性、免疫原性和耐受性等优点,但其对于肿瘤治疗的临床试验效果具有争议。文中对ES的来源、结构、作用机制以及现有的治疗策略作一综述。
- 徐勇飞朱婵渠利利王书奎
- 关键词：内皮抑素
- 2型糖尿病相关基因多态性及其研究进展被引量：7
- 2010年
- 2型糖尿病是1种多基因遗传病,并且与环境因素密切相关。基因的多态性现已成为2型糖尿病研究的热点之一。目前对2型糖尿病相关基因多态性的研究方法众多,且已筛选出大量相关基因的单核苷酸多态性位点。本文介绍了目前在2型糖尿病相关基因多态性研究中常用的候选基因分析法及全基因组关联分析法。同时,对由此获得的与2型糖尿病相关的基因多态性进行综述,对2型糖尿病的防治方向进行展望。
- 渠利利（综述徐勇飞朱婵王书奎
- 关键词：基因
- 重组腺病毒Ad-DT-A靶向治疗胰岛素样生长因子2基因组印迹丢失的肿瘤细胞株被引量：1
- 2011年
- 目的构建携带胰岛素样生长因子2（IGF2）印迹系统的重组腺病毒，探讨其用于肿瘤靶向治疗的可行性。方法采用聚合酶链反应（PCR）扩增H19enhancer、DMD以及H19启动子序列，并克隆至pDC-312中；扩增出增强型绿色荧光蛋白（EGFP）和白喉毒素A（DT．A）片段，分别插入到构建好的重组质粒中，构建成重组腺病毒穿梭质粒。重组腺病毒穿梭质粒与Ad5共转染，产生重组腺病毒Ad—EGFP和Ad—DT—A。以Ad—EGFP分别感染正常IGF2印迹（MOI）细胞GES．1和MCF-7以及IGF2印迹丢失（LOI）细胞HCT-8，荧光显微镜下观察各组细胞中EGFP的表达。通过检测腺病毒衣壳蛋白hexon基因的表达证实腺病毒的感染，采用逆转录聚合酶链反应（RT．PCR）和Western blot方法检测Ad—DT—A感染后各组细胞中DT—A基因的表达；采用四甲基偶氮唑蓝（M1Tr）法和流式细胞术检测Ad—DT—A体外抗肿瘤效应。构建皮下移植瘤裸鼠模型，研究Ad-DT-A在体内的抑瘤作用。结果所构建重组腺病毒Ad-EGFP感染各组细胞后，EGFP蛋白仅在IGF2LOI细胞HCT。8中表达。各组细胞经Ad—DT—A感染后，DT-A基因仅在HCT-8细胞中表达；且HCT-8细胞以每个细胞10PFU的Ad．DT-A感染72h后，其增殖活力降低至（75．4±6．4）％，凋亡率升高至（20．8±5．9）％。Ad-DT-A多点注射人HCT-8移植瘤内，Ad—DT—A能够有效抑制移植瘤的生长，抑瘤率达36．4％。结论成功构建了携带IGF2印迹系统和DT-A基因的重组腺病毒。重组腺病毒Ad—DT-A能够有效杀伤IGF2LOI肿瘤细胞，为依赖IGF2LOI的肿瘤靶向治疗开拓了新的途径。
- 潘玉琴何帮顺朱蝉渠利利徐勇飞王书奎
- 关键词：GES-1细胞靶向治疗重组腺病毒
- 血管紧张素转换酶基因多态性与2型糖尿病发病的相关性研究
- 2010年
- 目的:探讨血管紧张素转换酶基因(ACE)多态性与其血清水平及2型糖尿病(T2D)发生的相关性。方法:应用聚合酶链反应检测T2D患者287例和正常对照组307例健康人的ACE基因Alu重复序列的插入/缺失(I/D)多态性,采用全自动生化分析仪检测ACE活性及血脂水平,采用SPSS11.0软件包统计分析基因型分布和等位基因频率与其活性、血脂水平及T2D的相关性。结果:ACEI/D多态性在T2D组(DD:13.36%、ID:45.93%、II:40.72%)与对照组(DD:13.24%、ID:43.90%、II:42.86%)的基因频率无显著性差异(P>0.05)。T2D组ACE各基因型之间ACE活性有显著性差异(P<0.01)。T2D各基因型的血脂水平分析显示II型与DD型之间HDL有显著性差异(P<0.05)。结论:ACE基因DD型和D等位基因与ACE活性显著相关,但ACEI/D多态性不是T2DM发生的危险因素且无关,DD型与高HDL水平相关。
- 张瑞生徐勇飞朱婵渠丽丽唐志鹏鲍倩田福亮王书奎
- 关键词：2型糖尿病血管紧张素转化酶
- IGF2的生物学特性及其与疾病关系的研究进展被引量：14
- 2010年
- 胰岛素样生长因子-2(insulin-like growth factor 2,IGF2)基因是最早发现的内源性印迹基因,其表达、调控不遵循孟德尔遗传规律。IFG2是一种多功能细胞增殖调控因子,在细胞的分化、增殖、胚胎的生长发育以及肿瘤细胞增殖中具有重要的促进作用。现就IGF2基因结构与定位、表达机制、生物学意义及其与疾病发生的关系等作一综述。
- 朱婵徐勇飞渠利利王书奎
- 关键词：胰岛素样生长因子2基因组印迹肿瘤
- RAS基因多态性与南京地区汉族2型糖尿病血脂异常的相关性研究
- 目的:肾素-血管紧张素系统(Renin-Angiotensin System,RAS)的基因多态性已被报道与心血管疾病有关。但目前关于RAS多态性与2型糖尿病血脂异常(type2diabetes,T2D)的研究国内外并不...
- 徐勇飞
- 关键词：2型糖尿病血脂异常肾素-血管紧张素系统基因多态性
