渠利利
- 作品数：8 被引量：30H指数：3
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- IGF2基因组印迹系统人重组腺病毒载体的构建与鉴定
- 2009年
- 目的:构建携带IGF2印迹系统的腺病毒载体,并验证其在肿瘤细胞及正常细胞中的功效,为IGF2印迹在肿瘤靶向治疗中的应用提供理论基础。方法:将人源的IGF2印迹系统启动子H19、增强子enhancer及甲基化区域CTCF克隆至穿梭质粒pDC-312中构建IGF2基因印迹系统,从pDC-315-EGFP质粒中扩增出EGFP片段插入到构建好的IGF2印迹系统中,然后与腺病毒骨架Ad5通过脂质体Lipofectamine 2000介导共转染HEK293细胞,包装成有感染能力的腺病毒Ad-H19-CTCF-enhancer-EGFP,命名为Ad-EGFP;构建好的腺病毒分别感染IGF2基因印记保持的细胞MCF-7和GES-1及IGF2基因印迹丢失的细胞HRT-18,荧光显微镜下观察EGFP在三种细胞中表达的差异。结果:转染腺病毒载体的HEK293细胞表达EGFP随着时间逐渐增强,并且出现明显的细胞病变效应,EGFP在HRT-18细胞中有大量表达,在MCF-7和GES-1细胞中不表达或仅有少量表达。结论:成功构建了携带IGF2基因印迹系统的腺病毒载体,证明其在IGF2基因印迹丢失的肿瘤细胞中特异性的表达,在正常细胞及IGF2基因印迹保持细胞中不表达,为IGF2基因印迹系统应用于肿瘤细胞的靶向治疗提供了理论基础。
- 张丽荣渠利利王波何帮顺潘玉琴徐勇飞朱蝉王书奎
- 关键词：基因印迹IGF2靶向治疗
- 内皮抑素治疗肿瘤的研究进展被引量：9
- 2010年
- 内皮抑素(endostain,ES)是一种内源性肽段,可抑制内皮细胞生长进而抑制新血管的生成,具有广谱抗肿瘤活性。尽管ES具有较低的毒性、免疫原性和耐受性等优点,但其对于肿瘤治疗的临床试验效果具有争议。文中对ES的来源、结构、作用机制以及现有的治疗策略作一综述。
- 徐勇飞朱婵渠利利王书奎
- 关键词：内皮抑素
- HCV-RNA和抗-HCV的联合检测在丙型肝炎确诊中的临床意义
- 2010年
- 目的:探讨抗-HCV和HCV-RNA的联合检测在丙型肝炎确诊中的临床意义。方法:采用ELISA法检测抗-HCV及实时荧光定量PCR检测HCV-RNA。结果:在急性丙型肝炎组中抗-HCV和HCV-RNA同时阳性所占百分率(29.8%)显著低于慢性丙型肝炎患者(62.3%)(P<0.05);抗-HCV阴性和HCV-RNA阳性在急性丙型肝炎组所占百分率(58.3%)显著高于慢性丙型肝炎患者(24.6%)(P<0.05);经相关性分析,ALT含量与HCV-RNA含量呈正相关性(r=0.725,P<0.05)。结论:临床抗-HCV和HCV-RNA的联合检测有助于丙型肝炎的早期明确诊断。
- 何梅芳赵红霞陈敏潘玉琴何帮顺渠利利徐勇飞
- 关键词：抗-HCVHCV-RNA实时荧光定量PCR丙型肝炎
- IGF2的生物学特性及其与疾病关系的研究进展被引量：14
- 2010年
- 胰岛素样生长因子-2(insulin-like growth factor 2,IGF2)基因是最早发现的内源性印迹基因,其表达、调控不遵循孟德尔遗传规律。IFG2是一种多功能细胞增殖调控因子,在细胞的分化、增殖、胚胎的生长发育以及肿瘤细胞增殖中具有重要的促进作用。现就IGF2基因结构与定位、表达机制、生物学意义及其与疾病发生的关系等作一综述。
- 朱婵徐勇飞渠利利王书奎
- 关键词：胰岛素样生长因子2基因组印迹肿瘤
- X线损伤交叉互补基因1多态性与结直肠癌易感性研究被引量：6
- 2011年
- 目的探讨DNA修复酶X线损伤交叉互补基因1（XRCCl）外显子三个位点的基因多态性（Argl94Trp、Arg280His、Arg399Gln）与结直肠癌（CRC）发病风险的关系。方法以聚合酶链反应和限制性片段长度多态性（PCRRFLP）分析方法，采用病例一对照研究，对250例CRC患者（病例组，其中结肠癌128例，直肠癌122例）和213名健康人（对照组）的XRCCl基因三个位点的多态性进行了检测，采用SPSS11．0软件包统计分析各位点的基因型分布和等位基因频率。结果XRCCl基因194和399二个位点的各基因型频率在两组间分布差异均无统计学意义（P值均〉0．05），但病例组XRCCl基因280Arg／His基因型频率较对照组显著增高（校正后OR=1．66，95％CI：1．01～2．73，P=0．047）。在直肠癌患者组中，280Arg／His基因型频率较对照组显著增高（OR=1．82，95％CI：1．02～3．27），携等位基因280His（Arg280His＋His280His）的CRC患者的频率显著高于其在对照组中的频率（校正后OR1．85，95％CI：1．06～3．22），而在结肠癌患者中风险系数相对较低且差异无统计学意义（校正后OR=1．31，95％CI：0．74～2．35）。结论XRCClArgl94Trp和Arg399Gln基因多态性与结肠癌易感性无关，但280Arg／His基因型能增加CRC易感性，等位基因280His是直肠癌风险因素。
- 朱婵张颖鲍倩徐勇飞渠利利唐志鹏田福亮王书奎
- 关键词：多态现象DNA修复酶类疾病遗传易感性
- RNA干扰抑制CD147表达对人胰腺癌细胞Panc-1增殖、侵袭和吉西他滨敏感性的影响
- 目的:研究CD147 shRNA转染对人胰腺癌细胞Panc-1的CD147表达水平及对Panc-1细胞分泌MMPs、增殖、侵袭及耐药性的影响,并进一步探讨对体内肿瘤生长的影响。 方法: 1.将本实验室前期构建的重组质粒p...
- 渠利利
- 关键词：CD147PANC-1增殖
- 文献传递
- CD147-shRNA对胃癌细胞CD147表达的抑制作用
- 2010年
- 目的:构建CD147-shRNA重组质粒并检测其对胃癌细胞SGC7901内源性CD147表达的抑制作用。方法:构建靶向CD147的siRNA表达载体pSilencer-CD147siRNA,稳定转染至SGC7901细胞中,通过Real-time PCR和Western blot法检测转染细胞中CD147表达水平的变化。结果:酶切鉴定和测序证实成功构建pSilencer-siRNA1,pSilencer-siRNA2和pSilencer-negative,转染后SGC7901中CD147表达水平显著降,而以pSilencer-siRNA2抑制作用最为显著。结论:构建pSilencer-CD147siRNA成功,并筛选出基因抑制效果抑制最佳的pSilencer-siRNA2,为进一步实验打下了基础。
- 渠利利王波徐勇飞何帮顺潘玉琴朱婵王书奎
- 关键词：RNA干扰CD147胃癌
- 重组腺病毒Ad-DT-A靶向治疗胰岛素样生长因子2基因组印迹丢失的肿瘤细胞株被引量：1
- 2011年
- 目的构建携带胰岛素样生长因子2（IGF2）印迹系统的重组腺病毒，探讨其用于肿瘤靶向治疗的可行性。方法采用聚合酶链反应（PCR）扩增H19enhancer、DMD以及H19启动子序列，并克隆至pDC-312中；扩增出增强型绿色荧光蛋白（EGFP）和白喉毒素A（DT．A）片段，分别插入到构建好的重组质粒中，构建成重组腺病毒穿梭质粒。重组腺病毒穿梭质粒与Ad5共转染，产生重组腺病毒Ad—EGFP和Ad—DT—A。以Ad—EGFP分别感染正常IGF2印迹（MOI）细胞GES．1和MCF-7以及IGF2印迹丢失（LOI）细胞HCT-8，荧光显微镜下观察各组细胞中EGFP的表达。通过检测腺病毒衣壳蛋白hexon基因的表达证实腺病毒的感染，采用逆转录聚合酶链反应（RT．PCR）和Western blot方法检测Ad—DT—A感染后各组细胞中DT—A基因的表达；采用四甲基偶氮唑蓝（M1Tr）法和流式细胞术检测Ad—DT—A体外抗肿瘤效应。构建皮下移植瘤裸鼠模型，研究Ad-DT-A在体内的抑瘤作用。结果所构建重组腺病毒Ad-EGFP感染各组细胞后，EGFP蛋白仅在IGF2LOI细胞HCT。8中表达。各组细胞经Ad—DT—A感染后，DT-A基因仅在HCT-8细胞中表达；且HCT-8细胞以每个细胞10PFU的Ad．DT-A感染72h后，其增殖活力降低至（75．4±6．4）％，凋亡率升高至（20．8±5．9）％。Ad-DT-A多点注射人HCT-8移植瘤内，Ad—DT—A能够有效抑制移植瘤的生长，抑瘤率达36．4％。结论成功构建了携带IGF2印迹系统和DT-A基因的重组腺病毒。重组腺病毒Ad—DT-A能够有效杀伤IGF2LOI肿瘤细胞，为依赖IGF2LOI的肿瘤靶向治疗开拓了新的途径。
- 潘玉琴何帮顺朱蝉渠利利徐勇飞王书奎
- 关键词：GES-1细胞靶向治疗重组腺病毒
