张建云
- 作品数：5 被引量：23H指数：4
- 供职机构：石河子大学农学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 侵染加工番茄的BBWV2的分子鉴定及田间检测被引量：6
- 2013年
- 利用蚕豆病毒属的兼并引物对23个加工番茄病株进行RT-PCR检测,其中19株检测出被该属病毒侵染。从中选取4个病株的RT-PCR产物进行克隆和测序,将所得序列经过基因库检索发现,4个序列均与蚕豆萎蔫病毒2(BBWV2)基因组RNA1的序列同源性最高。然后对病毒分离物XJ14-1基因组进行进一步的克隆和测序,获得RNA1组分3659个核苷酸,RNA2组分1300个核苷酸,序列比对结果显示,它们与BBWV2的RNA1和RNA2具有高的序列同源性,分别为76.6%~94%和76.9%~94.1%,而与BBWV1的RNA1和RNA2的序列相似性都很低。因此分子鉴定结果表明,新疆加工番茄受到BBWV2的侵染。利用BBWV2的单克隆抗体对田间不同品种(品系)加工番茄病株进行ELISA检测,结果显示田间病株带毒率达到53.3%,并且供试20品种(品系)均可被BBWV2侵染,该数据表明,BBWV2在田间发生普遍。
- 张建云许文博刘升学黄家风
- 关键词：加工番茄分子鉴定
- 黄瓜花叶病毒和番茄花叶病毒双价抗性RNA沉默表达载体的构建被引量：4
- 2012年
- 利用基因沉默的原理构建了能转录产生dsRNA,诱导植物发生RNA沉默的沉默载体。根据已报道的番茄花叶病毒(ToMV)的运动蛋白基因(MP)和黄瓜花叶病毒(CMV)的沉默抑制子基因(Rep)的核苷酸序列设计特异性引物,扩增到△MP基因片段和Rep基因片段;然后通过重组PCR技术将2个病毒基因进行融合,获得长度为711bp的融合基因△MP-Rep。将融合基因以反向重复的方式与大豆内含子相连,得到含有融合基因反向重复序列的重组质粒pBlue SK-Intron△MP-Rep(i/r)。再用限制性内切酶BamHⅠ切下包含Intron在内的反向重复的融合基因,并定向插入到植物表达载体pBIN438上,构建了含2种病毒基因的植物表达载体pBIN438△MP-Rep(i/r)。酶切和PCR鉴定证明所构建的载体与预期的设计完全一致。该研究结果为利用RNA沉默原理进行植物广谱抗病研究奠定了基础。
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- 关键词：DSRNA融合基因
- dsRNA介导的抗ToMV和CMV植物表达载体的构建被引量：1
- 2012年
- [目的]构建通过表达dsRNA,诱导植物基因沉默机制可抗2种病毒的表达载体。[方法]根据已报道番茄花叶病毒(ToMV)的运动蛋白基因(MP)和黄瓜花叶病毒(CMV)的沉默抑制子基因(2b)的核苷酸序列设计特异性引物,扩增到部分△MP和2b基因;然后通过重组PCR技术将2个病毒基因进行融合,获得长度为676 bp的融合基因△MP-2b。再将融合基因以反向重复的方式与大豆内含子相连,并定向插入到植物表达载体pBIN438上35S启动子下游。[结果]构建了含两种不同病毒来源基因的植物表达载体pBIN438△MP-2b(i/r)。酶切和PCR鉴定证明所构建的载体与预期的设计完全一致。[结论]为利用RNA沉默原理进行植物广谱抗病研究奠定了基础。
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- 关键词：重组PCRRNA沉默
- 新疆辣椒和茄子上两种病毒的分子鉴定
- 辣椒是新疆重要的经济作物,病毒病的不断发生是影响辣椒生产的重要因素。为了明确引起石河子地区辣椒表现茎干及顶端坏死症状的病原种类,利用蚕豆病毒属(Fabavirus)的兼并引物,通过RT-PCR对采自石河子表现茎干及顶端坏...
- 张建云
- 关键词：辣椒茄子分子鉴定番茄黄化曲叶病毒
- 文献传递
- 加工番茄离体再生体系的建立被引量：8
- 2012年
- 以加工番茄‘亚心98-1’和‘里格尔87-5’2个品种的子叶作为外植体,研究不同激素组合对其出愈和诱芽的影响。结果表明,激素的种类和浓度对加工番茄外植体出愈率的影响没有差异,但是诱导形成的愈伤组织形态和不定芽存在差异,ZT与IAA组合对不定芽的诱导效果高于6-BA与IAA组合,不定芽诱导率最高的培养基为MS+ZT0.5mg/L+IAA0.2mg/L。品种之间存在差异,‘亚心98-1’比‘里格尔87-5’更易产生较高比率的正常芽。再生芽在1/2MS+0.1mg/LIAA生根培养基上能正常生根,并发育成完整的小植株。
- 刘炜炜秦荣张伟张建云黄家风
- 关键词：加工番茄子叶
