刘炜炜
- 作品数：5 被引量：17H指数：3
- 供职机构：石河子大学绿洲农作物病害防控重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 蚕豆萎蔫病毒2的分子鉴定及RNA1组分5′末端核苷酸序列分析被引量：4
- 2012年
- 用蚕豆病毒属(Fabavirus)的兼并引物Fab5′R1F和Fab5R′1R对自然感病的4株加工番茄、1株辣椒和2株一串红病株进行RT-PCR,将扩增到的长约400bp的片段进行克隆和测序。结果发现:来自7个病株的9个病毒分离物均为蚕豆萎蔫病毒2(BBWV-2)基因组RNA1组分5′末端的353～392个核苷酸;同源性比较表明,9个序列之间的同源性为90.4%～99.2%,与已报道的BBWV2的同源性为89.5%～95.9%。序列比对发现,BBWV2基因组RNA1组分5′末端非编码区包含了由11个碱基(AAACAGCUUUC)组成的重复序列,而分别来自加工番茄分离物XJ14-1b和一串红的分离物S12在重复序列区段内比其它所有分离物缺少了包括2个重复序列在内的36个碱基。
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- 关键词：分子鉴定
- 加工番茄离体再生体系的建立被引量：8
- 2012年
- 以加工番茄‘亚心98-1’和‘里格尔87-5’2个品种的子叶作为外植体,研究不同激素组合对其出愈和诱芽的影响。结果表明,激素的种类和浓度对加工番茄外植体出愈率的影响没有差异,但是诱导形成的愈伤组织形态和不定芽存在差异,ZT与IAA组合对不定芽的诱导效果高于6-BA与IAA组合,不定芽诱导率最高的培养基为MS+ZT0.5mg/L+IAA0.2mg/L。品种之间存在差异,‘亚心98-1’比‘里格尔87-5’更易产生较高比率的正常芽。再生芽在1/2MS+0.1mg/LIAA生根培养基上能正常生根,并发育成完整的小植株。
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- 关键词：加工番茄子叶
- dsRNA介导的转基因加工番茄抗CMV研究
- 黄瓜花叶病毒（Cucumbermosaicvirus,CMV）是一种寄主范围非常广范的植物病毒，是造成新疆加工番茄坏死条斑病的重要因素，严重影响加工番茄的品质和产量。利用基因工程原理将病毒本身的一些基因转化到植物基因组中...
- 刘炜炜
- 关键词：黄瓜花叶病毒加工番茄抗性植株RNAI技术
- 文献传递
- dsRNA介导的抗ToMV和CMV植物表达载体的构建被引量：1
- 2012年
- [目的]构建通过表达dsRNA,诱导植物基因沉默机制可抗2种病毒的表达载体。[方法]根据已报道番茄花叶病毒(ToMV)的运动蛋白基因(MP)和黄瓜花叶病毒(CMV)的沉默抑制子基因(2b)的核苷酸序列设计特异性引物,扩增到部分△MP和2b基因;然后通过重组PCR技术将2个病毒基因进行融合,获得长度为676 bp的融合基因△MP-2b。再将融合基因以反向重复的方式与大豆内含子相连,并定向插入到植物表达载体pBIN438上35S启动子下游。[结果]构建了含两种不同病毒来源基因的植物表达载体pBIN438△MP-2b(i/r)。酶切和PCR鉴定证明所构建的载体与预期的设计完全一致。[结论]为利用RNA沉默原理进行植物广谱抗病研究奠定了基础。
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- 关键词：重组PCRRNA沉默
- 黄瓜花叶病毒和番茄花叶病毒双价抗性RNA沉默表达载体的构建被引量：4
- 2012年
- 利用基因沉默的原理构建了能转录产生dsRNA,诱导植物发生RNA沉默的沉默载体。根据已报道的番茄花叶病毒(ToMV)的运动蛋白基因(MP)和黄瓜花叶病毒(CMV)的沉默抑制子基因(Rep)的核苷酸序列设计特异性引物,扩增到△MP基因片段和Rep基因片段;然后通过重组PCR技术将2个病毒基因进行融合,获得长度为711bp的融合基因△MP-Rep。将融合基因以反向重复的方式与大豆内含子相连,得到含有融合基因反向重复序列的重组质粒pBlue SK-Intron△MP-Rep(i/r)。再用限制性内切酶BamHⅠ切下包含Intron在内的反向重复的融合基因,并定向插入到植物表达载体pBIN438上,构建了含2种病毒基因的植物表达载体pBIN438△MP-Rep(i/r)。酶切和PCR鉴定证明所构建的载体与预期的设计完全一致。该研究结果为利用RNA沉默原理进行植物广谱抗病研究奠定了基础。
- 秦荣张伟刘炜炜张建云黄家风
- 关键词：DSRNA融合基因
