张义正 作品数:293 被引量:1,813 H指数:24 供职机构: 四川大学生命科学学院四川省分子生物学及生物技术重点实验室 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家科技支撑计划 成都大熊猫繁育研究基金 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 医药卫生 轻工技术与工程 更多>>
酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)基因启动子的分离和鉴定 被引量:6 1995年 用启动子探针型载体pFR109从酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)总DNA中克隆到多个启动子片段,它们在大肠杆菌中均能启动β-半乳糖苷酶基因的表达。对其中Y8片段的进一步分析结果表明:该片段不仅来自酿酒酵母基因组,而且是以多拷贝的形式存在。当Y8片段再次转入供体酵母时,它仍能启动β-半乳糖苷酶基因表达,但经次克隆去掉Y8片段5′端部分顺序后,它就失去了启动子的功能。 赵玮 张义正 王焰玲关键词:酵母 酿酒酵母 基因 启动子 血管瘤内皮细胞增殖机制的初步研究 被引量:2 2004年 目的 :探讨血管瘤内皮细胞活跃增生与猿猴病毒 40大T抗原、端粒酶活性表达及端粒长度变化的关系 ,明确血管瘤发病的相关机制。方法 :应用免疫组化、基于逆转录聚合酶链反应的端粒重复末端扩增分析法及端粒限制性片段分析化学发光、原位杂交法检测血管瘤、鳞状细胞癌、人胚肾内皮细胞的猿猴病毒 40大T抗原、端粒酶活性表达及端粒长度变化。结果 :5 4%和 45 %的血管瘤中分别检出端粒酶、猿猴病毒 40大T抗原的表达 ,猿猴病毒 40大T抗原阳性内皮细胞散在分布。血管瘤端粒长度位于 6.8~ 13 .2kb之间。结论 :猿猴病毒 40对血管内皮细胞的作用与血管瘤的发生有关 ;血管瘤端粒酶活性高于一般良性肿瘤 。 代晓明 李龙江 温玉明 王昌美 刘华 张义正 邓尹琳关键词:血管瘤 增生 端粒酶 端粒长度 马铃薯全生育期内根际微生物组变化规律 被引量:7 2020年 [目的]陆生植物根际环境与土壤中的微生物菌群关系密切,其根际微生物群落动态极可能直接影响着植物健康及养分高效利用。虽然根际益生菌已被证实可用于提高作物生产力,但由于缺乏对这些菌群组成动态变化规律的认识了解,它们的开发受到限制。研究马铃薯全生育期根际菌群的动态变化规律,探讨根际菌群变化与马铃薯发育时期的相关性,为针对马铃薯不同生长时期开发专用生物益生菌肥奠定理论基础。[方法]本研究着眼于马铃薯田间全生命周期微生物组动态变化,通过Illumina MiSeq高通量测序技术对不同时间点马铃薯根际细菌16S rRNA基因V3-V4区和真菌ITS区测序并对操作分类单位(OTU)进行聚类,分析样品间微生物群落的多样性特征,并通过机器学习的方法建立模型,将根际菌群与田间马铃薯发育时间相关联。[结果]根际菌群在马铃薯各个发育阶段随时间变化明显,营养生长阶段的微生物群落结构发生了显著变化,随着结薯期的开始逐渐稳定,直到块茎成熟后期根际菌群再次出现较大变化,且在不同施肥处理间呈现较大差异。进一步基于模型挖掘了与马铃薯发育时间相关联的22个特征细菌类群和16个特征真菌类群,其中苗期和结薯末期的特征类群分别为梭菌(Clostridium)和放线菌(Actinobacteria)。[结论]马铃薯的生长发育时期是影响根际微生物群落组成的主要因素,益生菌肥的添加主要影响马铃薯结薯末期的细菌微生物菌群结构。 颜朗 张义正 清源 方志荣 赖先军关键词:马铃薯 群落动态 甘薯‘徐薯18’转录组分析 被引量:4 2017年 ‘徐薯18’是我国种植时间长和区域广的甘薯品种,该品种的转录组数据库构建及其重要基因的挖掘,对于甘薯遗传多样性分析和分子育种都具有重要意义。本文综述了我们近年来对‘徐薯18’转录组的研究进展,包括利用第2代和第3代测序技术构建‘徐薯18’全长转录组数据库,从转录组数据库中挖掘重要的功能基因以及分析它们的表达等,并展望了未来甘薯转录组研究的发展方向。 颜朗 魏昌赫 张义正关键词:甘薯 转录组 基因挖掘 基因表达 油菜薹茎段髓部原生质体培养再生植株 被引量:3 1998年 以油菜品种“蜀杂6号”的薹茎段髓部为材料分离原生质体,产量一般在每g鲜重2×10~6个左右。在每L附加1.5mgBA、0.4mgNAA、1.5mg2,4-D、200mg水解酪蛋白、250mg木糖、0.3M蔗糖和0.1M葡萄糖的Nitsch培养基中,对原生质体进行液体浅层静置培养。2~7天内原生质体出现第一次分裂,分裂频率最高可达49.2%。培养15天后逐渐形成肉眼可见的小愈伤组织。21天时将培养基改换成每L附加2mgBA、0.2mg 2,4-D和3%蔗糖的MS扩增培养基,45天后可形成5mm左右的愈伤组织。大于2mm的愈伤组织可在每L含有1.0mgBA/3.0mgZT和0.1mgNAA的MS琼脂培养基上分化出芽,分化频率可达36.7%。在1/2MS无激素培养基中,1cm左右的分化芽有85.9%生根,形成完整的植株。 赵云 王茂林 王海燕 张义正关键词:原生质体 植株再生 应用微卫星标记研究西藏野生二棱大麦的遗传多样性及地理分化 被引量:34 2003年 用来自大麦 7个连锁群不同位置的 35个SSR标记研究了西藏不同地区的 5 0份野生二棱大麦 (H .spontaneum )的遗传多样性及地理分化。结果表明 :SSR的多态性高 ,其多态性DNA片段比例达 97.4 4% ;每个SSR位点检测到 1~ 14个等位变异 (4 .0 4个 /位点 ) ;西藏山南地区的遗传多样性和等位变异数最高 ,分别为 0 .4 933和 3.35。变异的 1.0 8%~ 37.5 4% (平均为 13.0 9% )是由于地区的差异引起 ,表现出一定程度的地理分化。最后 ,讨论了SSR引物的选择及SSR标记的可靠性和西藏野生大麦的起源问题。推测西藏山南地区可能是西藏野生二棱大麦的起源中心 ,也是西藏野生大麦和中国栽培大麦的起源中心。 冯宗云 张义正 张立立 凌宏清关键词:青藏高原 微卫星 SSR 辛伐他汀对C2C12细胞中utrophin基因表达的影响(英文) 2012年 本文采用MTT法,观察不同浓度辛伐他汀(0,1,3,10,30 and 100μmol/L)对C2C12细胞活力的影响,并通过定量RT-PCR方法对utrophin和TNF-α基因的mRNA的表达进行了研究.随着辛伐他汀浓度和作用时间的增加,C2C12细胞的活力在降低;不同浓度辛伐他汀对utrophin和TNF-α的mRNA表达具有影响作用,为阐明辛伐他汀的肌毒性作用机理提供了新的思路. 康耀霞 贾恩厚 林亮 段向阳 侯志萍 谭雪梅 张义正关键词:辛伐他汀 UTROPHIN C2C12细胞 一种高对映体选择性环氧化物水解酶及其编码的基因 本发明属于生物技术领域,公布了利用RT-PCR方法克隆一种来源于真菌黄孢原毛平革菌BKM-F1767株系(Phanerochaete chrysosporium BKM-F1767)中的环氧化物水解酶基因(PchEHA)... 冯红 李念 张琳丰 张义正文献传递 柱花草RAPD反应体系的建立及其8个品种遗传多样性分析 被引量:16 2004年 采用两种不同的方法分别从柱花草嫩叶及种子萌发芽中提取了高质量的DNA ,并对柱花草RAPD反应中的各组分浓度及热循环因素进行优化 ,建立了柱花草RAPD反应的最佳条件。在此基础上 ,用 2 0条随机引物对 8个柱花草品种进行了RAPD扩增 ,结果表明 ,其多样性达 5 1 .9% ,品种间的遗传相似系数在 0 .5 3~0 .88之间 ;根据非加权成对平均数法 (UPGMA)进行分类 ,获得了品种聚类树形图 ,8个柱花草品种均被明显分开。 蒋昌顺 葛琴雅 邹冬梅 梁英彩 张义正关键词:柱花草 RAPD反应体系 遗传相似系数 枯草杆菌DC-2纳豆激酶基因的克隆及其融合蛋白在E.coli中的表达 被引量:39 2002年 纳豆激酶是一种纤维蛋白溶解酶 ,有望开发成为新型的溶栓药物 .从中国豆豉中分离的具有较强纤溶活性的枯草杆菌DC 2中提取总DNA ,根据纳豆激酶 (NK)基因序列设计引物 ,用PCR法扩增NK基因 .序列分析表明 ,NK基因成熟肽编码区含有 82 5bp ,编码 2 75个氨基酸残基 ,与文献报道的序列分别有 93 4 %和 94 5 %同源性 .将NK基因插入载体pGEX 4T1构建表达质粒pGEX NK ,转化大肠杆菌JM10 9后 ,经 1mmol LIPTG诱导 4h ,发现大量NK融合蛋白表达 ,并形成包涵体 .SDS PAGE分析表明 ,NK融合蛋白作为包涵体的分子量为 5 3kD .凝胶自动扫描结果显示 ,NK融合蛋白约占菌体可溶性蛋白的 2 6 % . 彭勇 黄庆 张义正关键词:纳豆激酶基因 融合蛋白 基因克隆 大肠杆菌