任琎
- 作品数：6 被引量：1H指数：1
- 供职机构：南京医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省教育厅自然科学基金江苏省基础研究计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 杂交瘤细胞株WXR分泌的抗大鼠ATF3单克隆抗体
- 本发明涉及单克隆抗体，特别涉及一种杂交瘤细胞株WXR分泌的单克隆抗体；一种杂交瘤细胞株WXRCCTCC C201034；一种杂交瘤细胞株WXR分泌的抗大鼠转录激活因子3(ATF3)的单克隆抗体及其制成试剂盒；本发明不仅为...
- 王迎伟夏梅任琎唐奇邱文
- 大鼠ATF3基因克隆与表达及单克隆抗体的制备
- 第一部分大鼠ATF3基因原核表达质粒的构建及其在大肠杆菌中的表达与纯化 目的:构建包含大鼠激活转录因子3(activating transcription factor 3,ATF3)基因不同长度片段的3个重组原核表达质...
- 任琎
- 关键词：ATF3融合蛋白原核表达ATF3合成多肽单克隆抗体
- 文献传递
- 大鼠激活转录因子3单克隆抗体的制备和鉴定
- 2011年
- 目的制备特异性识别大鼠激活转录因子3(ATF3)的单克隆抗体(mAb)。方法根据软件预测的结果合成偶联有匙孔绒血蓝蛋白(key holeli mpet hemocyanin,KLH)的大鼠ATF3第168-181位氨基酸多肽。随后免疫BALB/c小鼠,运用杂交瘤技术制备抗大鼠ATF3的mAb。采用快速定性试纸法鉴定该单克隆抗体的亚型和亚类;通过ELISA、Western blot和免疫组织化学法鉴定单克隆抗体的特性。结果获得一株可稳定分泌抗大鼠ATF3 mAb的杂交瘤细胞,其分泌的ATF3单抗的亚型是IgG1,轻链为κ链。Western blot结果显示,该单抗能够特异性识别大鼠细胞内表达的ATF3蛋白。免疫组织化学检测结果表明,在Thy-1肾炎(Thy-1N)大鼠肾细胞胞质及细胞核内均有ATF3表达,但细胞核内的表达量较为显著。结论成功制备了一株抗大鼠ATF3的mAb,为进一步研究ATF3的生物学功能提供了可用的实验材料。
- 夏梅任琎蒋青桃李妍唐小军邱文赵聃王迎伟
- 关键词：单克隆抗体杂交瘤细胞WESTERNBLOTTHY-1肾炎
- PI3-K/Akt shRNA真核表达质粒的构建及鉴定被引量：1
- 2008年
- 目的:构建针对PI3-K/Akt基因的特异性短发卡RNA(shRNA)真核表达载体。方法:用DNA重组技术将针对大鼠PI3-K/Akt基因不同位点所设计的8个shRNA序列克隆到真核表达质粒pGenesil-1中。在酶切分析及序列测定后,用脂质体转染至大鼠肾小球系膜细胞(GMCs),Western blot检测蛋白的相对表达量来筛选最佳沉默效率的shRNA。结果:限制性酶切及核酸序列分析证明重组质粒正确。Western blot证实在重组质粒中shPik3c3-2、shAkt1-4具有最佳沉默效率。结论:成功构建了PI3-K/Akt shRNA的真核表达质粒。该实验结果为进一步研究PI3-K/Akt信号通路的生物学功能奠定了基础。
- 张艳高玲娟邱文任琎赵聃王迎伟
- 关键词：PI3-K/AKTSHRNA
- 杂交瘤细胞株WXR分泌的抗大鼠ATF3单克隆抗体
- 本发明涉及单克隆抗体，特别涉及一种杂交瘤细胞株WXR分泌的单克隆抗体；一种杂交瘤细胞株WXRCCTCC C201034；一种杂交瘤细胞株WXR分泌的抗大鼠转录激活因子3(ATF3)的单克隆抗体及其制成试剂盒；本发明不仅为...
- 王迎伟夏梅任琎唐奇邱文
- 文献传递
- 大鼠ATF3基因shRNA真核表达质粒的构建及鉴定
- 2009年
- 目的:构建针对大鼠ATF3(activating transcription factor3,ATF3)基因的特异性短发卡RNA(small hairpinRNA,sh RNA)真核表达质粒。方法:用DNA重组技术将针对大鼠ATF3基因不同位点所设计的5个shRNA序列克隆到真核表达质粒pGenesil-1中。在酶切分析及序列测定后,用脂质体将5个shRNA分别转染至大鼠肾小球系膜细胞(glomerular mesangial cells,GMC),随后用Western blot检测蛋白的相对表达量来筛选最佳沉默效率的shRNA。结果:限制性酶切及核酸序列分析证明重组质粒构建正确。Western blot证实在重组质粒中,shATF3-1具有最佳的沉默效率。结论:成功构建了针对ATF3基因的shRNA的真核表达质粒,并且该shRNA可以特异性地降低大鼠肾小球系膜细胞ATF3的蛋白表达。
- 任琎姜孝明夏梅赵聃王迎伟
- 关键词：ATF3SHRNA肾小球系膜细胞
