夏梅
- 作品数：11 被引量：15H指数：3
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- 杂交瘤细胞株WXR分泌的抗大鼠ATF3单克隆抗体
- 本发明涉及单克隆抗体，特别涉及一种杂交瘤细胞株WXR分泌的单克隆抗体；一种杂交瘤细胞株WXRCCTCC C201034；一种杂交瘤细胞株WXR分泌的抗大鼠转录激活因子3(ATF3)的单克隆抗体及其制成试剂盒；本发明不仅为...
- 王迎伟夏梅任琎唐奇邱文
- 文献传递
- 结核杆菌ESAT-6抗原Th1优势表位与FL重组纳米疫苗的制备及其特性研究被引量：5
- 2011年
- 目的:制备适当粒径的壳聚糖纳米粒,并连接质粒,评价该壳聚糖纳米粒对该质粒的结合能力与保护作用,为进一步研究重组纳米疫苗的免疫效果提供基础。方法:采用离子交联法制备成pIRES-TH-FL-壳聚糖纳米粒复合物,用紫外分光光度计检测纳米颗粒对质粒的包埋率;经琼脂糖凝胶电泳分析纳米载体与质粒的结合能力及对该质粒的保护作用;通过喷金电镜观察其大小形态;另用zata电位仪测定粒径和zeta电位;最后用Western blot实验鉴定其在真核细胞中的表达情况。结果:紫外分光光度计检测到该壳聚糖纳米质粒的包埋率为99.28%,琼脂糖凝胶电泳结果显示壳聚糖纳米粒能保护该质粒免受DNaseⅠ的降解。制得的壳聚糖纳米质粒粒径为300 nm左右,zeta电位为32.4 mV。Western blot证实,该纳米质粒能转染293T细胞并表达目的融合蛋白。结论:本实验成功制备了粒径适当且分布均匀的壳聚糖纳米质粒,并能够在体外实现有效表达。
- 蒋青桃冯旰珠夏梅陈霞邱文赵聃王迎伟
- 关键词：结核杆菌壳聚糖纳米粒
- 杂交瘤细胞株WXR分泌的抗大鼠ATF3单克隆抗体
- 本发明涉及单克隆抗体，特别涉及一种杂交瘤细胞株WXR分泌的单克隆抗体；一种杂交瘤细胞株WXRCCTCC C201034；一种杂交瘤细胞株WXR分泌的抗大鼠转录激活因子3(ATF3)的单克隆抗体及其制成试剂盒；本发明不仅为...
- 王迎伟夏梅任琎唐奇邱文
- 大鼠激活转录因子3单克隆抗体的制备和鉴定
- 2011年
- 目的制备特异性识别大鼠激活转录因子3(ATF3)的单克隆抗体(mAb)。方法根据软件预测的结果合成偶联有匙孔绒血蓝蛋白(key holeli mpet hemocyanin,KLH)的大鼠ATF3第168-181位氨基酸多肽。随后免疫BALB/c小鼠,运用杂交瘤技术制备抗大鼠ATF3的mAb。采用快速定性试纸法鉴定该单克隆抗体的亚型和亚类;通过ELISA、Western blot和免疫组织化学法鉴定单克隆抗体的特性。结果获得一株可稳定分泌抗大鼠ATF3 mAb的杂交瘤细胞,其分泌的ATF3单抗的亚型是IgG1,轻链为κ链。Western blot结果显示,该单抗能够特异性识别大鼠细胞内表达的ATF3蛋白。免疫组织化学检测结果表明,在Thy-1肾炎(Thy-1N)大鼠肾细胞胞质及细胞核内均有ATF3表达,但细胞核内的表达量较为显著。结论成功制备了一株抗大鼠ATF3的mAb,为进一步研究ATF3的生物学功能提供了可用的实验材料。
- 夏梅任琎蒋青桃李妍唐小军邱文赵聃王迎伟
- 关键词：单克隆抗体杂交瘤细胞WESTERNBLOTTHY-1肾炎
- CVF耗竭补体对大鼠Thy-1肾炎凋亡病变及其Gadd45γ基因表达的影响
- 目的:研究眼镜蛇毒因子(Cobra venom factor,CVF)耗竭体内补体对Thy-1肾炎大鼠肾小球系膜细胞(Glomerular mesangial cells,GMCs)凋亡病变及其生长阻滞和DNA损伤诱生蛋...
- 邱文冯雪凤车楠夏梅张艳王迎伟
- 文献传递
- 关于七年制医学微生物教学之探索:从病例讨论到主题讨论被引量：4
- 2010年
- PBL教学法在国内外的教学中得到了越来越广泛而且深入的应用。通过改变七年制微生物学传统的病例讨论教学模式,按照《PBL学习效果评价方法和标准》对学生进行调查,结果证明:PBL的主题讨论教学模式应用于教学后,更有助于激发学生学习的主动性和积极性,能够进一步完善学生的科学思维方式,从而获得较好的教学效果。
- 夏梅王迎伟
- 关键词：主题讨论PBL教学医学微生物学
- 基因芯片筛查亚溶解型C5b-9刺激大鼠肾小球系膜细胞基因表达差异的研究
- 2011年
- 目的:应用高通量的基因芯片技术筛查亚溶解型C5b-9(sublytic C5b-9)介导大鼠肾小球系膜细胞(glomerular mesan-gial cells,GMCs)的基因表达谱的变化。方法:体外分离、培养大鼠GMCs,人工质控sublytic C5b-9复合物的形成,并用其刺激培养GMCs,然后分别提取sublytic C5b-9刺激GMCs 40 min、3 h及未刺激对照组细胞的总RNA。经逆转录合成生物素标记的cDNA探针,然后与基因芯片杂交(涵盖31 000个转录本,代表28 000个基因)。经Affymetrix Scanner 3000扫描芯片荧光信号图像、GCOS1.4读取数据后将差异表达基因注释于GO基因功能分类体系,分析其相应的功能。结果:芯片检查数据显示,sublytic C5b-9刺激GMCs 40 min时上调2倍以上及下调2倍以上的基因分别为4 124个和2 234个,刺激3 h时上调2倍以上及下调2倍以上的基因分别为4 512个和2 859个;而sublytic C5b-9刺激GMCs 40 min和3 h后同时上调2倍以上及下调2倍以上的基因分别为2 325个和1 419个。sublytic C5b-9刺激GMCs表达差异基因其功能主要涉及生物学过程调节、生物调节、定位相关、刺激应答、生长发育、增殖、代谢过程、细胞生理过程、多细胞机体过程等。结论:Sublytic C5b-9刺激GMCs确能引起基因表达谱的变化。
- 周颖邱文夏梅周建博李妍赵聃王迎伟
- 关键词：肾小球系膜细胞基因芯片
- 大鼠野生型Gadd45γ基因和Gadd45γshRNA真核表达质粒的构建及鉴定被引量：1
- 2009年
- 目的:构建大鼠野生型Gadd45γ基因和其特异性短发卡状小干涉RNA(shRNA)真核表达质粒,并观察其在大鼠肾小球系膜细胞(GMC)中过表达及沉默Gadd45γ基因的情况。方法:用DNA重组技术将针对大鼠Gadd45γ基因的cds区序列或针对其不同位点所设计的4对shRNA序列分别克隆到真核表达质粒pcDNA3.1/HA或pGCsi.U6.neo.GFP中。在酶切分析及序列测定正确后,用GenEscortTMⅢ转染试剂将上述两种质粒分别转染至大鼠GMCs中,用免疫细胞化学和Western blot检测HA-Gadd45γ融合蛋白的表达及筛选最佳沉默效率的shRNA。结果:限制性酶切及核酸序列分析证明两种重组质粒均构建正确。免疫细胞化学和Western blot分析表明构建的pcDNA3.1/Gadd45γ质粒在大鼠GMCs中能够表达;Gadd45γshRNA-3具有最佳沉默效率。结论:成功构建了大鼠野生型Gadd45γ基因和其特异性的shRNA真核表达质粒,该实验结果为进一步研究Gadd45γ基因的生物学功能奠定了基础。
- 车楠邱文夏梅赵聃王迎伟
- 关键词：SHRNA肾小球系膜细胞
- 大鼠ATF3基因shRNA真核表达质粒的构建及鉴定
- 2009年
- 目的:构建针对大鼠ATF3(activating transcription factor3,ATF3)基因的特异性短发卡RNA(small hairpinRNA,sh RNA)真核表达质粒。方法:用DNA重组技术将针对大鼠ATF3基因不同位点所设计的5个shRNA序列克隆到真核表达质粒pGenesil-1中。在酶切分析及序列测定后,用脂质体将5个shRNA分别转染至大鼠肾小球系膜细胞(glomerular mesangial cells,GMC),随后用Western blot检测蛋白的相对表达量来筛选最佳沉默效率的shRNA。结果:限制性酶切及核酸序列分析证明重组质粒构建正确。Western blot证实在重组质粒中,shATF3-1具有最佳的沉默效率。结论:成功构建了针对ATF3基因的shRNA的真核表达质粒,并且该shRNA可以特异性地降低大鼠肾小球系膜细胞ATF3的蛋白表达。
- 任琎姜孝明夏梅赵聃王迎伟
- 关键词：ATF3SHRNA肾小球系膜细胞
- 大鼠野生型Egr-1基因及Egr-1 shRNA真核表达质粒的构建及鉴定被引量：2
- 2010年
- 目的:构建大鼠野生型早期生长应答基因-1(early growth responsegene-1,Egr-1)及其特异性短发夹状小干涉RNA(shRNA)真核表达质粒,并观察Egr-1在大鼠肾小球系膜细胞(GMC)中过表达及沉默Egr-1基因的情况。方法:用DNA重组技术将针对大鼠Egr-1基因的CDS区序列和针对其不同位点所设计的3对shRNA序列分别克隆到真核表达质粒pcDNA3.1-myc-his-A和pGCsi.U6.neo.GFP中。经酶切分析及序列测定正确后,用GenEscortTMⅢ转染试剂将上述两种质粒分别转染至大鼠GMC中,随后进行Western blot检测Egr-1蛋白的表达及筛选最佳沉默效率的shRNA。结果:限制性内切酶酶切及核酸序列分析证明,两种重组质粒均构建正确。Westernblot分析表明,构建的pcDNA3.1/Egr-1质粒在大鼠GMC中能够表达;Egr-1shRNA-2具有最佳沉默效率。结论:成功构建了大鼠野生型Egr-1基因和其特异性的shRNA真核表达质粒,为进一步研究Egr-1基因的生物学功能提供了必要的实验工具。
- 刘炘刘丽莎邱文夏梅王迎伟
- 关键词：肾小球系膜细胞
