范伟伟
- 作品数：9 被引量：4H指数：1
- 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 低频脉冲磁场调节NO/ONOO-对缺氧/复氧条件下心肌细胞的保护作用
- 2013年
- 目的:观察低频脉冲磁场(LF-PMFs)对缺氧/复氧(H/R)条件下乳鼠心肌细胞增殖与凋亡的影响,并探讨一氧化氮/过氧亚硝基阴离子(NO/ONOO-)平衡在LF-PMFs保护心肌细胞的作用。方法:采用酶消化法分离SD乳鼠心肌细胞,随机分为对照组、H/R组和磁场组。用TUNEL法检测心肌细胞凋亡程度,MTT比色法检测心肌细胞增殖活性,以观察LF-PMFs对损伤心肌细胞的效果,用WST-1法检测超氧阴离子,Griess法测定NO和ONOO-。结果:LF-PMFs磁场可减少H/R诱导的心肌细胞凋亡,并促进心肌细胞的存活,以15 Hz,4.5 mT LF-PMFs磁场的作用效果最为显著。同时LF-PMFs可减少H/R条件下乳鼠心肌细胞超氧阴离子的生成,促进NO生成,提高NO/ONOO-比值。结论:LF-PMFs可通过抗氧化及调节NO/ONOO-平衡减轻H/R导致的心肌细胞损伤。
- 张正勋易甫范伟伟张荣庆王东娟李秀娟曹丰
- 关键词：低频脉冲磁场心肌细胞缺氧复氧NO
- 稳定表达报告基因脂肪间充质干细胞的培养与分子影像鉴定
- 2011年
- 背景:研究显示分子影像技术可以在活体细胞和分子水平对干细胞进行定性和定量研究,对干细胞长程监测具有独特优势。目的:构建稳定表达报告基因的脂肪间充质干细胞,并运用报告基因成像等方法实现其体外和移植后的评价与鉴定。方法:繁殖与筛选携带β-actin-luc报告基因小鼠后,采用改良胶原酶消化法分离培养其脂肪间充质干细胞,取第3代细胞行表面标志鉴定;将脂肪间充质干细胞(1×106)植入BALB/c裸鼠后肢肌肉内,采用萤火虫荧光素酶(fluc)生物发光成像进行体外和体内移植后脂肪间充质干细胞的示踪和定量评价。结果与结论:转基因小鼠稳定携带β-actin-luc报告基因,分离培养出的脂肪间充质干细胞高表达CD90及CD44,而CD45、CD34和CD31呈现低表达,其细胞数与fluc报告基因生物发光信号强度呈显著直线相关(r2=0.96)。细胞活体肌肉移植24h后存活,并显示较强的生物发光信号,在底物荧光素腹腔注射后0～42min内先迅速增强后平缓减弱,21min时最强,达(6.92×106±4.11×105)Photons·s-1·cm-2·sr-1。提示由携带β-actin-luc报告基因小鼠脂肪组织分离的脂肪间充质干细胞高表达间充质干细胞表面标志,可在体外和肌肉组织移植后稳定表达该报告基因并实现细胞的分子影像示踪与定量。
- 范伟伟王亚斌张荣庆李聪叶李霜曹丰
- 关键词：间充质干细胞脂肪间充质干细胞报告基因分子影像干细胞
- 分子影像监测血管内皮细胞生长因子预处理促进体外和体内脂肪间充质干细胞存活与增殖的研究
- 2011年
- 干细胞疗法为缺血性心血管病的组织再生带来希望,然而体内移植后干细胞的不良转归严重制约了其治疗效果。研究表明,血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)或可对干细胞产生保护作用;同时,分子影像可作为干细胞研究的有力手段,实现体内外干细胞生物学过程的可视化与实时定量监测。该研究首先培养了稳定表达萤火虫荧光素酶报告基因的脂肪间充质干细胞,然后运用报告基因光学成像等分子影像学方法,对体外及体内移植后脂肪间充质干细胞的存活与增殖进行示踪和定量分析,并观察VEGF预处理对细胞活性的影响。光学成像和定量分析结果提示,VEGF可以显著改善体外缺氧损伤后脂肪间充质干细胞的生存与增殖,并延长其体内移植后的生存时间。由此证实,分子影像可以对间充质干细胞的体外与体内生物学过程进行无创、直观、高通量监测,并能有效评价保护性因子VEGF对细胞的作用。
- 范伟伟王亚斌张荣庆李聪叶李霜曹丰
- 关键词：分子影像间充质干细胞血管内皮细胞生长因子
- 肝孤核受体激动剂对间充质干细胞修复梗死心肌的作用及机制的分子影像研究
- 研究背景:缺血性心脏病因其发病率高、危险性大,目前已成为严重危害人类健康的疾病.尽管药物及冠脉介入治疗在不断进步,但仍有很多患者由于心肌细胞坏死纤维化,而导致失代偿性心力衰竭.千细胞再生医学为心肌再生带来了希望.在多种干...
- 李春红曹丰范伟伟张铮王慎旭张荣庆李聪叶
- 体内多模态分子影像评价脂肪源性间充质干细胞对小鼠后肢缺血治疗作用的研究
- 目的本研究运用多种模式的体内分子影像学成像方法,观察、监测和评价小鼠脂肪源性间充质干细胞对裸鼠后肢缺血的治疗作用。方法间充质干细胞（MSCs）从携带有Vegfr2-luc基因的转基因小鼠脂肪组织中,采用胶原酶消化法进行分...
- 范伟伟曹丰王亚斌张荣庆李聪叶王海昌
- 文献传递
- 肝X受体激动剂可改善间充质干细胞移植治疗小鼠急性心肌梗死的疗效被引量：1
- 2012年
- 目的 探讨肝x受体（LXR）激动剂对脂肪来源的间充质干细胞移植治疗小鼠急性心肌梗死（MI）的影响。方法酶消化法分离出稳定表达报告基因萤火虫荧光素酶（firefly lueiferase，Fluc＋）小鼠的脂肪间充质干细胞（AD-MSC^Fluc），流式细胞术检测CD90、CD44、CD34、CD45等细胞表面标志物。雄性近交系小鼠（无报告基因表达）随机分成以下4组（每组10只）：（1）假手术组；（2）MI＋PBS组；（3）MI＋AD-MSC^Fluc＋组；（4）MI＋AD-MSC^Fluc＋LXR激动剂（T0901317）干预组，每组分别进行相应的干预。生物发光成像（BLI）检测移植后AD．MSC的存活情况，小动物超声检查评价小鼠心脏功能。结果流式细胞术结果显示脂肪间充质干细胞CD44、CD90阳性，CD34、CIM5阴性。光学成像结果显示AD-MSC^Fluc的光学信号强度与细胞数量呈正相关（r^2=0．98）。术后在体生物发光成像结果显示术后第7、14、2l、28天MI＋AD-MSC^Fluc＋＋319901317组BLI信号强度依次为（1．60±0．11）×10^3、（0．934-0．08）×10^5、（0．554-0．07）×10^5和（0．274-0．05）×10^5P·S^-1·CIll^-2·sr^-1，MI＋AD-MSC^Fluc＋组的BLI信号强度依次为（1．284-0．08）×10^5、（0．56±0．07）×10^5、（0．25±0．05）×10^5和（0．054-0．03）×10^5 P·s^-1·cm^-2·sr^-1，MI＋AD-MSC^Fluc＋。＋39901317组BLI信号强度明显强于MI＋AD-MSC^Fluc＋组相同时间点（P均〈0．05）。小动物超声检测结果显示术后第28天，MI＋PBS组、MI＋AD-MSC^Fluc＋组和MI＋AD-MSC^Fluc＋＋T0901317组小鼠LVEF依次为（27．874-1．81）％、（30．334-1．06）％和（40．494-1．31）％，FS依次为（16．544-0．83）％、（17．83±1．01）％和（25．24±0．99）％，MI＋AD-MSC^Fluc＋＋T0901317组小鼠LVEF和Fs均明显高于其他两组（JP均〈0．05）。结论LXR激动NT0901317可提高移植到小鼠梗死心肌的AD-MSC^Fluc＋的存活率，并能明显改善心�
- 李春红段红莉范伟伟王亚斌张铮张荣庆卜庆婷李秀娟曹丰
- 关键词：心肌梗死间质干细胞移植肝X受体激动剂
- 肝孤核受体激动剂对间充质干细胞的抗缺氧复氧损伤作用及机制
- 2012年
- 目的探讨肝孤核受体(LXR)激动剂对脂肪间充质干细胞(AD-MSCs)缺氧损伤的保护作用及可能机制。方法酶消化法分离稳定表达萤火虫荧光素酶(Fluc)报告基因的小鼠AD-MSCs,流式细胞术检测CD90、CD44、CD34、CD45细胞表面标记物。3代AD-MSCs分为7组:对照组;缺氧6 h/复氧2 h组(缺氧复氧组);缺氧/复氧+DMSO组(DMSO组);缺氧复氧+不同浓度LXR激动剂T0901317干预组(1μmol/L组、5μmol/L组、10μmol/L组、15μmol/L组)。运用Fluc报告基因生物发光成像技术对AD-MSCs细胞增殖进行定量评价,免疫印迹法检测细胞NF-κB表达水平,ELISA法检测AD-MSCs的白细胞介素6(IL-6)、TNF-α分泌水平。结果流式细胞术结果显示.AD-MSCs呈CD44(+)、CD90(+)、CD34(-)、CD45(-)。光学成像结果显示,AD-MSCs细胞数与Fluc平均生物发光信号强度呈正相关(r^2=0.97)。与对照组比较,缺氧复氧组AD-MSCs分泌TNF-α、IL-6、NF-κB明显升高;与缺氧复氧组比较,10μmol/L组AD-MSCs分泌TNF-α、IL-6、NF-κB明显减少(P<0.05,P<0.01)。结论 LXR激动剂可以促进缺氧复氧损伤后AD-MSCs的存活,并能通过NF-κB信号途径抑制炎性因子IL-6、TNF-α的释放,可为干细胞移植治疗心肌缺血再灌注损伤提供新的细胞保护方法。
- 李春红李霜王亚斌范伟伟梁栋李聪叶曹丰
- 关键词：间质干细胞白细胞介素6
- Ghrelin对缺氧复氧状态下脂肪间充质干细胞保护作用的研究被引量：1
- 2011年
- 目的:探讨缺氧复氧损伤环境下Ghrelin对脂肪来源的间充质干细胞(AD-MSCs)的保护作用,以寻求AD-MSCs心肌内移植的有利因素。方法:采用胶原酶消化法分离小鼠AD-MSCs,流式细胞术鉴定其标志。建立缺氧/复氧细胞模型,分3组:①对照组;②缺氧/复氧组(H/R);③H/R+Ghrelin(浓度分别为10-9、10-8、10-7mol/L)干预组。MTT法测定各组细胞增殖,TUNEL法检测细胞凋亡。结果:流式细胞术结果显示AD-MSCs CD44及CD90阳性,CD34、CD45阴性。AD-MSCs MTT分析显示在缺氧环境中,Ghrelin相比于单纯H/R组能够显著促进AD-MSCs的存活与增殖,并抑制其凋亡(P<0.05)。结论:Ghrelin可以明显提高缺氧复氧环境下AD-MSCs的生存与增殖,抑制缺氧诱导的凋亡发生,有望为心肌梗死的干细胞移植治疗创造新的有利因素。
- 高丽娜张荣庆李霜尹志勇范伟伟王海昌曹丰
- 关键词：GHRELIN间充质干细胞缺氧复氧损伤
- 急性心肌梗死患者冠脉介入治疗后血浆apelin的变化及作用被引量：2
- 2014年
- 目的：观察急性心肌梗死（AMI）患者围手术期血浆apelin的表达变化，分析AMI合并2型糖尿病（T2DM）患者血浆apelin的表达与预后的相关性，探讨apelin在冠脉介入治疗（PCI）中的心脏保护作用。方法：72例于2012年2月-8月在我院心内科接受冠状动脉造影确诊为AMI并成功完成PCI的冠心病患者，分别在术前、术后0小时、术后4小时、术后24小时收集血清，酶联免疫吸附法测定血浆apelin-13水平；进一步对糖尿病及非糖尿病AMI患者（每组各20例）进行亚组分析，随访两组患者在术后6个月时主要不良心脑血管事件（MACCE）。结果：AMI患者术后0h组apelin水平与术前基线水平明显降低（31．54±5．48VS35．15±6．48ng／L，P〈0．05）；术后4小时及24小时组apelin水平较术前明显升高（39．65±5．48VS35．15±6．48ng／L，43．93±5．37VS35．15±6．48ng／L，P〈0．05）。糖尿病与非糖尿病组apelin水平术前无明显差异；糖尿病组在术后各时间点的apelin水平均明显高于非糖尿病组（31．12±5．50VS29．21±6．53ng／L，40．57＋5．37VS33．49±3．89ng／L，43．50±7．41VS34．54±3．52ng／L，P〈0．05）。两组术后6个月随访T2DM组LVEF值改善明显高于NT2DM组，但MACCE事件无明显差异。结论：AMI患者PCI术后存在血浆apelin表达的升高，其中糖尿病患者在术后血浆apelin表达较非糖尿病患者明显增高，提示PCI冠脉血运重建可促进糖尿病患者apelin分泌，调节胰岛素抵抗改善预后。
- 杨和旭梁栋张茜范伟伟李伟杰刘兵张东伟王海昌曹丰
- 关键词：急性心肌梗死APELIN冠脉介入治疗
