李霜
- 作品数：11 被引量：6H指数：2
- 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 肝孤核受体激动剂对间充质干细胞修复梗死心肌的作用及机制的分子影像研究
- 本实验利用分子影像等监测手段，在体外建立AD-MSCs缺氧/无血清(H/SD)损伤模型以模拟在体时心梗后局部缺血损伤的微环境，观察LXR激动剂对缺氧/无血清损伤下AD-MSCs的保护作用，并进一步探讨其可能的作用机制；在...
- 李春红曹丰李霜崔明亮李聪叶
- 关键词：分子影像
- 干细胞治疗缺血性心脏病的分子影像评价被引量：1
- 2014年
- 缺血性心脏病(IHD)是目前世界范围内致病和致死的主要原因之一,干细胞(SC)作为一项潜在的治疗手段,成为当今实验室研究的热点,然而在研究过程中,遇到诸多问题:如SC在体的存活率不高及功能发挥不理想等。分子影像,包括多种多样的成像技术,一方面可以非侵入性的观察细胞,另一方面通过较长时间追踪细胞的转归和分化情况,指导优化SC治疗效果。本文将从以下3个方面介绍近年来在分子影像技术SC治疗IHD上的进展及突破:SC移植后在体内存活增殖的分子影像评估;移植SC在体功能的分子成像;针对SC治疗安全性的分子成像。最后,我们对分子影像的应用提出设想和展望。
- 乔红玉李霜曹丰
- 关键词：缺血性心脏病干细胞治疗干细胞分子影像
- 稳定表达报告基因脂肪间充质干细胞的培养与分子影像鉴定
- 2011年
- 背景:研究显示分子影像技术可以在活体细胞和分子水平对干细胞进行定性和定量研究,对干细胞长程监测具有独特优势。目的:构建稳定表达报告基因的脂肪间充质干细胞,并运用报告基因成像等方法实现其体外和移植后的评价与鉴定。方法:繁殖与筛选携带β-actin-luc报告基因小鼠后,采用改良胶原酶消化法分离培养其脂肪间充质干细胞,取第3代细胞行表面标志鉴定;将脂肪间充质干细胞(1×106)植入BALB/c裸鼠后肢肌肉内,采用萤火虫荧光素酶(fluc)生物发光成像进行体外和体内移植后脂肪间充质干细胞的示踪和定量评价。结果与结论:转基因小鼠稳定携带β-actin-luc报告基因,分离培养出的脂肪间充质干细胞高表达CD90及CD44,而CD45、CD34和CD31呈现低表达,其细胞数与fluc报告基因生物发光信号强度呈显著直线相关(r2=0.96)。细胞活体肌肉移植24h后存活,并显示较强的生物发光信号,在底物荧光素腹腔注射后0～42min内先迅速增强后平缓减弱,21min时最强,达(6.92×106±4.11×105)Photons·s-1·cm-2·sr-1。提示由携带β-actin-luc报告基因小鼠脂肪组织分离的脂肪间充质干细胞高表达间充质干细胞表面标志,可在体外和肌肉组织移植后稳定表达该报告基因并实现细胞的分子影像示踪与定量。
- 范伟伟王亚斌张荣庆李聪叶李霜曹丰
- 关键词：间充质干细胞脂肪间充质干细胞报告基因分子影像干细胞
- 瑞舒伐他汀通过PI3K/Akt及ERK信号通路提高脂肪间充质干细胞对小鼠心肌梗死治疗作用
- 目的:探讨脂肪间充质干细胞移(AD-MSCs)植联合瑞舒伐他汀治疗急性心肌梗死的疗效及机制。方法:分离F-luc/GFP转基因小鼠的AD-MSCs,建立小鼠心肌梗死模型,于梗死区周边注射AD-MSCs。BLI连续示踪3周...
- 张铮李霜王亚斌张荣庆李聪叶曹丰
- Apelin促进人诱导性多能干细胞心肌定向分化的研究被引量：2
- 2014年
- 目的探讨Apelin对人诱导性多能干细胞(hiPSC)的心肌定向分化作用。方法 hiPSC经悬浮法诱导形成拟胚体,分为Apelin处理组(Apelin组)和对照组。Apelin组在高糖DMEM培养液中加入10μmol/ml Apelin,分别于第3、7、11、15、21天采用RT-PCR、Western blot法检测及免疫荧光染色,观察干细胞全能性标记物Oct4、心肌祖细胞标记物Nkx 2.5、心肌特异性肌钙蛋白I(cTnI)的表达变化。结果 Apelin组iPSC在诱导分化后第3天Oct4和Nanog基因表达水平明显降低,分别为同期对照组的(63.2±10.1)%和(51.7±1.6)%(P<0.01);诱导分化后第7天Nkx 2.5和cTnI基因表达水平明显升高,分别为同期对照组的(162.4±22.5)%和(250.6±22.3)%(P<0.05,P<0.01);诱导分化后第15天时,cTnI表达为同期对照组的(156.2±6.4)%(P<0.05);免疫荧光染色显示,cTnI阳性细胞明显多于对照组。结论 Apelin可明显促进hiPSC的心肌定向分化。
- 马珂刘通黄炜卜庆婷李秀娟赵传旭李霜王亚斌曹丰
- 关键词：多能干细胞肌钙蛋白
- 分子影像监测血管内皮细胞生长因子预处理促进体外和体内脂肪间充质干细胞存活与增殖的研究
- 2011年
- 干细胞疗法为缺血性心血管病的组织再生带来希望,然而体内移植后干细胞的不良转归严重制约了其治疗效果。研究表明,血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)或可对干细胞产生保护作用;同时,分子影像可作为干细胞研究的有力手段,实现体内外干细胞生物学过程的可视化与实时定量监测。该研究首先培养了稳定表达萤火虫荧光素酶报告基因的脂肪间充质干细胞,然后运用报告基因光学成像等分子影像学方法,对体外及体内移植后脂肪间充质干细胞的存活与增殖进行示踪和定量分析,并观察VEGF预处理对细胞活性的影响。光学成像和定量分析结果提示,VEGF可以显著改善体外缺氧损伤后脂肪间充质干细胞的生存与增殖,并延长其体内移植后的生存时间。由此证实,分子影像可以对间充质干细胞的体外与体内生物学过程进行无创、直观、高通量监测,并能有效评价保护性因子VEGF对细胞的作用。
- 范伟伟王亚斌张荣庆李聪叶李霜曹丰
- 关键词：分子影像间充质干细胞血管内皮细胞生长因子
- 瑞舒伐他汀促进缺氧复氧间充质干细胞增殖的机制研究
- 2011年
- 目的:探讨瑞舒伐他汀对缺氧复氧损伤后脂肪来源间充质干细胞增殖的影响及机制。方法:酶消化法分离小鼠的脂肪间充质干细胞(AD-MSCs),流式细胞术检测CD90、CD44、CD34、CD45等细胞标志物。建立缺氧(H)6h/复氧(R)42h细胞模型,AD-MSCs分为3组:①对照组;②缺氧/复氧组(H/R);③H/R+瑞舒伐他汀干预组(浓度分别为10-8、10-7、10-6mol/L)。MTT法测定各组细胞增殖,免疫印迹法检测细胞内Akt、Erk及其磷酸化的表达水平。结果:流式细胞术结果显示脂肪间充质干细胞CD44及CD90阳性,CD34、CD45阴性。MTT实验显示在缺氧环境中,瑞舒伐他汀的干预可显著增加AD-MSCs的增殖(P<0.05)。Westernblot检测pAkt及pErk的表达在瑞舒伐他汀干预组明显高于对照组和H/R组。(P<0.05)。结论:瑞舒伐他汀可通过Akt、Erk信号途径促进H/R损伤后AD-MSCs的增殖。
- 李霜吴昊张荣庆李聪叶张铮曹丰
- 关键词：瑞舒伐他汀缺氧复氧损伤ERK
- Apelin促进脂肪间充质干细胞增殖分化的分子影像研究被引量：2
- 2011年
- 为探讨apelin促进脂肪间充质干细胞增殖分化及其相关机制的分子影像研究方法,用酶消化法分离β-actin-luc FVB转基因小鼠的脂肪间充质干细胞(AD-MSCs),流式细胞术鉴定干细胞标志,生物发光成像确定细胞荧光素酶的表达。建立缺氧(H)6 h/复氧(R)2 h细胞模型,分3组:对照组、缺氧/复氧组(H/R)和H/R+apelin干预组(10-10～10-5 mol/L)。MTT法和生物发光成像测定各组细胞增殖率,免疫印迹法检测细胞内激酶磷酸化Akt的表达。流式细胞术结果显示脂肪间充质干细胞表达CD44及CD90,而且荧光素酶的表达与细胞数量呈线性相关。在缺氧环境中,apelin的干预可显著促进AD-MSCs的增殖。Western blot检测发现,pAkt的表达在apelin干预组明显高于对照组(P<0.05)。说明apelin可通过Akt信号途径促进脂肪来源间充质干细胞的增殖,抑制缺氧诱导的凋亡发生,为干细胞的替代治疗提供新的辅助治疗靶点。
- 梁栋李霜张荣庆李聪叶朱舜明高丽娜王海昌曹丰
- 关键词：APELIN分子影像间充质干细胞PAKT
- Ghrelin对缺氧复氧状态下脂肪间充质干细胞保护作用的研究被引量：1
- 2011年
- 目的:探讨缺氧复氧损伤环境下Ghrelin对脂肪来源的间充质干细胞(AD-MSCs)的保护作用,以寻求AD-MSCs心肌内移植的有利因素。方法:采用胶原酶消化法分离小鼠AD-MSCs,流式细胞术鉴定其标志。建立缺氧/复氧细胞模型,分3组:①对照组;②缺氧/复氧组(H/R);③H/R+Ghrelin(浓度分别为10-9、10-8、10-7mol/L)干预组。MTT法测定各组细胞增殖,TUNEL法检测细胞凋亡。结果:流式细胞术结果显示AD-MSCs CD44及CD90阳性,CD34、CD45阴性。AD-MSCs MTT分析显示在缺氧环境中,Ghrelin相比于单纯H/R组能够显著促进AD-MSCs的存活与增殖,并抑制其凋亡(P<0.05)。结论:Ghrelin可以明显提高缺氧复氧环境下AD-MSCs的生存与增殖,抑制缺氧诱导的凋亡发生,有望为心肌梗死的干细胞移植治疗创造新的有利因素。
- 高丽娜张荣庆李霜尹志勇范伟伟王海昌曹丰
- 关键词：GHRELIN间充质干细胞缺氧复氧损伤
- 肝孤核受体激动剂对间充质干细胞的抗缺氧复氧损伤作用及机制
- 2012年
- 目的探讨肝孤核受体(LXR)激动剂对脂肪间充质干细胞(AD-MSCs)缺氧损伤的保护作用及可能机制。方法酶消化法分离稳定表达萤火虫荧光素酶(Fluc)报告基因的小鼠AD-MSCs,流式细胞术检测CD90、CD44、CD34、CD45细胞表面标记物。3代AD-MSCs分为7组:对照组;缺氧6 h/复氧2 h组(缺氧复氧组);缺氧/复氧+DMSO组(DMSO组);缺氧复氧+不同浓度LXR激动剂T0901317干预组(1μmol/L组、5μmol/L组、10μmol/L组、15μmol/L组)。运用Fluc报告基因生物发光成像技术对AD-MSCs细胞增殖进行定量评价,免疫印迹法检测细胞NF-κB表达水平,ELISA法检测AD-MSCs的白细胞介素6(IL-6)、TNF-α分泌水平。结果流式细胞术结果显示.AD-MSCs呈CD44(+)、CD90(+)、CD34(-)、CD45(-)。光学成像结果显示,AD-MSCs细胞数与Fluc平均生物发光信号强度呈正相关(r^2=0.97)。与对照组比较,缺氧复氧组AD-MSCs分泌TNF-α、IL-6、NF-κB明显升高;与缺氧复氧组比较,10μmol/L组AD-MSCs分泌TNF-α、IL-6、NF-κB明显减少(P<0.05,P<0.01)。结论 LXR激动剂可以促进缺氧复氧损伤后AD-MSCs的存活,并能通过NF-κB信号途径抑制炎性因子IL-6、TNF-α的释放,可为干细胞移植治疗心肌缺血再灌注损伤提供新的细胞保护方法。
- 李春红李霜王亚斌范伟伟梁栋李聪叶曹丰
- 关键词：间质干细胞白细胞介素6
