胡明明
- 作品数:8 被引量:24H指数:3
- 供职机构:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>
- 发文基金:中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家重点实验室开放基金更多>>
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- 副猪嗜血杆菌菌影的制备被引量:11
- 2011年
- 为研制副猪嗜血杆菌(H.parasuis)菌影疫苗,本实验通过PCR扩增噬菌体PhiX174的裂解基因E,将其连接到含有λPL/PR-cI857启动阻遏系统的pBV220载体中,使裂解基因E与λPL/PR-cI857串联成为温度敏感的裂解盒,构建重组质粒pBV-E。并将含有E基因的裂解盒插入pMD18-T载体中,构建H.parasuis打孔质粒(pMD-E)。采用电击穿孔法将其转入E.coliβ2155中,利用接合的方式将打孔质粒转入H.parasuis 5型菌株中。将含有打孔质粒的H.parasuis在28℃培养至对数生长期,升温到42℃诱导E基因表达,制备H.parasuis菌影。电镜观察菌影形态完整,内容物全部被释放到胞外。本实验为进一步研究菌影疫苗奠定了基础。
- 胡明明常月红张艳禾司薇谢芳于申业刘慧芳刘思国沈楠王春来
- 关键词:副猪嗜血杆菌
- 副猪嗜血杆菌“菌影”的制备
- 本试验通过PCR扩增噬菌体PhiX174的裂解基因E,将该基因连接到含有λP/P-cI857启动阻遏系统的pBV220载体中,从而使裂解基因E和启动阻遏系统λP/P-cI857串联成为温度敏感的裂解盒,构建重组质粒pBV...
- 胡明明常月红张艳禾司薇谢芳于申业刘慧芳刘思国王春来
- 关键词:副猪嗜血杆菌
- 文献传递
- 副猪嗜血杆菌主要血清型特异基因的筛选和鉴定
- 目的:该研究结果用于PCR诊断方法的靶基因,并建立副猪嗜血杆菌主要致病血清型的PCR诊断方法。方法:材料为标准15株血清型副猪嗜血杆菌菌株,根据OD260/280值检测基因组的含量和纯度,电泳凝胶检测基因组DNA的完整性...
- 张艳禾胡明明谢芳王春来
- 关键词:副猪嗜血杆菌靶基因基因筛选
- 副猪嗜血杆菌Plp4蛋白的原核表达及免疫原性分析
- 2012年
- 为原核表达副猪嗜血杆菌Plp4蛋白,本研究通过PCR方法扩增Plp4全长基因并克隆于pET-28a(+)载体中,将重组质粒转化BL21(DE3)感受态中,采用0.4 mM IPTG经22℃诱导表达了35 ku的重组蛋白。经western blot试验证明Plp4蛋白具有良好的反应原性,免疫6周龄昆明小鼠制备免疫血清,ELISA检测表明制备的抗血清效价在1∶15 000以上,表明Plp4蛋白具有良好的免疫原性。
- 朱晓凯赵福广李建军胡明明李艳玲张艳禾谢芳王春来
- 关键词:副猪嗜血杆菌免疫原性
- 副猪嗜血杆菌主要血清型特异基因的筛选和鉴定
- 引言/目的以副猪嗜血杆菌主要致病血清型5型和其他14个血清型为研究对象,利用抑制消减杂交技术(Suppression Subtractive Hybridization,SSH)筛选副猪嗜血杆菌5型的血清型特异基因。目前...
- 张艳禾胡明明谢芳王春来
- 文献传递
- 副猪嗜血杆菌菌影疫苗免疫效力评价
- 通过动物试验对制备的Hps菌影疫苗进行免疫效力检验。将Hps阴性血清的健康幼龄猪,随机分为6组,分别用不同的方式接种不同抗原进行免疫:实验Ⅰ组(菌影疫苗肌肉注射)、实验Ⅱ组(菌影疫苗滴鼻免疫)、实验Ⅲ组(加佐剂的菌影疫苗...
- 胡明明张艳禾谢芳李建军朱晓凯王春来
- 关键词:副猪嗜血杆菌保护力
- 文献传递
- 副猪嗜血杆菌血清5型TbpA蛋白的表达及其免疫原性分析被引量:8
- 2012年
- 为原核表达副猪嗜血杆菌血清5型TbpA蛋白,本研究利用特异性引物扩增tbpA基因,并将其克隆到pMD18-T载体中进行序列测定。再将其亚克隆于pET-28a中构建重组表达质粒pET-tbpA。将其转化受体菌E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导后,SDS-PAGE电泳和western blot分析表明,表达的重组蛋白约106 ku,并以包涵体形式存在。表达的重组蛋白经纯化后,免疫6周龄昆明小鼠制备免疫血清,ELISA分析表明制备的血清抗体效价在1∶3 200以上,表明TbpA具有良好的免疫原性。
- 李建军胡明明朱晓凯李艳玲张艳禾谢芳王春来
- 关键词:副猪嗜血杆菌原核表达
- 副猪嗜血杆菌病的危害及综合防控措施被引量:7
- 2010年
- 副猪嗜血杆菌病又称“革拉瑟氏病”,是由副猪嗜血杆菌(HPS)引起的一种以猪多发性浆膜炎、关节炎、呼吸困难、高热及高死亡率为特征的传染性疾病。随着规模化、集约化养猪业的发展,副猪嗜血杆菌病由过去散发的传染病变为大面积流行,给养猪业带来了巨大经济损失。我们将从近年来副猪嗜血杆菌病的病原学、流行病学、临床症状与病理变化、分子生物学以及临床诊断和防治等方面的研究进展,进而多方面清晰地认识、了解该疾病发病原因及其产生的危害,并以此为现实生产中副猪嗜血杆菌的治疗和综合防控提供借鉴意义,避免此病的流行和暴发。
- 胡明明张艳禾王春来
- 关键词:副猪嗜血杆菌病防控措施传染性疾病多发性浆膜炎分子生物学