李建军
- 作品数:9 被引量:10H指数:2
- 供职机构:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>
- 发文基金:国家重点实验室开放基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 副猪嗜血杆菌血清5型TbpA蛋白的表达及其免疫原性分析被引量:8
- 2012年
- 为原核表达副猪嗜血杆菌血清5型TbpA蛋白,本研究利用特异性引物扩增tbpA基因,并将其克隆到pMD18-T载体中进行序列测定。再将其亚克隆于pET-28a中构建重组表达质粒pET-tbpA。将其转化受体菌E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导后,SDS-PAGE电泳和western blot分析表明,表达的重组蛋白约106 ku,并以包涵体形式存在。表达的重组蛋白经纯化后,免疫6周龄昆明小鼠制备免疫血清,ELISA分析表明制备的血清抗体效价在1∶3 200以上,表明TbpA具有良好的免疫原性。
- 李建军胡明明朱晓凯李艳玲张艳禾谢芳王春来
- 关键词:副猪嗜血杆菌原核表达
- 一种不含抗性标记的猪胸膜肺炎放线杆菌双基因缺失株、其构建方法及应用
- 本发明公开了一种不含抗性标记的猪胸膜肺炎放线杆菌血清7型双基因缺失株,属于细菌基因工程技术领域。本发明公开的一种胸膜肺炎放线杆菌的重组菌APPΔclpPΔapx II C,是采用定向同源重组技术将胸膜肺炎放线杆菌(Act...
- 谢芳王春来张艳禾李建军朱晓凯李艳玲
- 副猪嗜血杆菌细胞致死膨胀毒素CDT各亚基功能研究
- 副猪嗜血杆菌(Haemophilusparasuis,H.arasuis)是猪革拉瑟氏病的病原菌,该病以猪多发性浆膜炎和脑膜炎为主要特征.细胞致死膨胀毒素(Cytolethal Distending Toxins, CD...
- 李艳玲李建军张艳禾周泷崔宁刘娇李刚谢芳王春来
- 副猪嗜血杆菌细胞致死膨胀毒素CdtC亚基的克隆表达及细胞毒性分析被引量:2
- 2013年
- 细胞致死膨胀毒素(CDT)由CdtA、CdtB和CdtC三个亚基构成,是细菌的一种重要毒力因子。为研究副猪嗜血杆菌(H.parasuis)CDT的CdtC亚基的功能,本研究根据G enBank中cdtC基因序列设计引物,扩增cdtC基因,并克隆到原核表达载体pET-28a(+)中进行诱导表达。SD S-PAGE和w estern blot检测目的蛋白主要以包涵体形式存在,分子量约为25 ku。将纯化后的重组蛋白复性后进行体外细胞毒性试验。结果表明,CdtC蛋白对Vero细胞和PK-15细胞有较强的细胞毒性作用。本研究为研究细胞致死膨胀毒素CDT的致病机制奠定了基础。
- 李艳玲李建军周泷崔宁刘娇张艳禾李刚谢芳王春来
- 关键词:副猪嗜血杆菌细胞毒性
- 副猪嗜血杆菌Plp4蛋白的原核表达及免疫原性分析
- 2012年
- 为原核表达副猪嗜血杆菌Plp4蛋白,本研究通过PCR方法扩增Plp4全长基因并克隆于pET-28a(+)载体中,将重组质粒转化BL21(DE3)感受态中,采用0.4 mM IPTG经22℃诱导表达了35 ku的重组蛋白。经western blot试验证明Plp4蛋白具有良好的反应原性,免疫6周龄昆明小鼠制备免疫血清,ELISA检测表明制备的抗血清效价在1∶15 000以上,表明Plp4蛋白具有良好的免疫原性。
- 朱晓凯赵福广李建军胡明明李艳玲张艳禾谢芳王春来
- 关键词:副猪嗜血杆菌免疫原性
- 一种不含抗性标记的猪胸膜肺炎放线杆菌ClpP蛋白酶基因缺失株、其构建方法及应用
- 本发明公开了一种不含抗性标记的猪胸膜肺炎放线杆菌ClpP蛋白酶基因缺失株及其制备方法,属于细菌基因工程技术领域。本发明公开的一种胸膜肺炎放线杆菌的重组菌APPΔclpP,是采用定向同源重组技术将胸膜肺炎放线杆菌(Acti...
- 谢芳王春来张艳禾李建军朱晓凯李艳玲
- 文献传递
- 副猪嗜血杆菌分泌组中主要保护性抗原的筛选与鉴定
- 副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis, HPS)是革拉瑟氏病(Glasser's disease)的病原体,该病以纤维素性多发性浆膜炎、关节炎和脑膜炎为特征,对养猪业危害严重并造成巨大的经济损失.HPS...
- 刘娇李建军崔宁张艳禾谢芳李刚周泷倪洪波王春来
- 关键词:副猪嗜血杆菌保护性抗原蛋白筛选
- 文献传递
- 一种不含抗性标记的猪胸膜肺炎放线杆菌ClpP蛋白酶基因缺失株、其构建方法及应用
- 本发明公开了一种不含抗性标记的猪胸膜肺炎放线杆菌ClpP蛋白酶基因缺失株及其制备方法,属于细菌基因工程技术领域。本发明公开的一种胸膜肺炎放线杆菌的重组菌APPΔclpP,是采用定向同源重组技术将胸膜肺炎放线杆菌(Acti...
- 谢芳王春来张艳禾李建军朱晓凯李艳玲
- 副猪嗜血杆菌重组亚单位疫苗候选抗原蛋白的筛选和确证
- 引言副猪嗜血杆菌(Hps)是猪Gl(a|¨)sser氏病的病原菌,该病以多发性浆膜炎、关节炎、脑膜炎和肺炎以及高发病率和高死亡率为特征。由于Hps血清型的多样性、各血清间交叉保护力低、致病和免疫机制都不是很明了,给该病的...
- 王春来李建军刘娇李艳玲张艳禾李刚谢芳