李艳玲
- 作品数：11 被引量：12H指数：2
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点实验室开放基金哈尔滨市科技创新人才研究专项资金更多>>
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- 一种不含抗性标记的猪胸膜肺炎放线杆菌ClpP蛋白酶基因缺失株、其构建方法及应用
- 本发明公开了一种不含抗性标记的猪胸膜肺炎放线杆菌ClpP蛋白酶基因缺失株及其制备方法，属于细菌基因工程技术领域。本发明公开的一种胸膜肺炎放线杆菌的重组菌APPΔclpP，是采用定向同源重组技术将胸膜肺炎放线杆菌(Acti...
- 谢芳王春来张艳禾李建军朱晓凯李艳玲
- 文献传递
- 副猪嗜血杆菌Plp4蛋白的原核表达及免疫原性分析
- 2012年
- 为原核表达副猪嗜血杆菌Plp4蛋白,本研究通过PCR方法扩增Plp4全长基因并克隆于pET-28a(+)载体中,将重组质粒转化BL21(DE3)感受态中,采用0.4 mM IPTG经22℃诱导表达了35 ku的重组蛋白。经western blot试验证明Plp4蛋白具有良好的反应原性,免疫6周龄昆明小鼠制备免疫血清,ELISA检测表明制备的抗血清效价在1∶15 000以上,表明Plp4蛋白具有良好的免疫原性。
- 朱晓凯赵福广李建军胡明明李艳玲张艳禾谢芳王春来
- 关键词：副猪嗜血杆菌免疫原性
- 副猪嗜血杆菌细胞致死膨胀毒素对细胞毒性机制的研究
- <正>副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,H.parasuis)是引起剐猪嗜血杆菌病的病原,该病主要表现为多发性浆膜炎、关节炎及脑腆炎。细胞致死膨胀毒素(Cytolethal distending t...
- 牛惠李艳玲周泷李大鹏张艳禾李刚谢芳王春来
- 关键词：副猪嗜血杆菌细胞毒性分子机制
- 文献传递
- 一种不含抗性标记的猪胸膜肺炎放线杆菌ClpP蛋白酶基因缺失株、其构建方法及应用
- 本发明公开了一种不含抗性标记的猪胸膜肺炎放线杆菌ClpP蛋白酶基因缺失株及其制备方法，属于细菌基因工程技术领域。本发明公开的一种胸膜肺炎放线杆菌的重组菌APPΔclpP，是采用定向同源重组技术将胸膜肺炎放线杆菌(Acti...
- 谢芳王春来张艳禾李建军朱晓凯李艳玲
- 一种不含抗性标记的猪胸膜肺炎放线杆菌双基因缺失株、其构建方法及应用
- 本发明公开了一种不含抗性标记的猪胸膜肺炎放线杆菌血清7型双基因缺失株，属于细菌基因工程技术领域。本发明公开的一种胸膜肺炎放线杆菌的重组菌APPΔclpPΔapx II C，是采用定向同源重组技术将胸膜肺炎放线杆菌(Act...
- 谢芳王春来张艳禾李建军朱晓凯李艳玲
- 副猪嗜血杆菌细胞致死膨胀毒素CDT各亚基功能研究
- 副猪嗜血杆菌(Haemophilusparasuis,H.arasuis)是猪革拉瑟氏病的病原菌,该病以猪多发性浆膜炎和脑膜炎为主要特征.细胞致死膨胀毒素(Cytolethal Distending Toxins, CD...
- 李艳玲李建军张艳禾周泷崔宁刘娇李刚谢芳王春来
- 胸膜肺炎放线杆菌血清7型S8ΔclpP/ΔapxⅡC/Δfur三基因缺失弱毒株的构建及生物学特性研究被引量：1
- 2014年
- 为进一步致弱胸膜肺炎放线杆菌(APP)毒力,制备基因缺失弱毒疫苗,本研究以本实验室构建的APP血清7型S8菌株双基因缺失株S8ΔclpP/ΔapxⅡC为亲本株,通过同源重组和蔗糖负向筛选的方法,再将铁摄取调节基因fur缺失,构建了无抗生素标记的三基因缺失突变株S8ΔclpP/ΔapxⅡC/Δfur。生物学特性研究表明,该缺失株与野生株S8相比,体外生长速度未发生明显变化,但溶血能力显著下降,与亲本株相比,铁摄取利用轻微降低。致病力试验结果表明,仔猪经气管接种该缺失株毒力显著低于野生型菌株,并且1×109cfu/mL剂量对猪不产生明显的呼吸道症状和肺部病变,表明该缺失株高度安全,可以作为APP基因缺失弱毒活疫苗的候选株。
- 周泷谢芳刘娇崔宁李艳玲牛惠李刚张艳禾王春来
- 关键词：胸膜肺炎放线杆菌基因缺失致弱
- 副猪嗜血杆菌细胞致死膨胀毒素CdtC亚基的克隆表达及细胞毒性分析被引量：2
- 2013年
- 细胞致死膨胀毒素(CDT)由CdtA、CdtB和CdtC三个亚基构成,是细菌的一种重要毒力因子。为研究副猪嗜血杆菌(H.parasuis)CDT的CdtC亚基的功能,本研究根据G enBank中cdtC基因序列设计引物,扩增cdtC基因,并克隆到原核表达载体pET-28a(+)中进行诱导表达。SD S-PAGE和w estern blot检测目的蛋白主要以包涵体形式存在,分子量约为25 ku。将纯化后的重组蛋白复性后进行体外细胞毒性试验。结果表明,CdtC蛋白对Vero细胞和PK-15细胞有较强的细胞毒性作用。本研究为研究细胞致死膨胀毒素CDT的致病机制奠定了基础。
- 李艳玲李建军周泷崔宁刘娇张艳禾李刚谢芳王春来
- 关键词：副猪嗜血杆菌细胞毒性
- 副猪嗜血杆菌重组亚单位疫苗候选抗原蛋白的筛选和确证
- 引言副猪嗜血杆菌(Hps)是猪Gl(a|¨)sser氏病的病原菌,该病以多发性浆膜炎、关节炎、脑膜炎和肺炎以及高发病率和高死亡率为特征。由于Hps血清型的多样性、各血清间交叉保护力低、致病和免疫机制都不是很明了,给该病的...
- 王春来李建军刘娇李艳玲张艳禾李刚谢芳
- 副猪嗜血杆菌血清5型TbpA蛋白的表达及其免疫原性分析被引量：8
- 2012年
- 为原核表达副猪嗜血杆菌血清5型TbpA蛋白,本研究利用特异性引物扩增tbpA基因,并将其克隆到pMD18-T载体中进行序列测定。再将其亚克隆于pET-28a中构建重组表达质粒pET-tbpA。将其转化受体菌E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导后,SDS-PAGE电泳和western blot分析表明,表达的重组蛋白约106 ku,并以包涵体形式存在。表达的重组蛋白经纯化后,免疫6周龄昆明小鼠制备免疫血清,ELISA分析表明制备的血清抗体效价在1∶3 200以上,表明TbpA具有良好的免疫原性。
- 李建军胡明明朱晓凯李艳玲张艳禾谢芳王春来
- 关键词：副猪嗜血杆菌原核表达
