羊健
- 作品数:35 被引量:92H指数:5
- 供职机构:浙江省农业科学院更多>>
- 发文基金:浙江省自然科学基金国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生更多>>
- 一种简单快速同步检测三种水稻病毒的方法
- 本发明涉及一种简单快速同步检测三种水稻病毒的方法,应用一套病毒特异性引物以待测样品总RNA为模板进行一步RT-PCR扩增,该引物共有6条,分别为DRS-1、DRS-2、DRB-1、DRB-2、DSR-1以及DSR-2,它...
- 张恒木吴为奇郭西贵羊健吕明芳陈剑平
- 一种紫马铃薯根尖脱毒与快繁技术
- 本发明公开了一种紫马铃薯根尖脱毒与快繁技术,属于植物脱毒与组培快繁技术领域。该方法包括(1)培养基的配制;(2)根尖脱毒与快繁;(3)紫马铃薯试管苗或试管微型薯的复合病毒感染多重RT-PCR同步快速检测等步骤。该发明依据...
- 严成其陈剑平余初浪王栩鸣杨勇蒋益虹羊健徐刚程晔王芳刘键朱红芬沈岚黄坚
- 文献传递
- 中国小麦花叶病毒(CWMV)复制酶基因在病株体内的表达分析被引量:2
- 2017年
- 中国小麦花叶病毒(Chinese wheat mosaic virus,CWMV)是引起我国小麦花叶病的重要病原之一,其基因组由2条单链正义RNA片段(RNA1-2)组成。本研究根据发表的基因组序列设计特异性引物,扩增了CWMV复制酶基因的部分片段(nt102~1101),并克隆至原核表达载体pGEX-6P1,然后导入大肠杆菌E.coli BL21(DE3)pLysS中诱导表达。重组的复制酶蛋白经亲和层析纯化后免疫家兔制备多克隆抗体。Western-blot分析表明该抗体具有高度的特异性,能用于病株体内CWMV复制酶蛋白的检测。检测分析显示在病株体内,CWMV基因组RNA1可直接充当其复制酶基因的mRNA;在感染的细胞中,其复制酶组分主要是RNA1 ORF1编码的蛋白,分子量约153 kDa,且特异性地定位于膜结构上。
- 张芬张芬羊健羊健李静陈剑平
- 关键词:多克隆抗体复制酶
- 玉米矮缩病流行规律、监测预警与持续控制关键技术研究及应用
- 王华弟陈剑平张恒木王桂跃祝小祥王国迪方屹豪戴德江赵敏羊健王道泽郭荣叶建人
- 玉米矮缩病是世界性的流行性玉米病毒病,研究和防控难度很大。针对该病在该省及华东华北多省大面积暴发成灾,造成玉米产量重大损失,严重威胁粮食安全和农民增收的实际,该项目联合18个单位历经10余年科技攻关,在该病病原分子生物学...
- 关键词:
- 关键词:病害防治
- 一种紫马铃薯根尖脱毒与快繁技术
- 本发明公开了一种紫马铃薯根尖脱毒与快繁技术,属于植物脱毒与组培快繁技术领域。该方法包括(1)培养基的配制;(2)根尖脱毒与快繁;(3)紫马铃薯试管苗或试管微型薯的复合病毒感染多重RT-PCR同步快速检测等步骤。该发明依据...
- 严成其陈剑平余初浪王栩鸣杨勇蒋益虹羊健徐刚程晔王芳刘键朱红芬沈岚黄坚
- 水稻瘤矮病毒P12蛋白抗血清制备及其应用被引量:2
- 2013年
- 为了进一步研究水稻瘤矮病毒(Rice gall dwarf virus,RGDV)P12的功能,将RGDV-GX P12编码区亚克隆至原核表达载体,并导入大肠杆菌诱导表达;重组的P12融合蛋白经Ni-NTA His·Bind Resins纯化后用于免疫小鼠制备抗血清,并进行Western blotting分析。结果显示,约41 kD大小的RGDV P12融合蛋白可在大肠杆菌中高效表达;利用该重组蛋白所制备的抗血清可特异地与融合表达和非融合的P12蛋白发生强烈的免疫学反应。利用该特异性抗血清在病毒粒子样品中检测不到P12蛋白,而在病株总蛋白样品中可检测到1条与预期大小一致的明显条带,表明RGDV P12是一种非结构蛋白。
- 孟媛辛星羊健张恒木王建明陈剑平
- 关键词:水稻瘤矮病毒原核表达抗血清
- 一种同步检测三种水稻病毒的方法
- 本发明涉及一种简单快速同步检测三种水稻病毒的方法,应用一套病毒特异性引物以待测样品总RNA为模板进行一步RT-PCR扩增,该引物共有6条,分别为DRS-1、DRS-2、DRB-1、DRB-2、DSR-1以及DSR-2,它...
- 张恒木吴为奇郭西贵羊健吕明芳陈剑平
- 文献传递
- 中国小麦黄花叶病毒诱导的基因沉默载体的构建和应用
- 本发明主要涉及一种中国小麦黄花叶病毒诱导的基因沉默载体的构建及其在本氏烟中的应用。生物学活性分析显示构建的CWMV‑VIGS能够成功侵染本氏烟并对相关基因如八氢番茄红素脱氢酶、50S ribosomal protein ...
- 羊健张恒木彭琪琪陈炫何龙杨锦陈剑平
- 文献传递
- 一种我国小麦根部禾谷多黏菌分型及其鉴定的方法
- 本发明涉及一种我国小麦根部禾谷多黏菌分型及其鉴定的方法,所述方法为利用禾谷多黏菌的特异性正向引物PSP2(f)和反相引物ITS4(r)对小麦根部基因组DNA进行PCR扩增,判断小麦根部是否存在禾谷多黏菌。再利用正向引物N...
- 李俊敏胡立峰徐雨孙宗涛羊健陈剑平
- 文献传递
- 丹参酮生物合成分子调控机制的研究进展被引量:2
- 2018年
- 丹参Salvia miltiorrhiza是中国的一种传统中草药,对心脑血管疾病的预防和治疗效果显著。由于丹参药用原材料需求量大,其品质越来越受到重视。丹参酮为丹参主要药效成分之一,如何利用最新研究成果进行创新以提高丹参药材的品质是当下研究的热点。论文围绕丹参酮生物合成相关基因和转录调控因子的克隆与功能研究、诱导子促进丹参酮代谢合成的分子机制等方面最新研究展开综述;同时总结了以往研究中存在的问题,并结合自身研究对研究前景进行分析后指出:为了从分子水平上全面阐明丹参酮生物合成的分子调控机制,后续研究应首先围绕丹参酮代谢合成关键调控因子可变剪接的挖掘与分子机制解析;其次是非编码核糖核酸(RNA)在丹参酮代谢合成过程中的调控作用研究;最后是丹参酮合成生物学的探索性研究。
- 李珅林爱真杨媛沈亚芳饶盈羊健刘云辉王洋周伟
- 关键词:植物学丹参丹参酮分子机制