- 慢病毒介导的人凝血因子Ⅷ高效真核表达系统的建立
- 2013年
- 目的应用慢病毒载体系统建立高效稳定表达人凝血因子Ⅷ（FⅧ）的细胞株并评估该表达系统的生物安全性。方法构建携带人B区缺失FⅧ（BDDhFⅧ）和绿色荧光蛋白基因的慢病毒转移质粒BDDhFⅧ／pXZ9及对照pXZ9，包装并浓缩慢病毒颗粒。体外感染中国地鼠卵巢（CHO）细胞后72h取培养上清，ELISA法测定FⅧ抗原表达水平，一期促凝法测定FⅧ活性，RT-PCR检测感染后CHO细胞中FN的转录。检测载体复制能力以评估安全性。结果成功构建携带BDDhFⅧ和绿色荧光蛋白基因的慢病毒转移质粒BDDhFⅧ／pXZ9及对照质粒pXZ9，并制备出高滴度的慢病毒。该慢病毒载体可高效感染CHO细胞，感染后72h培养上清中FⅧ抗原浓度为（1724．9±283．7）mU／ml，FⅧ活性为（10．58±1．55）％，RT-PCR检测到BDDhFⅧ基因的转录。感染后的CHO细胞未检测到gag基因的表达，培养上清中也未检测到病毒。结论慢病毒可以介导人FⅧ在CHO细胞内高效表达；该表达系统不产生子代病毒，具有良好的生物安全性。
- 宋旭光曹江曾令宇张焕新程海王缦王力陈翀徐开林
- 关键词：慢病毒属真核表达中国地鼠卵巢细胞
- BRD4抑制剂GSK525762A对急性B淋巴细胞白血病细胞增殖和凋亡的影响及可能机制
- 目的探究BRD4抑制剂对急性B淋巴细胞白血病细胞生物学行为的影响及可能的机制。方法用BRD4抑制剂GSK525762A抑制急性B淋巴细胞白血病细胞株RS4;11细胞BRD4活性,并以急性T淋巴细胞白血病细胞株Jurkat...
- 陈翀王缦徐杰王力宋旭光张焕新曾令宇徐开林
- 文献传递
- 调节性B细胞的研究进展
- 2013年
- B淋巴细胞能够分化成熟为分泌免疫球蛋白的浆细胞，在体液免疫中发挥重要作用，同时亦可作为抗原提呈细胞递呈抗原参与细胞免疫。近十几年来，研究人员在动物实验中发现了一种新的B细胞亚群——调节性B细胞（Breg），并发现其与系统性红斑狼疮、炎症性肠病等多种疾病有关，还可参与免疫耐受的形成及移植物抗宿主病的调控等，而作用机制主要是通过分泌白细胞介素-10、转化生长因子-β等细胞因子或通过细胞间相互接触等方式发挥作用，但对于其分化、起源及表型特点尚无明确定论。本文主要对Breg的发现与发展、分化、作用机制及与疾病的关系进行概述。
- 王缦陈翀徐开林
- 关键词：调节性B细胞炎症反应白细胞介素-10
- 溴结构域蛋白4抑制剂GSK525762A对急性B淋巴细胞白血病细胞增殖和凋亡的影响及可能机制被引量：4
- 2014年
- 目的 探究溴结构域蛋白4（BRD4）抑制剂对急性B淋巴细胞白血病细胞生物学行为的影响及可能机制.方法 用BRD4抑制剂GSK525762A抑制急性B淋巴细胞白血病细胞株RS4; 11细胞BRD4活性,并以急性T淋巴细胞白血病细胞株Jurkat细胞作对照.采用CCK-8法检测其对细胞增殖的影响;用Annexin Ⅴ/7-AAD标记,流式细胞术检测细胞凋亡;荧光定量PCR检测抗凋亡基因c-myc、Bcl-2、CDK6和促凋亡基因Bad、Bak、Bax的转录水平;Western blot检测Bcl-2及Bak蛋白的表达.结果 不同浓度GSK525762A对RS4; 11细胞增殖均有抑制作用,且呈时间和剂量依赖性,作用48、72 h其半数抑制率分别为6.174和1.996 μmol/L.与DMSO处理组比较,GSK525762A处理后RS4; 11细胞c-myc、Bcl-2、CDK6mRNA转录水平降低,而Bad、Bak、Bax mRNA转录水平升高,且Bcl-2蛋白表达水平下调,Bak蛋白表达水平上调.而GSK525762A对Jurkat细胞的增殖抑制作用并不明显.结论 GSK525762A可抑制RS4; 11细胞的增殖,并促进其凋亡;该作用可能通过下调Bcl-2表达,诱导白血病细胞凋亡而实现的.
- 王缦陈翀徐杰王力宋旭光张焕新曾令宇徐开林
- 关键词：RS4细胞增殖
