段珊
- 作品数：10 被引量：19H指数：2
- 供职机构：山东大学医学院更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- JIP3调控TrkB顺轴突转运
- 脑源性神经营养因子(BDNF)在调节神经元的存活、分化和突触可塑性中起重要作用,它的生物学活性主要通过其酪氨酸激酶受体TrkB介导.靶组织分泌的BDNF与支配它的神经元轴突末梢上的TrkB受体结合后,引发BDNF逆轴突信...
- 黄淑红段珊孙涛王珏耿昭闫靖孙海基陈哲宇
- 关键词：BDNFTRKB
- 表达人NEP基因重组腺病毒载体的构建及其降Aβ作用
- 目的构建携带人全长NEP基因的重组腺病毒载体,包装扩增获得高滴度病毒,检测其对损伤细胞的降Aβ作用。方法构建含NEP基因的腺病毒穿梭载体pAdTrack-nep,并与骨架载体pAdEasy-1在细菌内重组为pAd-NEP...
- 张静段珊杨玲玲崔行
- 关键词：腺病毒淀粉样Β-蛋白阿尔茨海默病
- 文献传递
- 转染NEP基因对Aβ_(25-35)诱导神经元凋亡的保护作用被引量：1
- 2008年
- 目的研究转染NEP基因对神经毒物质Aβ25-35诱导神经元凋亡的保护作用。方法培养大鼠脑皮层神经元,用Aβ25-35作用神经元制备凋亡模型,NEP基因转染神经元。通过MTT法及流式细胞分析法观察NEP基因过表达对Aβ诱导神经元凋亡的保护作用。通过RT-PCR检测目的基因NEP,APP,以及凋亡相关基因Bcl-2和Bax mRNA的表达,Western-Blot测定APP和Aβ的蛋白表达。结果MTT和流式细胞分析法观察,发现在Aβ25-35作用下转染NEP组神经元活,性显著增高(P<0.05),凋亡率降低。RT-PCR及Western Blot结果显示,转染NEP组神经元APP基因的表达明显减少,Aβ的生成减少;同时促凋亡基因Bax表达降低,Bcl-2基因表达增高。结论转染NEP基因能保护Aβ所致的神经元凋亡。
- 张亚伦丁岩邵世滨杨玲玲任凯段珊曾季平崔行
- 关键词：神经元原代培养中性内肽酶
- 人参皂苷Rg1对Aβ_(25-35)诱导的SK-N-SH细胞凋亡的保护作用被引量：1
- 2008年
- 邵世滨丁岩张亚伦段珊崔行
- 关键词：人参皂苷RG1SK-N-SHAΒ25-35神经细胞凋亡活性组份
- 人参皂苷Rg1对过氧化氢诱导SK-N-SH细胞凋亡的保护作用被引量：5
- 2007年
- 目的研究人参皂苷Rg1对过氧化氢(H2O2)诱导SK-N-SH细胞凋亡的影响。方法建立H2O2致SK-N-SH细胞凋亡模型,MTT比色法检测细胞活力;应用流式细胞仪检测细胞凋亡率;DNA梯型观察凋亡细胞的DNA片段化;化学比色法测定细胞培养液和细胞内丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性;RT-PCR检测细胞bcl-2、bax的表达水平。结果100μmol/LH2O2诱导SK-N-SH细胞12h,细胞活力下降(均P<0.01),细胞凋亡率为16.6%,DNA断裂呈片段状,细胞培养液及细胞内MDA含量增加,SOD活性下降,细胞中bax表达明显升高。而人参皂苷Rg1可明显减少细胞损伤,使细胞中bax表达明显减少、细胞培养液及细胞内MDA含量减少、SOD活性增加、细胞凋亡的各项指标均明显改善。结论人参皂苷Rg1对H2O2诱导的SK-N-SH细胞凋亡具有保护作用,其作用机制可能与提高SK-N-SH细胞的抗氧化能力以及减少bax表达有关。
- 邵世滨丁岩张亚伦段珊崔行
- 关键词：人参皂苷RG1过氧化氢细胞凋亡
- 慢病毒介导的脑啡肽酶(NEP)减缓Aβ诱导SK-N-SH细胞凋亡作用研究
- 目的:近年来发现,中性内肽酶(neprilysin,NEP)是脑内最主要的有降解β-淀粉样蛋白(amyloidβ-protein,Aβ)活性的肽酶,其数量改变或活性变化在阿尔茨海默氏病(Alzheimer''''s di...
- 任凯崔云燕杨玲玲丁岩段珊崔行
- 慢病毒介导的中性内肽酶对Aβ诱导的SK-N-SH细胞凋亡的影响被引量：2
- 2008年
- 目的:探讨脑中性内肽酶(NEP)外源表达对神经毒物质β淀粉样肽(Aβ)诱导SK-N-SH细胞凋亡的影响。方法:采用脂质体法将含中性内肽酶NEP的四质粒系统慢病毒载体转染293FT包装细胞,制备高滴度病毒载体,感染Aβ处理的SK-N-SH细胞,用Western blotting方法检测NEP对Aβ的降解作用、MTT法检测细胞存活率、流式细胞术分析细胞凋亡情况、RT-PCR技术测定凋亡相关基因bcl-2及bax的表达及caspase-3活性检测。结果:胞内高表达的NEP能够显著降解Aβ,其降解程度与NEP的表达量有剂量依赖关系。细胞存活率及流式细胞术检测结果显示NEP高表达可减轻Aβ诱导的细胞凋亡,细胞存活率于感染病毒后48 h最强,为对照的170%(P<0.01),NEP活性组的凋亡率为3.86%,低于对照组的6.41%;RT-PCR结果显示NEP对Aβ诱导的细胞凋亡保护作用可能是通过减少bax的表达,抑制了caspase-3的激活程度来实现的。结论:NEP可以降解Aβ,可以保护由Aβ沉积所致的神经细胞凋亡。
- 任凯崔云燕邵世滨张亚伦杨玲玲段珊丁岩崔行
- 关键词：中性内肽酶Β淀粉样肽细胞凋亡
- 人参皂苷Rg1对Aβ_(25-35)诱导的Alzheime′rs病细胞模型作用的研究被引量：8
- 2007年
- 目的研究人参皂苷Rg1对β-淀粉样肽(Aβ25-35)诱导的神经母细胞瘤细胞(SK-N-SH细胞)损伤的保护作用。方法用Aβ25-35处理人SK-N-SH细胞,模拟Alzhermer′s(AD)病人体内神经元病理损伤,并以人参皂苷Rg1拮抗其作用。采用MTT比色法检测细胞活力;应用流式细胞仪检测细胞凋亡率;DNA梯型观察凋亡细胞的DNA片段化;化学比色法测定细胞培养液和细胞内丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性;RT-PCR检测细胞淀粉样肽蛋白前体(APP)基因、中性内肽酶(NEP)基因的表达情况;Western Blot检测细胞APP和NEP蛋白的表达情况。结果20μmol/LAβ25-35诱导SK-N-SH细胞24 h细胞活力下降(均P<0.01),细胞凋亡率为33.9%,DNA断裂呈片段状,细胞培养液及细胞内MDA含量增加,SOD活性降低。而人参皂苷Rg1能提高细胞的存活率,减少细胞损伤,使细胞培养液及细胞内MDA含量降低,SOD活性提高(P<0.01),RT-PCR结果显示人参皂苷Rg1可降低APP基因的表达并提高NEP基因的表达,同时Western Blot结果显示人参皂苷Rg1可降低APP蛋白的表达并提高NEP蛋白的表达。结论人参皂苷Rg1对Aβ25-35造成的细胞毒性具有一定的保护作用,其作用机理可能与人参皂苷Rg1能提高SK-N-SH细胞的抗氧化能力以及下调APP基因的表达,上调NEP基因的表达,从而抑制细胞凋亡有关。
- 邵世滨丁岩张亚伦段珊崔行
- 关键词：人参皂苷RG1Β-淀粉样肽中性内肽酶
- 表达人NEP基因重组腺病毒载体的构建及其降Aβ作用的研究被引量：1
- 2009年
- 目的构建携带人全长NEP基因的重组腺病毒载体,包装扩增获得高滴度病毒,检测其对损伤细胞的降β-淀粉样肽(Aβ)作用。方法构建含NEP基因的腺病毒穿梭载体pAdTrack-nep,并与骨架载体pAdEasy-l在细菌内重组为pAd-NEP,经293细胞包装为增殖缺陷性腺病毒,感染人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞。采用RT-PCR和Westernblot法分析检测NEP的表达水平及感染内源性损伤的SK-N-SH细胞(sweAPP-SK),采用Elisa法初步检测NEP对Aβ的降解程度。结果成功构建重组腺病毒AD-NEP和对照病毒AD-GFP,且重组腺病毒能感染人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞并检测到目的基因的高表达。Elisa结果显示,NEP高表达有明显减轻Aβ在细胞外累积的作用。结论利用细菌内质粒同源重组法可快速简捷地制备表达外源基因的腺病毒,感染AD-NEP的神经细胞通过NEP高表达可以明显减轻Aβ累积。
- 张静段珊杨玲玲崔行
- 关键词：腺病毒淀粉样Β蛋白阿尔茨海默病
- 腺病毒介导的NEP基因对Aβ_(25-35)诱导的SK-N-SH细胞凋亡的抑制作用被引量：2
- 2010年
- 目的研究脑中性内肽酶(NEP)基因外源表达对神经毒性物质β-淀粉样肽(Aβ25-35)诱导损伤的SK-N-SH细胞凋亡的抑制作用。方法用脂质体法将含NEP的腺病毒载体转染高代次293细胞,制备高滴度病毒载体,感染Aβ25-35处理的外源损伤的人神经母细胞瘤细胞(SK-N-SH细胞),采用MTT法检测细胞存活率,采用流式细胞术分析细胞凋亡状态和细胞内活性氧水平,采用RT-PCR和Westernblot法检测凋亡相关基因bcl-2及bax的表达情况。结果细胞存活率及流式细胞术检测结果显示,NEP高表达可明显减轻Aβ25-35诱导的细胞凋亡及减低细胞内活性氧水平,RT-PCR和Western blot结果显示,NEP对Aβ25-35诱导的细胞凋亡的抑制作用可能是通过减少促凋亡基因bax的表达以及降低细胞内活性氧水平来实现的。结论NEP对Aβ25-35诱导的神经细胞损伤具有一定保护作用,其作用机制可能与凋亡相关基因有关。
- 张静王坤杨玲玲段珊崔行
- 关键词：腺病毒淀粉样Β蛋白细胞凋亡阿尔茨海默病
