李亚
- 作品数：14 被引量：27H指数：4
- 供职机构：石河子大学更多>>
- 发文基金：国际科技合作与交流专项项目国家自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 食管鳞癌PLCE1和ENO1的表达与肿瘤微环境内T细胞亚群分布的关系及其意义
- 目的:运用多重荧光免疫组化(mf IHC/IF)技术检测和分析食管鳞癌(ESCC)组织中食管癌易感基因PLCE1、糖代谢相关分子ENO1和FBXW7的表达与肿瘤微环境内T细胞亚群分布的相关性及其临床病理意义,为探讨PLC...
- 李亚
- 关键词：食管鳞癌糖代谢T淋巴细胞
- ApoBR在布鲁氏菌侵染过程中对细胞凋亡影响的研究
- 研究目的:载脂蛋白B(Apo BR)受体是鼠源巨噬细胞膜上载脂蛋白B的受体,定位于巨噬细胞膜上的外围膜蛋白。已有研究证明Apo BR为外膜蛋白OMP-25与巨噬细胞膜作用的潜在受体,它能够调节TNF-α的分泌,同时导致一...
- 车召堂李亚王浩陈创夫郭飞王远志张辉
- 文献传递
- 羊种布氏菌043强毒株BRA0434基因缺失突变株的构建与毒力的初步评价
- 2015年
- 目的检测BRA0434基因对羊种布氏菌043毒力的影响。方法利用同源重组的原理,以BRA0434基因外侧的同源臂序列构建重组质粒,将其电转化至布氏菌043感受态细胞,通过卡那抗性筛选和检测引物鉴定而获得羊种布氏菌043-ΔBRA0434缺失突变株,并以之和羊种布氏菌043以106 CFU剂量腹腔接种小鼠,又以100∶1的感染复数侵染小鼠巨噬细胞。结果与羊种布氏菌043相比,羊种布氏菌043-ΔBRA0434缺失突变株的载菌量和小鼠脾脏重量的影响都有一定程度的下降;侵染小鼠巨噬细胞试验结果显示羊种布氏菌043-ΔBRA0434缺失突变株的毒力较羊种布氏菌043有所降低。结论BRA0434基因的缺失会减轻羊种布氏菌043的毒力。
- 纪太旺李志强张辉张俊波赵庆亮王浩李亚王慧勤陈创夫
- 关键词：布氏菌毒力
- ApoBR在布鲁氏菌侵染过程中对细胞凋亡影响的研究
- 研究目的：载脂蛋白B(ApoBR)受体是鼠源巨噬细胞膜上载脂蛋白B 的受体,定位于巨噬细胞膜上的外围膜蛋白.已有研究证明ApoBR 为外膜蛋白OMP-25 与巨噬细胞膜作用的潜在受体,它能够调节TNF-α的分泌,同时导致...
- 车召堂李亚王浩陈创夫王远志张辉
- ApoBR在布鲁氏菌侵染过程中对细胞凋亡影响的研究被引量：4
- 2014年
- 目的探讨载脂蛋白B受体基因ApoBR在布鲁氏菌侵染小鼠巨噬细胞RAW264.7所引起的细胞凋亡的影响。方法构建、筛选干扰ApoBR基因的慢病毒干扰载体,并干扰小鼠巨噬细胞ApoBR的表达;以牛种布鲁氏菌2308株侵染巨噬细胞,分别在侵染后4、8、12和24h收集细胞和上清液,采用实时荧光定量PCR和ELISA法检测ApoBR基因、肿瘤坏死因子TNF-α以及凋亡相关基因Bax、Bcl-2表达水平;做胞内菌的CFU计数,利用流式细胞仪检测细胞的凋亡率。结果慢病毒转染后pLentiLox-253和pLentiLox-1325组ApoBR mRNA细胞抑制率分别为53.3%和57.4%;TNF-α表达水平较对照组升高(P<0.05);CFU计数显示,细菌侵染后8h,巨噬细胞凋亡抑制率达到最高,253实验组抑制率为71.7%,1325实验组抑制率为67.0%;在不同时间点促凋亡基因Bax表达水平上调,而抑制凋亡基因Bcl-2表达水平下调。结论载脂蛋白B受体蛋白在布鲁氏菌早期感染引起的细胞凋亡过程中起到减缓细胞凋亡的作用,为进一步研究布鲁氏菌在巨噬细胞内的分子机制奠定了基础,也为寻找治疗布鲁氏菌的有效药物和疫苗提供了理论依据。
- 车召堂李亚王浩陈创夫郭飞王远志张辉
- 关键词：慢病毒载体细胞凋亡
- ApoBR在布鲁氏菌胞内寄生中的功能研究
- 布鲁氏菌病是由布鲁氏菌/(Brucella/)引起的一种人畜共患传染病，人感染布病后的临床症状主要表现为波浪热；动物感染后主要为流产、睾丸炎等症状。布鲁氏菌可长期寄生在巨噬细胞内并抑制感染细胞的凋亡，引起人、畜的多器官损...
- 李亚
- 关键词：布鲁氏菌RNAI巨噬细胞细胞凋亡
- 文献传递
- 流产布鲁氏菌2308株磷酸甘露糖变位酶pmm基因缺失株构建及鉴定
- 2014年
- 旨在构建流产布鲁氏菌2308株pmm基因缺失株。PCR扩增流产布鲁氏菌2308株pmm基因的上、下游同源臂片段,并与枯草芽孢杆菌上SacB基因片段融合。连接至自杀载体PGEM-7Zf+,构建自杀载体PGEM-7Zf+Δpmm-SacB。电转化至流产布鲁氏菌2308株感受态细胞内,通过氨苄抗性和蔗糖敏感性筛选,获得基因缺失株2308Δpmm,对其进行PCR鉴定和稳定性检测。成功构建可稳定遗传的2308Δpmm基因缺失株,并在15代内未发生回复。在此基础上可以对2308Δpmm进行深入研究。
- 李亚张辉郭飞陈创夫张科桂丹温书香纪太旺张欢
- 关键词：基因缺失株
- 布鲁杆菌侵染巨噬细胞过程中与外膜蛋白25作用的受体筛选被引量：1
- 2014年
- 目的 筛选布鲁杆菌侵染巨噬细胞过程中与布鲁杆菌外膜蛋白（OMP）25作用的受体.方法 利用已经构建的pET32a-omp25表达载体,在异丙基硫代半乳糖苷OPTG）诱导下表达重组OMP25.蛋白,Ni-NTA柱纯化OMP25蛋白;采用噬菌体展示技术从M13噬菌体环形多肽展示库中进行环形7肽（c7c）的筛选;生物信息学软件分析筛选出潜在多肽,用酶联免疫吸附试验（ELISA）验证OMP25与多肽分子的结合活性;合成结合力高的7肽分子,用菌落形成单位计数和ELISA法检测其在布鲁杆菌感染小鼠巨噬细胞过程中的功能.结果 噬菌体展示技术共筛选出42个7肽分子;生物信息学软件分析筛选出4个潜在多肽,ELISA证实4个7肽分子（ST-7、MT-7、TT-7和SN-7）能够与布鲁杆菌OMP25蛋白具有高亲和力;菌落形成单位计数结果显示：多肽分子ST-7、MT-7、TF-7和SN-7在布鲁杆菌黏附或抑制胞内寄生中均有一定作用.ST-7、MT-7、TF-7和SN-7对牛种布鲁杆菌2308菌株的抑制率范围分别为14.4％～51.8％、49.6％～69.5％、43.2％～74.4％、57.5％ ～82.2％.ELISA结果显示,与对照组比较,ST-7和MT-7多肽实验组肿瘤坏死因子（TNF-α）的量在各个时间点的差异无统计学意义（P均＞ 0.05）;而TF-7和SN-7多肽实验组TNF-α的量在8h前差异无统计学意义（P均＞0.05）,但在12、24h时促进TNF-α的分泌,差异具有统计学意义（P均＜0.05）.结论 筛选获得4个有效的OMP25作用受体,其中TF-7、SN-7对布鲁杆菌2308侵染小鼠巨噬细胞既抑制入侵又抑制胞内生存,ST-7、MT-7对其只起抑制入侵的作用.
- 李亚王远志陈创夫
- 关键词：布鲁杆菌噬菌体展示技术巨噬细胞MEMBRANEPROTEIN
- 三种转染试剂对PEF细胞与BHK细胞转染效率的比较被引量：10
- 2013年
- 【目的】比较三种转染试剂对原代细胞和传代细胞的转染效率,选择合适的转染试剂。【方法】以EGFP为报告基因,分别用脂质体、磷酸钙、罗氏试剂转染PEF细胞和BHK细胞。通过改变转染试剂和质粒DNA的剂量,利用流式细胞仪分析转染效率,从而确定最佳的转染试剂。【结果】对于PEF细胞,脂质体和磷酸钙转染效果不理想,细胞死亡率高,绿色荧光表达量少。罗氏转染试剂相对较好,细胞死亡率低,并且保持原有细胞形态。对于传代细胞BHK细胞而言,各转染试剂均可达到理想转染效果。【结论】不同的细胞对转染试剂的选择也不同,传代细胞BHK用脂质体即可达到理想的效果。利用罗氏试剂可以提高转染效率,但不明显。而对于原代细胞PEF,脂质体与磷酸钙试剂的转染效率很低。相比较而言,罗氏转染试剂效果更好些,细胞毒性小,转染率在10%～12%。
- 张文智李亚王鹏雁陈创夫
- 关键词：转染
- 流产布鲁氏菌2308株磷酸甘露糖变位酶pmm基因缺失株构建及鉴定
- 布鲁氏菌是兼性厌氧性革兰氏阴性细菌,主要造成人和动物的流产.当布鲁氏菌引起慢性感染时,主要引起宿主生殖系统的疾病.流产布鲁氏菌2308株为光滑型,具有完整的脂多糖(LPS),由于布鲁氏菌的LPS 不像其他的革兰氏阴性细菌...
- 李亚张辉郭飞陈创夫张科桂丹温书香纪太旺张欢
- 关键词：流产布鲁氏菌基因缺失株脂多糖
