张辉
- 作品数：406 被引量：990H指数：14
- 供职机构：石河子大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国际科技合作与交流专项项目国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- LPS诱导肺泡巨噬细胞法对奶牛GM-CSF的克隆与序列分析
- 2009年
- 傅军科盛金良张辉冯晓山孙延鸣
- 关键词：肺泡巨噬细胞粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子CSF
- 人畜布鲁氏菌抗体免疫层析试纸及其制备方法
- 本发明涉及人畜共患病免疫诊断领域，公开了一种基于胶体金为标记材料的布鲁氏菌病抗体检测免疫层析试纸条及其制备方法。该布鲁氏菌病抗体快速检测技术以金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)标记40纳米的胶体金，喷涂在玻璃纤维上制成金标垫...
- 陈创夫张辉王远志石峰鲁之子孟茹
- 文献传递
- 布鲁氏菌抗体胶体金免疫层析法快速检测技术的建立
- 本研究拟应用胶体金免疫层析法(GICA)研制牛布鲁氏菌病诊断试剂条,以期用于布鲁氏菌病的快速检测,尤其是基层畜牧兽医站对本病的初筛.本文拟建立一种快速检测布鲁氏菌抗体的新方法.以大肠埃希菌表达、纯化的OMP31与BP26...
- 程婷婷张辉郭飞李志强桂丹刘娟陈创夫
- 关键词：动物医学布鲁氏菌病抗体检测胶体金免疫层析法
- 文献传递
- 单增李斯特菌IspD蛋白生物信息学分析及表达纯化
- 2023年
- 【目的】对单增李斯特菌IspD蛋白的潜在生物学功能进行预测分析,并表达纯化IspD蛋白,为后续IspD蛋白的研究提供理论支撑。【方法】从NCBI中获得单增李斯特菌IspD的编码序列(基因ID:986270)和氨基酸序列(登录号:NP_464611.1),运用生物信息学软件对IspD蛋白编码序列进行开放阅读框分析,对氨基酸序列进行基本特性、空间结构、抗原表位、修饰化位点、蛋白互作及相似性等预测分析。对IspD蛋白编码序列进行密码子优化并合成,采用无缝克隆法构建重组质粒pET-32a-IspD并转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,将测序和双酶切验证正确的阳性克隆经IPTG低温过夜诱导表达,采用镍柱亲和层析法纯化得到IspD融合蛋白,利用SDS-PAGE和Western blotting验证IspD融合蛋白表达、纯化及反应原性。【结果】IspD蛋白编码基因为lmo1086,全长711 bp,共有4个开放阅读框,其中ORF1为最长的开放阅读框,可编码236个氨基酸。氨基酸序列分析显示,IspD蛋白无跨膜结构域、信号肽,是一种亲水性蛋白,亚细胞定位于细胞质中,为2-C-甲基-D-赤藓糖醇-4-磷酸胞苷酰基转移酶。α-螺旋、延伸链、β-转角和无规则卷曲参与了IspD蛋白二级结构的组成,三级结构模型预测与二级结构特点相符。IspD蛋白具有多个T、B细胞抗原表位、固定无序结构域、磷酸化、糖基化、甲基化及乙酰化修饰位点。蛋白互作分析显示,IspD蛋白与DXR、IspF、ipk等多个蛋白存在相互作用,IspD与其相互作用最强的DXR蛋白之间通过氢键、盐桥等实现连接和相互作用。试验成功构建了表达菌株pET-32a-IspD,SDS-PAGE结果显示,在上清中高表达IspD融合蛋白;Western blotting验证显示,纯化的IspD融合蛋白具有反应原性。【结论】IspD蛋白具有成为候选诊断、疫苗研发和药物靶点等的潜在价值。试验表达纯化得到IspD融合蛋白,可为后续IspD蛋白具体功能的研究提供理论依
- 史超张伟张伟张梦琦何欣赵明彦周霞周霞张辉
- 关键词：单增李斯特菌生物信息学纯化
- 非传统的镜检技术在疟疾诊断中的应用
- 2002年
- 姜素华刘佩娜朱声华张辉
- 关键词：疟疾诊断
- 新疆野生盘羊TLR9基因的克隆·序列分析及其编码氨基酸结构预测(英文)
- 2011年
- [目的]克隆鉴定新疆天山亚种野生盘羊Toll样受体9(TLR9)基因,预测其结构与功能,并对序列进行分析。[方法]以外周血液的总DNA为模板,运用PCR方法分3段克隆了新疆野生盘羊TLR9基因,PCR产物经凝胶回收纯化后测序,并运用分子生物学软件将测序结果进行分析及结构预测。[结果]克隆得到的新疆野生盘羊TLR9基因大小是3192bp,含1个完整的开放阅读框(ORF),共编码1064个氨基酸,其氨基酸组成中亮氨酸的含量高达18.51%,含有30个氨基酸的信号肽序列;在野生盘羊TLR9蛋白455～475、740～760和780～800位氨基酸有3个跨膜区;新疆野生盘羊TLR9蛋白的3D结构是由胞外段富含亮氨酸的重复序列(LRR)和胞内段TIL(Toll/ILIR)结构域构成的。[结论]上述结构特征为TLR9发挥生物学功能奠定了基础,同时也为进一步研究新疆野生盘羊TLR9基因提供了理论依据。
- 马长宾孙延鸣张银国张辉
- 关键词：基因克隆
- 杂交甜瓜制种技术
- 2004年
- 张辉耿守东
- 关键词：杂交甜瓜制种技术播种田间管理杂交授粉采收
- 布鲁氏菌糖基转移酶对细胞炎症反应的影响
- 研究目的研究布鲁氏菌糖基转移酶(WboA)在诱发胚胎滋养层细胞炎症反应中的作用。研究表明WboA蛋白具有细胞毒作用,布鲁氏菌的致炎作用与脂多糖O链相关,为进一步阐明布鲁氏菌感染宿主细。胞的发病机制奠定了基础。材料方法以羊...
- 张豫张辉张艳孟茹王震陈瑞花张俊波鲁芝子陈创夫
- 羊种布鲁菌05/43株侵染绵羊肺泡巨噬细胞cDNA文库的构建被引量：2
- 2008年
- 目的构建羊种布鲁菌05/43株侵染绵羊肺泡巨噬细胞的cDNA文库。方法培养的绵羊肺泡巨噬细胞经羊种布鲁菌05/43株侵染后,以Trizol试剂提取其总RNA,用cDNA文库构建试剂盒构建巨噬细胞的cDNA文库。随机选取cDNA文库中的18个克隆进行表达序列标签(EST)序列测定,测序结果用BlastX和BlastN软件在GenBank蛋白质库和核酸库中进行序列同源性比对。结果构建的cDNA文库的库容量为1.192×106,重组率为95.65%。18个EST测序,12个与CD抗原基因、细胞因子基因、蛋白酶基因等已知功能的基因序列相关,6个为未知功能基因的EST序列。结论成功构建了羊种布鲁菌05/43株侵染绵羊肺泡巨噬细胞的cDNA文库,这将有助于阐明该菌株的致病机制。
- 王远志陈创夫曹旭东盛金良张辉任艳高剑峰王端明
- 关键词：基因文库
- 提高露地厚皮甜瓜品质生产栽培技术被引量：1
- 2004年
- 耿守东张辉
- 关键词：厚皮甜瓜栽培技术选地
