张锦霞 作品数:10 被引量:88 H指数:4 供职机构: 解放军军需大学军事兽医研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 “九五”国家科技攻关计划 国家科技重大专项 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 更多>>
银染mRNA差异显示方法在致突变实验中的初步应用 目的:建立在药物致突变研究中应用银染mRNA差异显示的方法。
方法:提取未经过/经过环磷酰胺处理的Balb/c小鼠肝组织的总RNA并以此为模板,采用dT12CG、dT12AG、dT12GG为锚定引物,通过反转录... 吴永魁 李乾学 张锦霞 张立树 栾新红关键词:凝胶电泳 文献传递 大肠杆菌不耐热肠毒素(LT)突变体LTR72的表达与鉴定 被引量:4 2003年 将重组质粒 p L TR72和 p L T分别转化大肠杆菌 JM10 1、DH5 α 和 C6 0 0 ,并接种于 L B和 CAYE- 2中培养 ,用GM1- EL ISA法检测菌体裂解液中 2者的表达情况 ,将表达产物纯化后用 SDS- PAGE等方法鉴定。结果表明 ,3种大肠杆菌在 2种培养基中都可表达出 L T突变体和 L T,并可将产物分泌到大肠杆菌胞周质中 ,成为具有 GM1结合活性的突变体蛋白 ;鉴定纯化后的突变体的组成形式与野生型 L T相同 ,均是 1A∶ 5 B。 郭学军 张锦霞 朱平关键词:大肠杆菌 不耐热肠毒素 突变体 Rx781094和M5050对大鼠痛阈影响的研究 2002年 摆尾法测定苯恶唑 ( Rx781 0 94) +狄普诺啡 ( M50 50 )对二甲苯胺噻嗪 ( xylazine) +双氢埃托啡 ( DHE)麻醉大鼠和非麻醉大鼠的痛阈值。结果显示 :Rx781 0 94+M50 50能够有效拮抗 xylazine+DHE麻醉大鼠的痛阈升高 ,从 5min开始与对照组比较差异显著 ,持续至 60min,加速痛敏的恢复 ;M50 50组在 1 0~ 3 0 min之间与对照组比较差异显著 ;Rx781 0 94+M50 50引起非麻醉大鼠痛敏 ,5min开始痛阈显著降低 ,持续至 60 min,1 0 min时降到最低点 ( -3 7.2 4% ,以 % MPE表示 )。提示 :Rx781 0 94+M50 50引起大鼠痛阈降低 ,Rx781 0 94+M50 50、M50 50可能是一些麻醉药的负拮抗(合 )剂。 冯海华 闫章年 刘国文 吴永魁 张立树 张锦霞 张祚新关键词:痛阈 野生型产气荚膜梭菌β毒素基因的克隆与分析 被引量:1 2004年 用多联PCR方法对从猪舍污水中分离的细菌进行鉴定,获得1株B型和1株C型产气荚膜梭菌,用PCR方法扩增了β毒素基因并进行了测序,获得了包括RBS、信号肽基因和全长成熟肽基因以及部分3’末端序列的β毒素基因;测序后与GenBank中B、c型菌β毒素基园进行比较。野生B、C型菌与二者的同源性分别达到99%以上,氨基酸同源性也在99%以上。 郭学军 张锦霞 常国权 孙洋 刘军 冯书章关键词:产气荚膜梭菌 克隆 氨基酸 Ⅰ型人免疫缺陷病毒(HIV-1)中国流行株B亚型Gag和Env蛋白在大肠杆菌中的表达 2001年 将中国流行株 型人免疫缺陷病毒 ( HIV-1 ) B亚型 gag基因和 env基因定向插入原核表达载体p ET2 8a和 p ET2 8c,获得重组表达质粒 p ETG、p ETM1、p ETM2和 p ETM3。将 p ETG转化表达宿主菌 BL2 1( DE3 ) plys S,用 IPTG诱导 ,SDS-PAGE电泳分析有重组蛋白表达。该蛋白表达量随诱导时间的延长而逐渐增加 ,4 h达到最大值。凝胶扫描结果显示 ,该蛋白表达量占菌体总蛋白的 1 0 .3 %。Western blotting检测 ,该重组蛋白可与中国流行株 HIV-1 B亚型阳性血清发生特异反应。重组表达质粒 p ETM1、p ETM2和 p ETM3仅在蛋白印迹中与 gp1 2 0单抗发生特异性反应而出现特异显色带 ,SDS-PAGE电泳分析未见表达蛋白带。 张锦霞 金宁一 方厚华 罗坤 郭焱 邵一鸣 殷震关键词:核心蛋白 中国流行株 橘皮素的结构改造及应用研究 被引量:4 2000年 通过磺酸化、卤化、酯化、乙酰化等途径对橘皮素进行结构改造后得到 8种新衍生物 :橘皮素磺酸取代物 - 1、橘皮素磺酸取代物 - 2、橘皮素溴取代物 - 1、橘皮素溴取代物 - 2、橘皮素碳酸酯、橘皮素甲基酮 - 1、橘皮素甲基酮 - 2、橘皮素乙酰酯。并对这 8种衍生物进行了离体兔耳痒螨药效筛选试验 ,结果除磺酸取代物 - 1无杀螨作用外 ,另 7种都具有较强的杀螨作用 ,其中橘皮素乙酰酯作用最强。将橘皮素乙酰酯制成乳浊液作药效试验 ,在 0 .1%、0 .0 5%和 0 .0 2 %浓度时 ,分别在 2~ 5min、3~ 6min和 8~ 10 min内将被试螨虫全部杀死 ,杀螨效力强于橘皮素 ,与螨净、双甲脒相近 ;将其制成 1%的擦剂 ,两次滴耳、涂擦治疗 2 5只耳痒螨感染病兔和 4 75只耳痒螨感染病狐 ,两周后治愈率达 96.5% ;将其制成 50 %的乳油 ,再稀释至 0 .0 5%和 0 .0 2 5%的浓度 ,间隔1周 ,药浴两次治疗 172只和 132只两群螨虫感染病羊 ,两周后 ,治愈率分别达到 99%和 98% ,优于同期药浴的辛硫磷对照组 ,且无任何异常现象发生。橘皮素乙酰酯毒性试验结果表明 :其小鼠腹腔注射 LD50 为 2 50 .0 3mg/kg,口服给药 L D50 分别为 182 1.2 8mg/kg(溶剂为玉米油时 )和 LD50 为 2 4 99.19mg/kg(溶剂为吐温 - 2 0时 ) ,对兔皮肤急性毒性大于 张祚新 吴永魁 王祥生 蔡辉 杨永胜 张锦霞 王德昭 闫章年 张立树关键词:杀螨药物 兽药 苯噁唑和狄普诺啡对大鼠血浆、垂体和下丘脑β-内啡肽含量的影响 被引量:1 2002年 采用放射免疫分析法测定在苯噁唑(Rx781094)+狄普诺啡(M5050)作用下,不同时间大鼠血浆、垂体和下丘脑中β-内啡肽(β-EP)的含量。结果显示:Rx781094+M5050可降低大鼠血浆、垂体和下丘脑β-EP含量,5min开始显著降低,10min时都降到最低点,分别是8.92ng/mL、131.43ng/mg和9.32ng/mg,60min时β-EP亦低于正常值,至120min时逐渐恢复正常。垂体β-EP含量在10min时与对照组比较有显著差异。提示:Rx781094+M5050能降低大鼠血浆、垂体、下丘脑中β-EP含量,可能是发挥催醒作用的机制之一。 冯海华 闫章年 刘国文 吴永魁 张立树 张祚新 张锦霞关键词:垂体 下丘脑 Β-内啡肽含量 兽药 不同给药方式下鲤对诺氟沙星的药代动力学研究 被引量:74 2000年 通过不同给药方式鲤对诺氟沙星的药代动力学研究,建立相关的吸收、分布与消除等药动学参数及生物 利用度资料。结果以 10mg·kg-1鱼体重单剂量肌注、口灌诺氟沙星的药时数据符合开放性二室模型,以 10mg· kg-1鱼体重药物剂量单次混饲给药的药时数据符合开放性一室模型。肌注给药的主要药代动力学参数为:AUC24.9481μg·h·mL-1, Cmax 16.8992μg·mL-1,t1/2α0.1279h,t1/2β 3.4032h;口灌给药的主要药代动力学参数为:AUC150.6029μg·h·mL-1,Cmax5.7998μg·mL-1,t1/2α3.4071h,t1/2β77.1239h;混饲口灌给药的主要药代动力学 参数为: AUC6.8183μg·h·mL-1,Cmax1.7217μg·mL-1,t1/2ka0.22643h,t1/2ke2.0213h。不同给药方式的主要药 代动力学参数差异显著(P<0.01)。 张雅斌 张祚新 郑伟 刘艳辉 杨永胜 张锦霞 吴永魁关键词:诺氟沙星 药代动力学 给药方式 细菌性疾病 银染mRNA差异显示方法在致突变实验中的初步应用 被引量:4 2004年 为建立在药物致突变研究中应用银染 m RNA差异显示的方法 ,试验提取未经过 /经过环磷酰胺处理的 Balb/c小鼠肝组织的总 RNA ,并以此为模板 ,采用 d T1 2 CG、d T1 2 AG、d T1 2 GG为锚定引物 ,通过反转录、差异显示 PCR反应 ,以 6 %变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离差异条带 ,回收后将其再扩增。结果表明 ,RNA投入量为 3μg、镁离子浓度为 1.5~ 2 .0 mm ol/L、退火温度为 4 0℃时 ,扩增的片段条带清晰、背景低 ,差异条带明显 ,再扩增条带单一。银染 m RNA差异显示技术可成功应用于药物致突变的研究。 李乾学 张锦霞 吴永魁 张立树 栾新红关键词:MRNA 银染 致突变 桔皮素乙酰酯对动物螨病的治疗及安全性试验 对秸皮素进行结构改造,获得了多种衍生物,其乙酰化物桔皮素乙酰酯具有良好的杀螨作用.将秸皮素乙酰酯制成擦剂和乳剂作鼠螨病治疗试验,病鼠15只随机分为3组,第1组用1%的桔皮素乙酰酯擦剂治疗,将药液涂于病鼠的患部,每天1次连... 张柞新 吴永魁 王祥生 蔡辉 闫章年 张锦霞关键词:螨虫 文献传递