郭学军
- 作品数：96 被引量：307H指数：11
- 供职机构：军事医学科学院军事兽医研究所吉林省人兽共患病预防与控制重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划吉林省科技发展计划基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 肠出血性大肠杆菌0157:H7 stx/ler基因缺失突变疫苗株对小鼠的免疫
- 肠出血性大肠杆菌(Enterohemorrhagic E.coli,EHEC),典型菌株为EHEC O157:H7,是导致出血性结肠炎(Hemorrhagic Colitis,HC)和溶血性尿毒症(Haemolytic ...
- 孙洋刘军郭学军常国权尹铁勇冯书章
- 文献传递
- 布鲁氏菌S2菌壳的安全性和免疫学特性研究被引量：1
- 2016年
- 目的利用小鼠模型对布鲁氏菌菌壳、布鲁氏菌S2活菌和福尔马林灭活菌的安全性和免疫学特性进行比较研究。方法利用猪布鲁氏菌S2株和重组裂解质粒制备出布鲁氏菌菌壳,将布鲁氏菌菌壳、布鲁氏菌S2活菌和福尔马林灭活菌通过腹腔注射免疫小鼠,进行安全性比较分析。监测免疫后小鼠的血清抗体水平、脾脏T淋巴细胞分型,并进行免疫攻毒实验。结果与布鲁氏菌弱毒疫苗菌株S2比较,布鲁氏菌菌壳具有更好的安全性,免疫小鼠后能产生与弱毒菌株相似的血清抗体水平、脾CD3+和CD4+T淋巴细胞反应,并具有与之相当的免疫保护作用。结论布鲁氏菌菌壳具有良好的安全性,能刺激机体产生体液免疫和细胞免疫反应,可作为预防布鲁氏菌病的新型候选疫苗。
- 苗玉强刘军孙洋纪雪祝令伟周伟郭学军刘爽陈萍冯书章
- 关键词：布鲁氏菌安全性免疫原性
- 猪链球菌2型和9型菌株的多重PCR检测被引量：39
- 2005年
- 目的建立一种快速、特异且敏感的检测方法。方法以猪链球菌2型和9型的荚膜多糖抗原编码基因簇中的cps2J和cps9H基因、猪链球菌2型的主要毒力因子编码基因epf和mrp为靶基因设计了四对引物,建立了检测猪链球菌的多重PCR反应体系。用编码cps2J和cps9H基因的引物可对猪链球菌2型和9型进行分型,用编码epf和mrp基因的引物可鉴定猪链球菌2型的主要毒力相关基因。用该多重PCR反应体系对10株猪链球菌分离株进行了鉴定,并以其它几株阴性对照菌株进行对照,检测了该反应体系的特异性。以新鲜培养的猪链球菌2型菌株进行倍比稀释后进行菌落计数,并将之作为模板,对该多重PCR反应体系检测的敏感性进行了鉴定。结果10株猪链球菌分离株中有5株是9型菌株,另有5株是2型菌株,2型菌株有2种基因型:3株cps2+mrp+epf+型,2株cps2+mrp-epf-型。同时还表明该多重PCR反应体系有高度的特异性和敏感性,当模板含量在10cfu时仍能检出目的菌株。结论该多重PCR反体系是一种检测和鉴定猪链球菌2型的快速、特异且敏感的方法。
- 刘军冯书章尹铁勇孙洋郭学军祝令伟
- 关键词：猪链球菌多重PCR毒力基因
- 肠出血性大肠埃希菌O157：H7多重PCR检测方法的建立被引量：2
- 2017年
- 为建立肠出血性大肠埃希菌O157:H7的多重PCR检测方法,针对O157菌特异性eaeA基因、fliC基因、志贺毒素基因(stx1和stx2)及rfbE基因设计5对引物,构建多重PCR反应体系,优化反应的引物浓度和温度检测其特异性和敏感性,并对牛、猪、鸡及犬等不同动物来源的样品进行了大肠埃希菌O157检测。结果显示,该方法具有良好的特异性和敏感性,敏感性达到5×10~3CFU。从检测阳性样本中均分离到目的菌。应用建立的方法在确定样品中是否含有大肠埃希菌O157的同时,还能对菌株毒力进行初步判定。成功建立了肠出血性大肠埃希菌O157:H7多重PCR检测方法,为该病原菌感染的预防和监测提供了简便、快速的技术手段,具有良好的应用前景。
- 纪雪张雪孙洋孙诗雯祝令伟刘军姜海艳周伟梁冰郭学军刘彦晶
- 关键词：肠出血性大肠埃希菌O157:H7多重PCR
- 大肠杆菌不耐热肠毒素对狂犬病病毒减毒疫苗株粘膜免疫效应的增强作用被引量：5
- 2004年
- 将狂犬病病毒 SRV9减毒疫苗与大肠杆菌不耐热肠毒素 (L T)混合 ,分别经口腔滴入、灌胃、灌肠等途径免疫小鼠。通过检测外周血淋巴细胞特异性转化率、CTL反应、Ig G、Ig A、SIg A等免疫指标 ,并结合攻毒保护 ,探讨了狂犬病病毒经消化道不同途径接种产生的免疫效果以及 L T在粘膜免疫中的作用。结果表明 :肠道接种组的狂犬病病毒特异性免疫应答水平高于口腔和胃接种组的免疫应答水平 ,L
- 张茂林刘红丽余兴龙涂长春扈荣良邹啸环郭学军殷震
- 关键词：粘膜免疫
- 犬致病性大肠杆菌的分离和鉴定
- 从9份病犬犬血便和6份健康犬粪便样品中分离出17株大肠杆菌,对17株大肠杆菌分别进行了生化鉴定,耐药基因blaCTX-M、blaTEM和blaSHV的PCR扩增,13种抗菌药的药敏检测,以及MLST分型、菌株分群和质粒分...
- 纪雪孙洋赵相胜佟盼盼郭学军刘军祝令伟周伟周博冯书章
- 关键词：大肠杆菌多重耐药耐药基因
- 猪链球菌2型表面蛋白sp融合基因的构建与高效表达被引量：1
- 2007年
- 利用PCR方法从猪链球菌2型四川资阳分离株449-1扩增出sp基因,克隆到pMD18-T载体中,构建出克隆载体pMD18T-sp。以SalⅠ和BamHⅠ从pMD18T-sp中切下目的sp基因片段并克隆到质粒pMAL-p2X中,构建重组表达质粒pMALp2X-sp,转化宿主菌TB1中进行诱导表达。分析表明sp基因序列比GenBank报道序列AY864331少了270 bp;SDS-PAGE电泳检测结果表明,重组菌株表达出了136 Ku左右的目的蛋白MBP-Sao,目的蛋白为可溶表达,约占菌体蛋白总量的12.3%。表达的蛋白可用Amylose树脂纯化。将纯化的融合蛋白MBP-Sao免疫家兔,所得抗血清经ELISA检测,结果显示融合蛋白MBP-Sao包板抗体效价达1:16 000,且与猪链球菌2型和9型呈阳性反应,而与沙门氏杆菌及巴氏杆菌呈阴性反应。本试验对猪链球菌2型表面蛋白Sao的高效表达及其免疫原性进行了初步研究,为进一步研究猪链球菌2型表面蛋白Sao的结构和功能奠定了基础。
- 刘燕刘军冯书章郭学军孙洋祝令伟
- 关键词：猪链球菌2型表面蛋白
- 抗菌肽重组逆转录病毒载体的构建、重组病毒的包装及其在牛奶中的稳定表达被引量：3
- 2008年
- 将含有双抗菌肽基因的表达盒插入到逆转录病毒载体pLN—bcp—LK（R）中，获得了含有双抗菌肽基因的重组逆转录病毒载体pLN—bcp-LfcinB-CE-MA（R），利用脂质体转染PA317包装细胞，G418进行筛选得到了阳性细胞克隆，克隆扩大培养后，用病毒上清感染NIH3T3细胞进行滴度测定，最高滴度为1×10^4CFU／mL，用病毒上清转染妊娠中后期奶牛乳腺组织，产犊后采集的奶样经琼脂板溶圈法和Tricine-SDS-PAGE检测，结果表明乳汁中表达的抗菌肽对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均具有明显地抑菌活性，并能实现相对稳定的表达，表达可持续30-45d。
- 张锦霞张守峰郭学军扈荣良
- 关键词：抗菌肽重组逆转录病毒转染
- 粗糙型布鲁菌M111菌壳的制备被引量：4
- 2014年
- 将含有裂解酶基因重组温控裂解质粒pBBR1MCS∷PR-PL-E电转化至粗糙型布鲁菌M111中,构建重组布鲁菌M111(pBBR1MCS∷PR-PL-E)。重组菌株在28℃培养,42℃诱导表达裂解酶E,从而制备布鲁菌菌壳。绘制布鲁菌生长曲线及裂解曲线,计算裂解率并用透射电镜观察布鲁菌菌壳的形态。结果显示,成功制备了布鲁菌菌壳,温控裂解质粒pBBR1MCS∷PR-PL-E对布鲁菌的裂解率为100%。透射电镜观察可见细菌内容物部分流出,细菌表面出现不同程度的皱缩,细胞形态发生变化。结果表明,本试验成功制备了粗糙型布鲁菌菌壳,初步研究了其基本特性,为下一步开展布鲁菌菌壳疫苗的研究奠定了基础。
- 张瑞安刘军蒋大伟夏力亮孙洋祝令伟纪雪郭学军冯书章
- 炭疽芽孢杆菌的分离鉴定及其与疫苗株的鉴别诊断被引量：2
- 2016年
- 目的建立炭疽芽孢杆菌临床分离株和疫苗株的鉴别诊断方法,为炭疽疫情判断和疾病控制提供依据。方法以炭疽芽孢外壁胶原样蛋白的编码基因bclA和pXO1质粒上的aat序列为靶点,设计引物,通过PCR扩增片段多态性和测序结果分析可变串联重复序列(VNTR)。在生物安全3级实验室分离炭疽菌体蛋白,使用MALDL-TOF/TOF质谱仪进行检测,BioTyper软件分析图谱。结果炭疽分离株与Ⅱ号、无荚膜疫苗株,VNTR分析结果均有不同。2个分离株测定bclA基因序列全长均为1 113bp,编码的蛋白包含66个GXX重复和5个BclA重复。质谱分析发现,2个分离株菌体蛋白表达峰图基本一致,而2个疫苗株与之相比有很大的差异,许多蛋白的表达明显下调。结论两种方法都能够有效鉴别炭疽临床分离株和疫苗株。
- 祝令伟郭学军李吉平顾贵波刘军纪雪冯书章孙洋
- 关键词：炭疽芽孢杆菌疫苗株质谱可变串联重复序列
