郭学军
- 作品数：93 被引量：312H指数：10
- 供职机构：军事医学科学院军事兽医研究所吉林省人兽共患病预防与控制重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划吉林省科技发展计划基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 肠出血性大肠杆菌O157:H7噬菌体的分离纯化被引量：8
- 2008年
- 分离纯化了抑制肠出血性大肠杆菌(Enterohemorrhagic E.coli,EHEC)O157:H7的噬菌体,并对其进行效价测定。将宿主菌EHEC O157:H7培养制成悬液后与污水样品37℃共培养16h,将培养物离心、过滤除菌后得到该菌的噬菌体原液。噬菌体原液采用双层琼脂平板法进行5次纯化,得到直径相同的噬菌斑。纯化后噬菌体的效价达到1.2×1010pfu。电镜观察表明,该噬菌体呈蝌蚪状。根据ICTV对病毒的分类标准,该噬菌体属长尾噬菌体科,为烈性噬菌体。
- 杜崇涛王文东刘军孙洋齐翀祝令伟郭学军冯书章
- 关键词：纯化
- 双抗夹心ELISA检测肠出血性大肠杆菌O157方法的建立被引量：10
- 2011年
- 以前期建立并纯化的肠出血性大肠杆菌O157:H7单克隆抗体3D6,建立一种适宜食品样品检测的双抗夹心ELISA检测方法。该方法只对O157菌株有特异性反应,对非O157型肠出血性大肠杆菌及其他菌株无交叉反应。敏感性试验结果表明,对大肠杆菌O157纯培养菌液检出限为1.2×105 CFU/mL。选择性增菌培养后,对牛肉、猪肉和鸡肉与模拟样品中的大肠杆菌O157的检出限为0.4～4CFU/g。
- 吴大成孙洋袁洁康桦华郭学军祝令伟陈志虹向蓉冯书章
- 关键词：单克隆抗体
- 猪链球菌2型表面蛋白sp融合基因的构建与高效表达被引量：1
- 2007年
- 利用PCR方法从猪链球菌2型四川资阳分离株449-1扩增出sp基因,克隆到pMD18-T载体中,构建出克隆载体pMD18T-sp。以SalⅠ和BamHⅠ从pMD18T-sp中切下目的sp基因片段并克隆到质粒pMAL-p2X中,构建重组表达质粒pMALp2X-sp,转化宿主菌TB1中进行诱导表达。分析表明sp基因序列比GenBank报道序列AY864331少了270 bp;SDS-PAGE电泳检测结果表明,重组菌株表达出了136 Ku左右的目的蛋白MBP-Sao,目的蛋白为可溶表达,约占菌体蛋白总量的12.3%。表达的蛋白可用Amylose树脂纯化。将纯化的融合蛋白MBP-Sao免疫家兔,所得抗血清经ELISA检测,结果显示融合蛋白MBP-Sao包板抗体效价达1:16 000,且与猪链球菌2型和9型呈阳性反应,而与沙门氏杆菌及巴氏杆菌呈阴性反应。本试验对猪链球菌2型表面蛋白Sao的高效表达及其免疫原性进行了初步研究,为进一步研究猪链球菌2型表面蛋白Sao的结构和功能奠定了基础。
- 刘燕刘军冯书章郭学军孙洋祝令伟
- 关键词：猪链球菌2型表面蛋白
- 抗菌肽重组逆转录病毒载体的构建、重组病毒的包装及其在牛奶中的稳定表达被引量：3
- 2008年
- 将含有双抗菌肽基因的表达盒插入到逆转录病毒载体pLN—bcp—LK（R）中，获得了含有双抗菌肽基因的重组逆转录病毒载体pLN—bcp-LfcinB-CE-MA（R），利用脂质体转染PA317包装细胞，G418进行筛选得到了阳性细胞克隆，克隆扩大培养后，用病毒上清感染NIH3T3细胞进行滴度测定，最高滴度为1×10^4CFU／mL，用病毒上清转染妊娠中后期奶牛乳腺组织，产犊后采集的奶样经琼脂板溶圈法和Tricine-SDS-PAGE检测，结果表明乳汁中表达的抗菌肽对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均具有明显地抑菌活性，并能实现相对稳定的表达，表达可持续30-45d。
- 张锦霞张守峰郭学军扈荣良
- 关键词：抗菌肽重组逆转录病毒转染
- 粗糙型布鲁菌M111菌壳的制备被引量：4
- 2014年
- 将含有裂解酶基因重组温控裂解质粒pBBR1MCS∷PR-PL-E电转化至粗糙型布鲁菌M111中,构建重组布鲁菌M111(pBBR1MCS∷PR-PL-E)。重组菌株在28℃培养,42℃诱导表达裂解酶E,从而制备布鲁菌菌壳。绘制布鲁菌生长曲线及裂解曲线,计算裂解率并用透射电镜观察布鲁菌菌壳的形态。结果显示,成功制备了布鲁菌菌壳,温控裂解质粒pBBR1MCS∷PR-PL-E对布鲁菌的裂解率为100%。透射电镜观察可见细菌内容物部分流出,细菌表面出现不同程度的皱缩,细胞形态发生变化。结果表明,本试验成功制备了粗糙型布鲁菌菌壳,初步研究了其基本特性,为下一步开展布鲁菌菌壳疫苗的研究奠定了基础。
- 张瑞安刘军蒋大伟夏力亮孙洋祝令伟纪雪郭学军冯书章
- 炭疽芽孢杆菌的分离鉴定及其与疫苗株的鉴别诊断被引量：3
- 2016年
- 目的建立炭疽芽孢杆菌临床分离株和疫苗株的鉴别诊断方法,为炭疽疫情判断和疾病控制提供依据。方法以炭疽芽孢外壁胶原样蛋白的编码基因bclA和pXO1质粒上的aat序列为靶点,设计引物,通过PCR扩增片段多态性和测序结果分析可变串联重复序列(VNTR)。在生物安全3级实验室分离炭疽菌体蛋白,使用MALDL-TOF/TOF质谱仪进行检测,BioTyper软件分析图谱。结果炭疽分离株与Ⅱ号、无荚膜疫苗株,VNTR分析结果均有不同。2个分离株测定bclA基因序列全长均为1 113bp,编码的蛋白包含66个GXX重复和5个BclA重复。质谱分析发现,2个分离株菌体蛋白表达峰图基本一致,而2个疫苗株与之相比有很大的差异,许多蛋白的表达明显下调。结论两种方法都能够有效鉴别炭疽临床分离株和疫苗株。
- 祝令伟郭学军李吉平顾贵波刘军纪雪冯书章孙洋
- 关键词：炭疽芽孢杆菌疫苗株质谱可变串联重复序列
- 肠出血性大肠杆菌O157胶体金免疫层析试纸条的研制被引量：16
- 2008年
- 目的建立一种简便实用的胶体金免疫层析检测方法用于食品样品中肠出血性大肠杆菌O157的快速筛查。方法采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金,以抗EHEC O157 LPS单克隆抗体标记,以兔抗O157多克隆抗体固定于硝酸纤维素膜作为捕获抗体,利用双抗夹心法,制成O157胶体金免疫层析检测试纸条,并进行了特异性和敏感性试验。结果该试纸条仅与O157反应,与其他受试菌株均不反应。检测敏感性为106CFU/mL,对人工污染EHEC O157模拟牛肉样品增菌后检测,敏感性为56 CFU/g。结论成功研制出EHEC O157胶体金免疫层析试纸条,敏感性高,特异性强,检测速度快,10min可出结果,操作简便,可用于现场大量样品的检测。
- 孙洋冯书章郭学军祝令伟周博刘军尹铁勇
- 关键词：胶体金免疫层析
- 肠出血性大肠杆菌O157ler基因缺失突变株的构建及其特性被引量：2
- 2008年
- 以肠出血性大肠杆菌O157∶H786～24为始发菌株,利用自杀性载体pCVD442,根据同源重组的原理敲除了染色体上的ler基因,构建了O157∶H7 ler基因缺失突变菌株,并对其生物学特性进行了初步研究。荧光定量PCR试验结果表明,始发菌株对HEp-2细胞的平均黏附数量是突变菌株的17倍。试验也证实了ler基因对LEE致病岛毒力基因的正调控作用,这为O157∶H7基因缺失突变弱毒疫苗株的建立奠定了基础。
- 孙洋刘军郭学军张勇祝令伟周博冯书章
- 关键词：肠出血性大肠杆菌O157:H7缺失突变
- 魏氏梭菌外毒素及其致病机制
- 魏氏梭茵是一种人和动物正常状况下胃肠道中的寄居微生物,在一定条件下可以导致人的气性坏疽和食物中毒以及动物的多种肠中毒性疾病。所致疾病包括几种肠道综合症,如禽坏死性肠炎,牛的肠毒血症,羔羊痢疾。其中α毒素和β毒素都与肠毒血...
- 郭学军冯书章
- 文献传递
- 淡水鱼大肠埃希菌分离鉴定与耐药性研究
- <正>引言我国淡水渔业已有3100多年的历史,是世界上渔业发展最早的国家,也是世界上拥有淡水面积最多的国家之一。据农业部渔业局年度统计报告,2015年我国水产品进出口总量814.15万吨,进出口总额293.14亿美元,其...
- 纪雪邢新月梁冰王诗雨祝令伟刘军郭学军孙诗雯孙洋
- 文献传递
