吴凯威
- 作品数:4 被引量:28H指数:3
- 供职机构:深圳大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:深圳市科技计划项目广东省高校“151”工程项目更多>>
- 相关领域:生物学社会学农业科学医药卫生更多>>
- 红星梭子蟹变应原原肌球蛋白基因的克隆、表达及其免疫学鉴定被引量:6
- 2009年
- 克隆、表达红星梭子蟹蟹肉中变应原原肌球蛋白(Tropomyosin),并对其免疫学特性进行鉴定。RT-PCR克隆红星梭子蟹(Portunus sanguinolentus)蟹肉中变应原原肌球蛋白的全长基因,根据序列设计带有酶切位点的特异性引物,扩增蟹Tropomyosin的完整开放阅读框,与pET-28a载体连接并转化大肠杆菌Escherichia.coliBL21(DE3),诱导表达后,Ni2+亲和层析柱纯化重组蛋白,Western-blot检测其免疫学活性,胰酶消化后进行MALDI-TOF-MS质谱分析鉴定。克隆所得蟹Tropomyosin基因包括一个编码285个氨基酸的开放阅读框。序列分析结果显示所克隆得到的基因与已知虾、螨、蟑螂等的Tropomyosin变应原基因有较高的同源性(>80%)。根据变应原的命名规则,将其命名为Pors1,并提交GenBank数据库,登录号为EF143836。重组蟹Tropomyosin在大肠杆菌中能高效的表达,表达产物经Ni2+亲和层析柱纯化后进行Western-blot检测,结果显示该重组蛋白具有良好的免疫学活性,MALDI-TOF-MS质谱分析进一步证实了该重组变应原的正确性。本研究成功克隆和表达了红星梭子蟹变应原Tropomyosin,为蟹过敏性疾病的诊断和治疗奠定了基础。
- 吴凯威刘志刚
- 关键词:变应原原肌球蛋白基因克隆
- 大豆泛变应原profilin基因的克隆、序列分析和表位预测被引量:3
- 2007年
- 通过生物信息学方法对多种植物性食物和花粉泛变应原proflin基因进行比对,利用其中的高度保守区域设计并合成简并引物,通过RT-PCR克隆得到一个新的大豆profilin基因(396bp,pI为5.21,MW为14,1kD),序列同源性分析发现该基因和已知的多种植物性食物、花粉变应原profilin有较高的同源性(>75%),因此认为其系大豆蛋白泛变应原profilin,命名为Gly m3.02,EMBL/GeneBank数据库登录号为DQ784852,这为进一步重组表达和抗原表位分析等奠定了实验基础。
- 吴凯威余晓刘志刚宋娟娟张红云
- 关键词:大豆PROFILIN基因克隆
- “基因工程虚拟实验室”的设计与开发被引量:19
- 2006年
- 结合虚拟实验室和虚拟仪器的特点,阐述了“基因工程虚拟实验室”的设计与开发思路,为高校生物实验教学引入现代多媒体技术提供了一种崭新的思路与尝试。
- 吴凯威刘志刚刘青刘锐张凡邢苗
- 关键词:基因工程实验虚拟实验虚拟仪器
- 红星梭子蟹(Portunus sanguinolentus)过敏原的免疫学鉴定与分子生物学研究
- 过敏性疾病已被世界卫生组织列为二十一世纪重点防治的三大类疾病之一,是当前世界性的重大卫生学问题。食物过敏作为一种常见的过敏性疾病,引起的临床症状主要有头晕、头痛、胸闷、恶心、呕吐、皮肤瘙痒等,严重时还会休克甚至死亡。因此...
- 吴凯威
- 关键词:免疫学鉴定原肌球蛋白分子克隆过敏性疾病
- 文献传递