刘志刚 作品数:717 被引量:1,948 H指数:20 供职机构: 中国水产科学研究院珠江水产研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 深圳市科技计划项目 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 生物学 轻工技术与工程 更多>>
美洲大蠊若虫cDNA表达文库的构建和初步鉴定 目的:构建美洲大蠊若虫cDNA表达文库.方法:应用定向克隆技术将相应cDNA片段插入λExCell/Not I/EcoR I/CIP载体的Not I和EcoR I双酶切位点间,并采用PCR方法对插入片段大小进行分析.结果... 刘志刚 黄炯烈 朱振宇 周珍文 刘玉琳 龚十妹文献传递 尘螨疫苗免疫治疗哮喘小鼠气道IL-17的变化 目的 探讨尘螨疫苗免疫治疗对尘螨过敏性哮喘小鼠IL-17的影响.方法 24只BALB/c小鼠随机分成正常对照组(A组)、哮喘对照组(B组)和尘螨疫苗治疗组(C组),每组8只;末次激发24 h后取小鼠肺组织HE染色观察炎症... 张敏 吕勤 刘志刚复方中草药对尼罗罗非鱼非特异性免疫功能的影响 被引量:22 2015年 研究了在饲料中添加一种以鱼腥草为主要成分(占40%)的复方中草药制剂对尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)非特异性免疫指标的影响。将鱼腥草、黄芩、板蓝根、连翘、金银花等10种中草药按一定比例充分粉碎后混匀制成以鱼腥草为主要成分的复方中草药制剂,按质量分数0%(对照组)、1%(A组)、3%(B组)和6%(C组)分别添加到基础饲料中饲喂尼罗罗非鱼,饲养12周。分别在第4、8和12周采集各组尼罗罗非鱼血液,测定相关非特异性免疫指标。结果显示:从第8周开始,B组尼罗罗非鱼血清丙二醛(MDA)含量显著降低,C组尼罗罗非鱼血清溶菌酶(LSZ)活力、超氧化物歧化酶(SOD)活力、一氧化氮(NO)含量显著提高,MDA含量显著降低。在第12周,B组和C组尼罗罗非鱼白细胞吞噬百分比、吞噬指数和血细胞呼吸爆发活力、血清SOD活力、LSZ活力、NO含量都显著提高,MDA含量则显著降低。结果表明:在饲料中添加3%和6%质量分数的以鱼腥草为主要成分的复方中草药制剂均能增强尼罗罗非鱼的非特异性免疫力,其中以添加比例为6%的效果最好。 张意敏 刘志刚 卢迈新 朱华平 可小丽 高风英 黄樟翰关键词:中草药 非特异性免疫 平榛主要过敏原Corh1单克隆抗体的制备与鉴定 被引量:1 2011年 目的制备和鉴定鼠抗平榛主要变应原Cor h 1的单克隆抗体(Monoclonal Antibody,McAb)。方法用重组Cor h 1蛋白为免疫原,免疫Balb/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤NS-1细胞融合。通过间接ELISA法筛选分泌特异性McAb的杂交瘤细胞。用杂交瘤细胞株诱导小鼠产生腹水,再用蛋白A亲和层析法纯化抗体。采用Ig类与亚类鉴定试剂盒鉴定该单克隆抗体的Ig亚型;通过间接ELISA、Western Blotting鉴定该McAbs的特性和交叉性。结果获得4株可稳定分泌鼠抗平榛主要变应原Cor h 1的McAbs,其Ig亚型均为IgG1,均具有良好的效价;ELISA和Western Blotting分析表明该4株单抗均能识别重组Cor h 1蛋白,其中3株单抗能够识别天然平榛提取物。结论成功制备了4株鼠抗平榛主要变应原Cor h 1的单克隆抗体,为建立平榛主要变应原Cor h 1检测及纯化方法奠定了基础。 赵郭存 张强 邹菊 黄钟 刘志刚关键词:主要变应原 单克隆抗体 杂交瘤细胞 交叉性 斑节对虾过敏原的分离、鉴定与纯化 被引量:5 2009年 目的对斑节对虾的主要过敏原进行分析、鉴定与纯化。方法通过SDS-PAGE电泳分离斑节对虾的蛋白质组份,采用免疫印迹(Western-blotting)方法鉴定过敏原,通过离子交换层析对斑节对虾主要过敏原进行初步纯化。结果斑节对虾粗提液SDS-PAGE显示其主要蛋白条带主要有7条,Western-blotting显示对斑节对虾过敏患者的阳性混合血清能与7个蛋白条带起反应,相对分子质量分别为71000、43000、34000、23000、21000、20000和19000,离子交换层析可初步纯化出相对分子质量为34000和21000的过敏原蛋白。结论本实验对斑节对虾过敏原进行了分离和鉴定,并初步纯化出斑节对虾的主要过敏原。 吴序栎 张慧 刘志刚关键词:斑节对虾 SDS-PAGE 免疫印迹 离子交换层析 BALB/C小鼠口腔过敏综合征模型的建立与评价 被引量:1 2017年 目的建立口腔过敏综合征BALB/C小鼠模型,并对其免疫特征进行评价。方法将12只BALB/C小鼠随机分为正常对照组和模型组,每组6只。模型组通过皮下注射花生蛋白粗提液致敏来建立BALB/C小鼠口腔过敏综合征模型。采用苏木精-伊红和甲苯胺蓝染色观察口腔黏膜组织的嗜酸性粒细胞、肥大细胞及肥大细胞脱颗粒情况并计数;采用酶联免疫吸附试验法检测2组BALB/C小鼠血清免疫球蛋白E(IgE)、免疫球蛋白G1(IgG1)、免疫球蛋白G2a(IgG2a)及小鼠肥大细胞蛋白酶-1(mMCP-1)的水平。结果花生蛋白中有8种过敏原被确定,Arah 1~8,其中Arah 1~3是主要过敏原。与正常对照组比较,花生抗原致敏及激发BALB/C小鼠后表现出口腔过敏综合征临床反应,模型组BALB/C小鼠血清IgE、IgG1、IgG2a及mMCP-1水平均显著升高(P<0.05或P<0.01)。组织学观察结果显示,模型组BALB/C小鼠口腔黏膜组织中嗜酸性粒细胞、肥大细胞和脱颗粒肥大细胞数量均明显高于正常对照组(均P<0.01)。结论使用花生蛋白抗原能够有效诱导BALB/C小鼠在固有免疫、细胞免疫及局部免疫方面产生过敏炎症性反应,适用于开发口腔过敏综合征研究的小鼠模型,为未来疗法提供模板。 谢瑞娣 杨平常 刘志刚 徐灵芝 唐亚平 郭成伟 刘琪关键词:食物过敏 嗜酸性粒细胞 肥大细胞 BALB/C小鼠 一种面向对象的实景三维模型多层次解译方法及系统 本发明公开了一种面向对象的实景三维模型多层次解译方法及系统,将待解译实景三维模型分为地形表面部分、立体地物部分两个层次;基于地形表面部分的正射影像,采用面向对象的影像分类方法对地形表面部分进行分类;对立体地物部分进行独立... 胡忠文 刘志刚 汪驰升 张德津 邬国锋 李清泉罗非鱼无乳链球菌的DIG-cfb原位杂交检测方法的建立 2015年 为建立一种批量检测罗非鱼无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)的快速敏感的原位杂交方法,本研究依据罗非鱼无乳链球菌cfb基因序列,选取其132-599 bp之间的序列为靶序列,采用PCR法制备了特异性地高辛标记的DNA探针DIG-cfb(Digoxigenin-labelled cfb probe,430 bp),同时对所制备的探针进行了测序鉴定及特异性和敏感性检测。结果表明,探针测序序列与实际Gen Bank序列相符,所制备的DIG-cfb探针与无乳链球菌基因组杂交呈阳性,与患病罗非鱼的其他细菌病原(嗜水气单胞菌、金黄色葡萄球菌、类志贺邻单胞菌以及海豚链球菌)基因组,以及与无乳链球菌亲缘关系较近的链球菌其他种(牛源链球菌、变异链球菌),斑点反应则均为阴性,d NTP对照组也为阴性,表明该方法特异性强;该方法可实现对批量样品的快速检测,具有较高的灵敏度,可检测无乳链球菌基因组的下限为1.5 ng/μL DNA。对采集于广东、海南及广西等不同地点的无乳链球菌样品,均可获得较明显的斑点反应圈,对患链球菌病的罗非鱼肝、脑组织基因组也可特异的检测出无乳链球菌。表明本研究建立的DIG-cfb原位杂交法对无乳链球菌基因组的检测具有快速、特异、敏感等特点,适合罗非鱼无乳链球菌的批量检测。 可小丽 曾祖聪 刘志刚 曹建萌 方伟 袁伟 卢迈新关键词:无乳链球菌 地高辛标记探针 原位杂交 丁香花蕾油对粉尘螨杀灭活性的研究 被引量:4 2009年 用索氏提取法以石油醚为溶剂提取制备丁香花蕾中的挥发油组分,用直接接触法和熏蒸法分别测试不同剂量和不同作用时间丁香花蕾油对粉尘螨的杀灭活性,结果显示12.20μg/cm2丁香花蕾油直接接触粉尘螨后2.5h死亡率即达100.0%,相同剂量的丁香花蕾油在相对封闭的容器中熏蒸24h后,螨虫死亡率为100.0%,表明丁香花蕾油对室内粉尘螨具有较好的杀灭活性。 李静 吴海强 刘志刚关键词:粉尘螨 杀螨剂 数字化虚拟人体器官的研究进展 被引量:1 2012年 数字化虚拟人体器官已成为医学领域中最活跃的研究课题之一,在病情诊断和医学教学中具有广阔的应用前景。本文重点从人体的头颈部、胸部、腹部及神经系统4个方面回顾数字化虚拟的国内外研究现状,并对发展前景做出展望。数字化虚拟人体器官研究有助于提高人类对自身的认识,促进现代医学发展,并为医学研究和临床应用提供技术支撑。 杨芷菁 柯泽楷 连国云 刘志刚关键词:数字化技术 三维重建