吕颖慧
- 作品数：32 被引量：84H指数：6
- 供职机构：华侨大学生物医学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学一般工业技术更多>>
- 靶向Hmga2基因的siRNA药物筛选及抗肿瘤作用被引量：3
- 2011年
- HMGA2是一种结构性转录因子,在肺癌等多种肿瘤中过表达,是肿瘤治疗的候选靶点之一。RNAi技术作为一种经济、有效的基因沉默工具,是肿瘤治疗的新手段。本文以Hmga2基因为靶点,设计并合成了5条siRNA(HMGA2 siRNA1-5),通过MTT、平板克隆、Transwell、流式细胞术等手段,研究其对肺癌细胞(NCI-H446和A549)增殖、克隆形成、迁移和凋亡等能力的影响。结果表明,HMGA2 siRNA1、3、5对肺癌细胞的各项性能具有不同程度的影响,其中HMGA2 siRNA5尤为明显。HMGA2 siRNA5主要通过沉默Hmga2基因影响细胞性能,与其干扰素效应关系不大。本文筛选获得了可有效沉默Hmga2基因的siRNA,其在体外具有良好的抗肺癌活性,是具有一定潜力的肿瘤基因治疗候选药物。
- 王启钊龚玉华吕颖慧费凌娜刘会杰刁勇许瑞安
- 关键词：RNAIHMGA2SIRNA基因治疗
- 腺相关病毒的衣壳装配和DNA衣壳化机制被引量：7
- 2011年
- 重组腺相关病毒载体(rAAV)是基因治疗临床应用载体的选择之一。在简述野生型AAV基因组结构和复制机制的基础上,阐述了AAV包装过程中两个主要事件:衣壳蛋白的装配和基因组DNA的衣壳化。虽然对AAV的包装机制总体上已有一定的认识,但其详细的分子机制、构效关系仍需完善和充实。AAV病毒本身相关机制的深入研究有助于改善rAAV载体的制备技术,促进rAAV基因药物研发。
- 王启钊吕颖慧李招发刁勇许瑞安
- 关键词：腺相关病毒基因治疗
- 基因治疗用腺相关病毒载体的剂量效应与剂量控制(英文)被引量：3
- 2008年
- 人类基因治疗需要在靶细胞适时、适量、安全的产生具有疗效的药物,这些正好是定量药理学的研究范畴。重组腺相关病毒载体(rAAV)具有的各种特性以及近来在规模化制备方面取得的进展使其逐渐成为基因治疗的理想载体。超过60项以AAV为载体的基因治疗已经完成或正在展开。其中,rAAV载体的剂量与基因表达效率以及临床疗效之间的关系是研究者关注的焦点之一。多数研究认为,在一定的剂量范围内,基因表达水平具有剂量依赖性。然而,基因表达水平同时还受病毒载体构型、组织趋向性、细胞靶向性、注射途径,甚至患者的年龄、性别等条件影响,基因表达水平还可受到其他药物的调控。因此,基因治疗实验过程中应结合定量药理学深入展开,解决基因治疗中的定量与药效之间的关系。
- 王启钊吕颖慧许瑞安
- 关键词：基因治疗病毒载体定量药理学
- 突变型K-ras siRNA抑制肺癌A549细胞的增殖和迁移并诱导细胞凋亡被引量：1
- 2009年
- 目的：构建靶向K-ras的siRNA，研究K—rassiRNA对K-ras基因突变型肺癌细胞A549及K-ras野生型小细胞肺癌细胞NCI—H446生长和迁移的抑制作用。方法：设计并人工合成4条K．rassiRNA（针对野生型K-ras基因的K—rassiRNA1-K—rassiRNA3；针对突变型K-ras基因的K—rassiRNA4），并分别转入A549和NCI—H446细胞。RT—PCR和Westernblotting检测不同K—rassiRNA对K—rasmRNA和蛋白表达的影响，MTr法检测不同K—rassiRNA对A549和NCI—H446细胞增殖的抑制作用。Transwell实验和Hoechst33258染色检测K—rassiRNA对细胞迁移和凋亡的影响。结果：靶向突变型K-ras的K．rassiR—NA4能特异性抑制A549细胞中K-ras的表达，但对N-ras和H-ras的表达没有影响。K—rassiRNA4抑制A549细胞的增殖，但不影响含野生型K-ras基因的NCI—H446细胞的增殖。K—rassiRNA4还能诱导A549细胞凋亡、抑制A549细胞迁移。结论：针对突变型K-ras基因的siRNA可特异性抑制K-ras突变型肺癌细胞的增殖和迁移，并诱导该细胞凋亡，K—rassiRNA可望用于K-ras突变型肿瘤特别是肺癌的个体化治疗。
- 王启钊刁勇吕颖慧李招发许瑞安
- 关键词：K-RAS
- 重组腺相关病毒基因药物的病毒滴度定量测定被引量：4
- 2010年
- 重组腺相关病毒(rAAV)具有免疫原性低、在各种细胞中介导的转基因表达时间长等优点,将成为最广泛应用的基因治疗载体之一。rAAV基因药物临床研究历经16年,其有效性和安全性已得到充分证实,但其准确、可靠的定量测定标准方法仍未建立。目前采用的rAAV滴度测定方法按照原理可分为生物测定和物理测定两大类。生物测定主要评估载体传递转基因的能力,包括转导和感染滴度测定。物理测定则基于其物理性质,可细分为病毒颗粒和基因组滴度测定。本文对现有rAAV滴度测定方法的基本概念、原理、优点、缺点和适用范围等作一详细介绍。
- 刁勇王启钊吕颖慧许瑞安
- 关键词：生物学鉴定法依赖病毒腺相关病毒
- 肿瘤基因治疗的思路与出路
- 肿瘤基因治疗的临床研究开展将近20年，已有近1000项报道，涉及绝大多数肿瘤类型。然而，真正在临床上证明有效的基因药物还不是很多，其中一个主要原因是对肿瘤这一多基因、多步骤的复杂病变过程缺乏系统认识。新近的研究结果认为肿...
- 王启钊吕颖慧许瑞安
- 关键词：肿瘤治疗基因治疗
- 文献传递
- 抗肝纤维化药物研究进展被引量：1
- 2011年
- HF是各种慢性肝病的共同病理学基础,也是肝硬化的必经阶段。积极的抗HF治疗可以控制多种肝组织疾病,尤其是肝硬化的病理进程。靶点明确、疗效显著的抗HF药物是治疗的首选。本研究从HF药物作用靶点、药物研究的体内外模型及药物研究3个方面展开阐述抗HF药物的最新研究进展。
- 刘洪芳林小凤徐炉李成志云吕颖慧
- 关键词：肝纤维化作用靶点药物研究
- 重组腺相关病毒生产方法研究进展被引量：2
- 2012年
- 重组腺相关病毒(rAAV)作为基因治疗的载体,具有感染范围广、能在宿主细胞中长久稳定表达外源基因和非致病性等优点,因此在基因治疗领域倍受青睐。rAAV的大规模制备技术一直是限制其临床广泛应用的瓶颈。近年来,有许多改进rAAV制备工艺的尝试。我们在介绍rAAV载体制备所需各种元件的基础上,对这些方法进行了简要综述。
- 武虹宇吕颖慧许瑞安王启钊
- 关键词：腺相关病毒基因治疗
- MicroRNA在肺癌早期诊断、预后判断和治疗中的作用被引量：2
- 2008年
- 肺癌是目前世界范围内引起死亡人数最多的肿瘤。在蛋白和基因水平上,肺癌发生的分子网络已经部分得到阐明,基于肺癌发生分子网络的基因治疗在过去10年取得了一定的进展,但是肺癌的5年死亡率并没有得到明显的改善(80%～85%)。MicroRNA这一内源性、非编码的短RNA的发现为提高肺癌患者的存活率带来了新的希望。肺癌中microRNA的表达模式不但与肺癌的诊断、分期、进展、预后相关,也为肺癌的基因治疗以及其他常规化疗药物的开发提供了新的研究方向和方法。
- 王启钊吕颖慧刁勇许瑞安
- 关键词：肺癌RNA干扰MICRORNA基因治疗
- 腺相关病毒在帕金森病基因治疗研究中的应用进展被引量：1
- 2014年
- 腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)载体因具有安全性好、免疫原性低、能介导基因长期稳定表达、可感染分裂和非分裂细胞等优点,成为目前最具发展前景的基因治疗载体,已广泛应用于临床研究。在众多帕金森病基因治疗研究中大多以AAV为载体。本文在简述AAV生物学特性的基础上,着重论述了AAV携带神经营养因子、多巴胺合成相关酶和谷氨酸脱羧酶相关基因在帕金森病基因治疗中的最新研究进展。
- 陈阳吕颖慧李招发
- 关键词：腺相关病毒基因治疗帕金森病
