李招发
- 作品数：73 被引量：88H指数：5
- 供职机构：华侨大学更多>>
- 发文基金：福建省自然科学基金国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学化学工程更多>>
- 一种利用聚乙烯亚胺提高热激法质粒转化大肠杆菌感受态效率的方法
- 本发明属于生物技术领域，公开一种利用聚乙烯亚胺提高热激法质粒转化大肠杆菌感受态效率的方法，包括以下步骤：制备感受态细胞；配置浓度为10<Sup>‑7</Sup>v/v‑10<Sup>‑8</Sup>v/v的PEI溶液备用...
- 刘楠辛戚智青张云威刁勇李招发齐晓雪李梦琳
- 文献传递
- 可口革囊星虫纤溶酶基因、可口革囊星虫重组纤溶酶及其应用
- 本发明提供了一种可口革囊星虫纤溶酶基因、可口革囊星虫重组纤溶酶及其应用，所述可口革囊星虫纤溶酶基因序列如SEQ ID NO：1所示；通过蛋白表达系统对所述的可口革囊星虫纤溶酶基因进行重组蛋白诱导表达，得到所述可口革囊星虫...
- 许瑞安王秋艳熊亚楠李招发吴雅清马国兴蔡双凤崔秀灵
- 文献传递
- 突变型K-ras siRNA抑制肺癌A549细胞的增殖和迁移并诱导细胞凋亡被引量：1
- 2009年
- 目的：构建靶向K-ras的siRNA，研究K—rassiRNA对K-ras基因突变型肺癌细胞A549及K-ras野生型小细胞肺癌细胞NCI—H446生长和迁移的抑制作用。方法：设计并人工合成4条K．rassiRNA（针对野生型K-ras基因的K—rassiRNA1-K—rassiRNA3；针对突变型K-ras基因的K—rassiRNA4），并分别转入A549和NCI—H446细胞。RT—PCR和Westernblotting检测不同K—rassiRNA对K—rasmRNA和蛋白表达的影响，MTr法检测不同K—rassiRNA对A549和NCI—H446细胞增殖的抑制作用。Transwell实验和Hoechst33258染色检测K—rassiRNA对细胞迁移和凋亡的影响。结果：靶向突变型K-ras的K．rassiR—NA4能特异性抑制A549细胞中K-ras的表达，但对N-ras和H-ras的表达没有影响。K—rassiRNA4抑制A549细胞的增殖，但不影响含野生型K-ras基因的NCI—H446细胞的增殖。K—rassiRNA4还能诱导A549细胞凋亡、抑制A549细胞迁移。结论：针对突变型K-ras基因的siRNA可特异性抑制K-ras突变型肺癌细胞的增殖和迁移，并诱导该细胞凋亡，K—rassiRNA可望用于K-ras突变型肿瘤特别是肺癌的个体化治疗。
- 王启钊刁勇吕颖慧李招发许瑞安
- 关键词：K-RAS
- 蛋白质酪氨酸磷酸酶PRL-3与结肠癌的转移
- 李招发
- 关键词：PRL-3结肠癌SW480
- 文献传递
- 重组人可溶性TRAIL在毕赤酵母中表达与纯化及其抗肿瘤细胞活性
- 2010年
- 目的研究重组人可溶性TRAIL(sTRAIL)蛋白的表达和纯化,以及对HepG2细胞增殖与凋亡的影响。方法将人sTRAIL基因插入毕赤酵母表达载体pPIC9中,构建甲醇酵母分泌型表达载体pPIC9-sTRAIL,电击转化至GS115(his4),MD平板筛选出阳性菌株。对工程菌株发酵培养基成分、pH、甲醇浓度、诱导表达时间等条件进行优化,并初步分析重组sTRAIL蛋白的体外抗肿瘤活性。结果工程菌株在BMMY培养基(pH6.0)、1%甲醇条件下诱导表达48h目的蛋白浓度最高可达(58.7±2.4)mg/L。重组人sTRAIL蛋白能抑制HepG2细胞的增殖、诱导HepG2细胞的凋亡。结论优化了人sTRAIL的表达和纯化工艺条件,所生产的sTRAIL可用于抗肝癌新药的开发。
- 黄晓平王晓董浩赵小峰李招发王启钊许瑞安刁勇
- 关键词：STRAIL毕赤酵母纯化肿瘤
- 呼吸道合胞病毒核酸适配体及其应用
- 本发明公开了呼吸道合胞病毒核酸适配体及其应用，所述核酸适配体包括Apt‑1和Apt‑7中的至少之一，其中，Apt‑1的序列如SEQ ID No.1所示，Apt‑7的序列如SEQ ID No.2所示。本发明的DNA适配体能...
- 李招发折婵樊可心薛依萱赵浩迪史文亮毛雨锐林叶子
- 一种快速诊断H1N1流感病毒的试剂盒
- 本发明公开了一种快速诊断H1N1流感病毒的试剂盒，包括7条核苷酸序列和RCA反应体系。本试剂盒结合适体‑配体富集样品中的H1N1流感病毒，特异性成环，双引物RCA反应扩增，RCA产物的羟基萘酚蓝可视化显色，能够实现现场快...
- 李招发汪赛熊莹喆杨会勇林俊生
- 文献传递
- 重组人kallistatin蛋白在毕赤酵母中的高效表达及生物活性分析被引量：10
- 2010年
- 为了研究kallistatin(Kal)的生物活性,本实验构建了可分泌表达Kal的毕赤酵母菌株。首先通过PCR方法从pAAV-Kal中扩增出KalcDNA,并克隆至酵母表达载体pPIC9,得到甲醇酵母分泌型表达载体pPIC9-Kal,然后将载体线性化并电击转化毕赤酵母GS115(his4),通过MD平板筛选出阳性表达菌株。阳性表达菌株在BMMY培养基(pH7.0)中29℃培养,经2%甲醇诱导表达96h,摇瓶表达量可达14mg/L。表达上清经PhenylSuperose、Heparin SepharoseFF分离纯化,目的蛋白纯度达到98%,分子量为58kDa。生物活性实验显示,所得到的Kal蛋白具有较好的抗氧化活性,过氧化物酶活性达到(163±4)U/(mg·min),可有效降低H2O2对LX-2细胞的氧化损伤。另外,重组产生的Kal还能抑制HUVEC细胞的增殖。本研究首次成功地利用毕赤酵母表达系统分泌表达了有生物活性的Kal,为继续开展其抗肿瘤活性奠定了基础。
- 黄晓平王晓董浩赵小峰李招发王启钊许瑞安刁勇
- 关键词：KALLISTATIN毕赤酵母活性
- 一种鱼精蛋白专用编码基因及其应用
- 本发明提供一种鱼精蛋白专用编码基因，同时揭露了利用该编码基因制备鱼精蛋白的方法：将编码基因制得工程菌BL21-pET22b-CYGB-Pro；依次进行含Amp100μg/ml的LB培养基培养、含Amp100μg/ml的乳...
- 李招发占申标张雪曾雨汉沈丹马婧文林荣杰刁勇许瑞安
- 文献传递
- 铁过载氧化应激模型的构建、检测与分析
- 2011年
- 目的:建立正确的铁过载氧化应激模型及检测手段。方法:通过显微镜镜检、MTT法、结晶紫染色等方法测定Fe-NTA对肝星状细胞系LX-2及肝细胞系Chang liver增殖状态的影响;利用紫外可见全波长扫描方法分析Fe与酚红、MTT试剂及显色产物、结晶紫之间的颜色反应。结果:MTT试剂及显色产物与Fe之间存在颜色反应,不能用于检测铁过载氧化应激模型;结晶紫不与Fe发生颜色反应,结晶紫染色可作为铁过载氧化应激模型的检测手段;酚红与Fe之间存在一定的颜色反应,在铁过载氧化应激模型中应使用无酚红培养基。结论:构建铁过载氧化应激模型应使用无酚红培养基,并采用结晶紫染色方法检测细胞毒性。
- 吕颖慧王启钊李招发江楠刁勇许瑞安
- 关键词：铁过载应激肝星状细胞
