王启钊
- 作品数：43 被引量：92H指数：7
- 供职机构：华侨大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学一般工业技术更多>>
- 病毒作为纳米模板的研究进展
- 2012年
- 随着基因工程和纳米技术的发展,病毒的材料学应用潜能逐渐彰显.根据材料科学的观点,病毒可被看作有机纳米颗粒,其大小、形态以及表面的功能基团的数量和性质都是经过精确定义的.由于具有合适的大小、形状和明确的化学结构,病毒可被用作材料组装的纳米量级模板,调节无机材料、金属材料、磁性材料、半导体材料等的生长和成型.本文主要以丝状结构的M13噬菌体和球状结构的豇豆花叶病毒为例,阐述病毒作为模板在纳米导线、纳米电池、晶体管、存储器电路等领域的应用进展.
- 吕颖慧邱飞王启钊
- 关键词：病毒豇豆花叶病毒
- 脂质体转染人肝星状细胞和肝细胞条件优化被引量：2
- 2010年
- 利用Lipofectamine 2000（Lipo）介导LacZ及EGFP基因转染人肝星状细胞系LX-2和人肝细胞系Chang Liver,探讨Lipo用量、质粒用量、转染时间、细胞初始接种密度及不同启动子驱动对转染效率的影响.结果显示,两种细胞均能得到高效转染,Chang Liver细胞转染效率（＆gt;80%）高于LX-2细胞（＆gt;60%）.Lipo用量为每孔2μL,转染后6 h换液,LX-2细胞应用质粒DNA为每孔0.45μg,Chang Liver细胞应用质粒DNA为每孔0.30~0.45μg,此时转染效率最高.巨细胞病毒（CMV）启动子驱动LacZ转染效率与CMV早期增强子/鸡β肌动蛋白（CAG）启动子驱动增强型绿色荧光蛋白（EGFP）转染效率无显著差异;细胞初始接种密度对转染效率无显著影响.
- 吕颖慧王启钊刁勇许瑞安
- 关键词：脂质体肝星状细胞转染效率
- 基因治疗用腺相关病毒载体的剂量效应与剂量控制(英文)被引量：3
- 2008年
- 人类基因治疗需要在靶细胞适时、适量、安全的产生具有疗效的药物,这些正好是定量药理学的研究范畴。重组腺相关病毒载体(rAAV)具有的各种特性以及近来在规模化制备方面取得的进展使其逐渐成为基因治疗的理想载体。超过60项以AAV为载体的基因治疗已经完成或正在展开。其中,rAAV载体的剂量与基因表达效率以及临床疗效之间的关系是研究者关注的焦点之一。多数研究认为,在一定的剂量范围内,基因表达水平具有剂量依赖性。然而,基因表达水平同时还受病毒载体构型、组织趋向性、细胞靶向性、注射途径,甚至患者的年龄、性别等条件影响,基因表达水平还可受到其他药物的调控。因此,基因治疗实验过程中应结合定量药理学深入展开,解决基因治疗中的定量与药效之间的关系。
- 王启钊吕颖慧许瑞安
- 关键词：基因治疗病毒载体定量药理学
- 突变型K-ras siRNA抑制肺癌A549细胞的增殖和迁移并诱导细胞凋亡被引量：1
- 2009年
- 目的：构建靶向K-ras的siRNA，研究K—rassiRNA对K-ras基因突变型肺癌细胞A549及K-ras野生型小细胞肺癌细胞NCI—H446生长和迁移的抑制作用。方法：设计并人工合成4条K．rassiRNA（针对野生型K-ras基因的K—rassiRNA1-K—rassiRNA3；针对突变型K-ras基因的K—rassiRNA4），并分别转入A549和NCI—H446细胞。RT—PCR和Westernblotting检测不同K—rassiRNA对K—rasmRNA和蛋白表达的影响，MTr法检测不同K—rassiRNA对A549和NCI—H446细胞增殖的抑制作用。Transwell实验和Hoechst33258染色检测K—rassiRNA对细胞迁移和凋亡的影响。结果：靶向突变型K-ras的K．rassiR—NA4能特异性抑制A549细胞中K-ras的表达，但对N-ras和H-ras的表达没有影响。K—rassiRNA4抑制A549细胞的增殖，但不影响含野生型K-ras基因的NCI—H446细胞的增殖。K—rassiRNA4还能诱导A549细胞凋亡、抑制A549细胞迁移。结论：针对突变型K-ras基因的siRNA可特异性抑制K-ras突变型肺癌细胞的增殖和迁移，并诱导该细胞凋亡，K—rassiRNA可望用于K-ras突变型肿瘤特别是肺癌的个体化治疗。
- 王启钊刁勇吕颖慧李招发许瑞安
- 关键词：K-RAS
- 重组腺相关病毒基因药物的病毒滴度定量测定被引量：3
- 2010年
- 重组腺相关病毒(rAAV)具有免疫原性低、在各种细胞中介导的转基因表达时间长等优点,将成为最广泛应用的基因治疗载体之一。rAAV基因药物临床研究历经16年,其有效性和安全性已得到充分证实,但其准确、可靠的定量测定标准方法仍未建立。目前采用的rAAV滴度测定方法按照原理可分为生物测定和物理测定两大类。生物测定主要评估载体传递转基因的能力,包括转导和感染滴度测定。物理测定则基于其物理性质,可细分为病毒颗粒和基因组滴度测定。本文对现有rAAV滴度测定方法的基本概念、原理、优点、缺点和适用范围等作一详细介绍。
- 刁勇王启钊吕颖慧许瑞安
- 关键词：生物学鉴定法依赖病毒腺相关病毒
- 肿瘤基因治疗的思路与出路
- 肿瘤基因治疗的临床研究开展将近20年，已有近1000项报道，涉及绝大多数肿瘤类型。然而，真正在临床上证明有效的基因药物还不是很多，其中一个主要原因是对肿瘤这一多基因、多步骤的复杂病变过程缺乏系统认识。新近的研究结果认为肿...
- 王启钊吕颖慧许瑞安
- 关键词：肿瘤治疗基因治疗
- 文献传递
- 肿瘤基因治疗的思路与出路
- 肿瘤基因治疗的临床研究开展将近20年，已有近1000项报道，涉及绝大多数肿瘤类型。然而，真正在临床上证明有效的基因药物还不是很多，其中一个主要原因是对肿瘤这一多基因、多步骤的复杂病变过程缺乏系统认识。新近的研究结果认为肿...
- 王启钊吕颖慧许瑞安
- 关键词：肿瘤基因治疗疗效评价
- 文献传递
- 一种抑制Hmga2基因表达的双链siRNA及其应用
- 本发明公开了一种siRNA序列，具体为一种抑制Hmga2基因表达的双链siRNA序列，三对siRNA1、2、3序列都能抑制肿瘤细胞和血管内皮细胞的迁移，是很好的治疗肿瘤的药物。
- 王启钊刁勇许瑞安
- 肝星状细胞氧化应激模型的构建、检测与分析被引量：3
- 2010年
- 目的:建立更为全面的肝星状细胞体外氧化应激模型,为检验药物在肝纤维化氧化应激中发挥的具体作用提供有效工具。方法:分别用Fe-NTA/AA及过氧化氢作用于大鼠原代肝星状细胞及人肝星状细胞系LX-2细胞以造成不同类型的氧化应激反应,以超氧化物阴离子荧光探针检测细胞内产生的超氧化物水平,并分别用结晶紫染色或MTT检验来检测不同氧化刺激物对两种肝星状细胞体外增殖性的影响。结果:铁过载及过氧化氢都会引起两种细胞产生氧化应激反应,铁过载可加速原代肝星状细胞激活,对已完全活化的LX-2细胞产生明显毒性作用;过氧化氢则对两种细胞都会造成明显的细胞毒性作用。结论:处于不同激活状态的肝星状细胞对不同氧化刺激物的反应存在差异,因而在检验肝纤维化药物有效性时,应根据不同的病理、生理需求选择恰当的细胞及氧化应激模型。
- 王启钊吕颖慧李招发江楠刁勇许瑞安
- 关键词：铁过载过氧化氢氧化应激肝星状细胞肝纤维化
- 靶向Hmga2基因的siRNA药物筛选及抗肿瘤作用被引量：3
- 2011年
- HMGA2是一种结构性转录因子,在肺癌等多种肿瘤中过表达,是肿瘤治疗的候选靶点之一。RNAi技术作为一种经济、有效的基因沉默工具,是肿瘤治疗的新手段。本文以Hmga2基因为靶点,设计并合成了5条siRNA(HMGA2 siRNA1-5),通过MTT、平板克隆、Transwell、流式细胞术等手段,研究其对肺癌细胞(NCI-H446和A549)增殖、克隆形成、迁移和凋亡等能力的影响。结果表明,HMGA2 siRNA1、3、5对肺癌细胞的各项性能具有不同程度的影响,其中HMGA2 siRNA5尤为明显。HMGA2 siRNA5主要通过沉默Hmga2基因影响细胞性能,与其干扰素效应关系不大。本文筛选获得了可有效沉默Hmga2基因的siRNA,其在体外具有良好的抗肺癌活性,是具有一定潜力的肿瘤基因治疗候选药物。
- 王启钊龚玉华吕颖慧费凌娜刘会杰刁勇许瑞安
- 关键词：RNAIHMGA2SIRNA基因治疗
