刘思莹
- 作品数:7 被引量:11H指数:3
- 供职机构:东北农业大学动物医学学院更多>>
- 发文基金:国家科技支撑计划国家现代农业产业技术体系建设项目黑龙江省科技计划项目更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生生物学更多>>
- Asia1型口蹄疫病毒VP2蛋白B细胞线性表位的鉴定被引量:4
- 2009年
- 为了对Asia1型口蹄疫病毒VP2蛋白进行抗原表位作图,设计了7个相互重叠15个氨基酸、覆盖整个VP2蛋白的重叠短肽,经克隆并在大肠杆菌中实现了融合表达。用Asia1型口蹄疫感染血清对7个融合蛋白进行免疫印迹分析,结果初步鉴定出VP2蛋白B细胞线性抗原表位位于氨基末端的第1-44氨基酸区域,并且证实O型、A型、C型口蹄疫标准血清和感染SAT2型口蹄疫康复期的牛血清也能识别融合蛋白F1(1-44 aa)。在此基础上,针对F1(1-44 aa)短肽,设计了6个相互重叠5个氨基酸的短肽片段,进一步鉴定出了VP2蛋白B细胞线性表位位于氨基末端的第6-15氨基酸区域。
- 徐宗香高明春李勐李爽刘思莹葛兰云张润祥马波王君伟
- 关键词:口蹄疫病毒VP2蛋白
- 禽流感病毒M1抗体间接阻断ELISA检测方法的建立被引量:4
- 2009年
- 以禽流感病毒(AIV)重组M1蛋白作为检测抗原,兔抗M1血清为阻断抗体,建立了检测AIVM1抗体的间接阻断ELISA方法。经筛选确定,抗原最佳包被浓度为0.78μg/mL,阻断抗体最佳稀释度为1∶15000,待检血清最佳稀释度为1∶10。用该ELISA方法对38份AIV阳性禽类样本和26份AIV阴性禽类样本进行检测,结果显示,该方法的敏感性为97.37%,特异性为96.15%。交叉试验证明该方法与新城疫等8种其他禽病阳性血清不发生交叉反应。用该ELISA方法对268份已知HI效价的临床样品进行检测,结果与HI的符合率达92%以上。表明,建立的间接阻断ELISA方法可用于AIV抗体的检测和禽流感的流行病学调查。
- 王兆鹏尚绪增刘思莹马波王君伟
- 关键词:禽流感病毒
- 抗牛γ-干扰素单克隆抗体制备和鉴定
- γ-干扰素(IFN-γ)主要是在特定的抗原、有丝分裂原(ConA、PHA)的刺激下由活化T淋巴细胞或NK细胞产生的一类具有广谱抗病毒、抑制细胞增殖和免疫调节等多种生物学活性的糖蛋白。自Cerretti于1986年首次克隆...
- 刘思莹
- 关键词:Γ-干扰素IFN-Γ基因单克隆抗体免疫机制免疫功能
- 文献传递
- IFN-γ真核质粒对口蹄疫病毒生长激素环多肽免疫小鼠的佐剂效应
- 2010年
- 葛兰云刘思莹李勐高明春刘湘涛王君伟
- 关键词:IFN-Γ佐剂效应口蹄疫病毒免疫小鼠素环
- 牛IFN-γ基因的原核表达及其产物卵黄抗体的制备
- 2010年
- 刘思莹葛兰云徐宗香王兆鹏李勐高明春马波王君伟
- 关键词:IFN-Γ卵黄抗体原核表达基因Γ-干扰素
- 抗牛IFN-γ单克隆抗体的制备与鉴定
- 2009年
- 试验以纯化的rHis-BoIFN-γ蛋白为免疫原免疫4~6周龄BALB/c鼠,3次免疫后,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,用纯化的rGST-BoIFN-γ作为检测抗原,以间接ELISA和有限稀释法进行筛选,并初步鉴定其生物学特性。结果表明,试验共获得4株能稳定分泌抗rBoIFN-γ单克隆抗体的杂交瘤细胞株。抗体亚类均为IgM,轻链为κ链;其中腹水效价2株均达到5×104以上;通过Western blot结果表明,4株单抗均可特异性的结合rGST-BoIFN-γ蛋白,而不与GST标签蛋白反应。间接ELISA试验证明,4株单抗只与rBoIFN-γ反应,而不与GST蛋白和rGoIFN-α、rGoIFN-γ、rBoIFN-α等细胞因子发生交叉反应。通过间接免疫荧光显示,4株单抗均与真核细胞BHK21表达的rBoIFN-γ反应产生强荧光反应,证明了单抗能够与接近天然的BoIFN-γ反应,证实了单抗的特异性。阻断ELISA检测结果表明,3D10株单抗能够与牛外周血诱导产生的天然干扰素发生反应,证实了该单抗具有实际的应用价值。
- 刘思莹葛兰云徐宗香李勐高明春王君伟
- 关键词:单克隆抗体
- 牛IL-2重组质粒对口蹄疫病毒G-H环多肽免疫小鼠的佐剂效应被引量:3
- 2009年
- 本试验目的是研究牛IL-2重组质粒对口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus,FMDV)G-H环多肽免疫小鼠的佐剂效应。作者构建了含有信号肽序列的牛IL-2真核表达质粒pcDNA3.1-pBoIL-2,并体外鉴定其表达,同时原核表达并纯化了Asia1型FMDV G-H环多肽。采用不同组合的pcDNA3.1-pBoIL-2、FMDV G-H环多肽分组免疫小鼠,并设阴、阳性对照,通过间接ELISA试验、微量血清中和试验、淋巴细胞增殖试验和实时定量PCR试验对各免疫组小鼠体液和细胞免疫水平进行综合评价。结果表明,与G-H+pcDNA3.1免疫组比较,G-H+pcD-NA3.1-pBoIL-2免疫组特异性抗体水平、中和抗体滴度、淋巴细胞增殖水平和细胞因子相对表达水平显著提高(P<0.05)。结果提示,牛IL-2真核表达质粒可以显著提高G-H环多肽的免疫效果。
- 葛兰云李勐李爽刘思莹徐宗香张润祥高明春马波王君伟
- 关键词:IL-2FMDV