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鸭肠炎病毒gB基因的分子特征被引量：3: 2009年; 鸭肠炎病毒是鸭病毒性肠炎的病原,被划分为疱疹病毒科成员。gB是疱疹病毒感染和复制所必需的糖蛋白,能刺激机体产生中和抗体和细胞免疫应答,在疱疹病毒家族中高度保守。通过PCR技术获得了DEV C-KCE株gB基因的核苷酸序列,首次对DEVgB基因及编码氨基酸进行了较为详尽的生物信息学分析。结果表明,DEVgB基因与α-疱疹病毒的马立克氏病毒属亲缘关系最近;DEV gB蛋白具有与其他疱疹病毒gB相同或相似的结构、N糖基化位点、半胱氨酸残基、硫酸乙酰肝素蛋白聚糖(HSPGs)结合位点、弗林蛋白酶水解位点和胞浆区PACS-1识别位点。; 马波刘峰源张扬乌伊罕刘晓玫王君伟; 关键词：鸭肠炎病毒鸭瘟 GB基因糖蛋白

鸭肠炎病毒C-KCE株TK基因的原核表达及其多克隆抗体的制备被引量：3: 2015年; 为了探究鸭肠炎病毒(DEV)TK基因编码蛋白在相关细胞上作用与功能及其在病毒感染周期、机体免疫应答中的作用,试验以DEV C-KCE株基因组DNA为模板扩增获得TK基因,在p ET-32a(+)/Rosetta(DE3)p Lys系统中原核表达,并用IPTG诱导DEV TK重组蛋白。结果表明:经SDS-PAGE分析,外源基因主要以包涵体形式表达,分子质量约为59 ku;经Ni-NTA纯化后免疫新西兰白兔制备多克隆抗体,抗体效价可达到1∶4;经Western-blot分析,制备的多克隆抗体可特异性识别重组蛋白;间接免疫荧光试验证实,制备的多克隆抗体与DEV的TK基因编码产物反应性良好。说明TK基因表达蛋白在鸭肠炎感染周期及机体的免疫应答中发挥着至关重要的作用。; 赵宇田荔母晓宇董井泉高明春张文龙马波王君伟; 关键词：TK基因原核表达多克隆抗体 WESTERN-BLOT 间接免疫荧光试验

鹅干扰素-α的毕赤酵母表达及其生物学活性分析被引量：2: 2013年; 为在毕赤酵母表达系统中表达无冗余氨基酸且具有抗病毒活性的鹅干扰素-α(IFN-α)蛋白,采用融合PCR法扩增获得鹅干扰素-α基因片段,将此片段连入pPICZαA载体,构建重组表达质粒pPICZαA-GoIFN-α,电击转化毕赤酵母感受态细胞X33,挑取阳性重组菌用甲醇进行诱导表达,对表达产物进行West-ern-blot和ELISA分析,并测定重组IFN-α的生物活性。结果显示,融合基因获得高效表达,表达的蛋白以可溶形式存在,且相对分子质量较理论值稍大。经GEF-GPMV系统检测,证实表达的蛋白具有生物学活性,约为6.55×105 U/mL,比活力为1.80×105 U/mg。结果表明,利用毕赤酵母表达系统规模化生产具有生物学活性的鹅IFN-α有广阔的应用前景。; 朱永梅曹永生李鑫马波张文龙高明春王君伟; 关键词：干扰素-Α 巴斯德毕赤酵母分泌表达抗病毒活性

A型禽流感病毒NS1蛋白的表达及其诱导细胞凋亡功能的研究被引量：6: 2009年; 利用瞬时表达方法表达禽流感病毒(AIV)NS1蛋白,并初步研究了体外表达的NS1蛋白对宿主细胞凋亡的影响。应用脂质体介导法,将含有不同亚型AIV NS1基因的阳性质粒pcDNA3.1(+)-qNS1(H5N1)、pcDNA3.1(+)-rNS1(H9N2)转染Vero细胞系及MDCK细胞系。经SDS-PAGE及Western-blotting检测,qNS1和rNS1基因在Vero细胞及MDCK细胞中均获得了表达。应用AO/EB荧光染色法、Annexin V-PI法分别对转染后的Vero细胞及MDCK细胞进行细胞凋亡检测,结果显示,转染阳性质粒的MDCK细胞凋亡率增高,而转染空载体pcDNA3.1(+)的MDCK细胞及转染的Vero细胞均无明显变化。表明,qNS1、rNS1蛋白在体外培养的MDCK细胞中表达并能够诱导其发生凋亡,而在Vero细胞中却不能发挥此功能。; 孙进华马波于志丹霍慧王君伟; 关键词：禽流感病毒 NS1蛋白 MDCK细胞 VERO细胞真核表达

昆明鼠对猪轮状病毒核酸免疫的抗体应答被引量：2: 2004年; 将昆明鼠随机分为A、B两组,分别肌肉注射含有猪轮状病毒(RV)JL94株VP7基因的重组真核表达质粒pcDNA-VP7和真核表达载体pcDNA3.1(+),每只鼠100μg·(100μL)-1,共免疫3次,每次间隔2周。首次免疫第0,14,21,28,35,39,47,54天采血分离血清用ELISA法检测抗体动态变化。A组小鼠血清在首免后第14天即可检出阳性抗体(P/N≥2.0)。; 师东方贾永清李一经王君伟马波刘宝全; 关键词：轮状病毒 VP7基因核酸免疫抗体

α疱疹病毒gH与gL蛋白的研究进展被引量：1: 2007年; 疱疹病毒种类繁多，可感染哺乳类、鸟类、两栖类和无脊椎动物，引起多种疾病。也有一些病毒可以在宿主体内终生潜伏。迄今至少已鉴定100种疱疹病毒，其中19种已完成全基因组测序，包括马疱疹病毒1、2及4型，牛鼻气管炎病毒等。疱疹病毒分为4个亚科，即α疱疹病毒亚科、β疱疹病毒亚科、γ疱疹病毒亚科及未定名亚科。其中α疱疹病毒亚科分为单纯疱疹病毒属、水痘病毒属、类鸡马立克病病毒属及类传染性喉气管炎病毒属，; 汤海宽王君伟马波邢明伟赵妍张扬; 关键词：传染性喉气管炎病毒 GH 全基因组测序鼻气管炎病毒单纯疱疹病毒

鹅免疫球蛋白编码区及其恒定区特异性单克隆抗体与应用: 本发明公开了鹅免疫球蛋白编码区及其恒定区特异性单克隆抗体与应用。本发明提供的鹅免疫球蛋白编码区包含λ链的全部编码区序列，重链的可变区、D片段和J片段编码序列、α链的恒定区编码序列以及μ链、υ链恒定区的部分编码序列。本发明...; 王君伟郭永丽高明春马波; 文献传递

鸭免疫球蛋白及其在抗感染免疫中的作用: 2004年; 鸭作为一种经济型水禽其集约化饲养规模不断扩大,鸭疫病的防治已经成为新的研究热点.与鸡相比,鸭的基础性免疫机制研究较少,这给兽医科技工作者在鸭疫病防治的工作中带来许多困难.现就现有的资料简要的介绍鸭免疫球蛋白及其在鸭主要几种疫病中抗感染作用,为鸭疫病防治的实践工作提供一点可供借鉴的资料.; 李洪涛马波王君伟; 关键词：免疫球蛋白抗感染作用免疫功能

Asia 1型口蹄疫病毒3A非结构蛋白抗原表位缺失感染性cDNA及其构建方法: Asia 1型口蹄疫病毒3A非结构蛋白抗原表位缺失感染性cDNA及其构建方法，它涉及口蹄疫病毒3A非结构蛋白抗原表位缺失感染性cDNA及其构建方法。它解决了现有灭活疫苗纯化过程中很难监测，所以残留的非结构蛋白会干扰对自然...; 王君伟李爽高明春马波; 文献传递

禽流感灭活疫苗和重组活疫苗免疫后抗体消长的检测和比较: 2009年; 张雅为孙进华邢明伟马波王君伟; 关键词：禽流感灭活疫苗抗体消长疫苗免疫禽流感疫苗 HI抗体水平

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