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丁卫: 作品数：53 被引量：147H指数：6; 供职机构：首都医科大学基础医学院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金北京市教委科技发展计划首都医科大学校长研究基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学文化科学自然科学总论更多>>

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形成性评价在医学生物化学教学中的探索被引量：24: 2018年; 形成性评价是在教学过程中进行的评价,能调动学生学习的积极性和主动性。通过建立形成性评价体系,并在基础医学班的医学生物化学教学中实施,旨在探讨形成性评价对医学生物化学教学的促进作用,为基础医学教育的评价体系改革积累经验。; 余和芬丁卫程杉; 关键词：生物化学教学改革

用于细胞核钙成像的新型钙指示剂的构建与鉴定(英文): 2015年; 细胞核钙离子是基因转录等细胞核反应过程重要的调控因子.然而,细胞核内钙离子信号的调控机制尚不清楚.缺乏稳定的、敏感的细胞核钙指示剂,是导致其调控机制难以研究的重要原因之一.针对这一问题,设计了能够在细胞核内特异性表达的、具有核定位功能的钙指示剂.以基因编码钙指示剂(GECIs)家族成员GCa MP6为模板,首先融合了对钙离子不敏感的红色荧光蛋白td Tomato来对局部的钙信号进行量化,其次融合了核定位信号(NLS),使GCa MP6能够特异定位于细胞核中.结果表明,NLS-GCa MP6-td Tomato能够在细胞核中有效发挥作用,并且在钙敏感性与动力学上,也与GCa MP6相当.这一新型细胞核钙指示剂将为研究细胞核钙离子的功能及其调控机制提供新的方法与途径.; 齐特杨华乾范雪新赵天郭运波丁卫叶海虹

红外荧光素Alexa Fluor 647标记的2型腺相关病毒保持天然的感染活性被引量：3: 2008年; 近年来红外荧光素的研发及相应的标记技术的进展在生物医学领域的研究中备受关注,通过与尖端仪器的结合在一系列生物样本的检测中得到广泛的应用.然而,红外荧光标记技术在病毒感染生物学研究中的应用却少见报道.本文建立了Alexa Fluor 647(AF647)红外荧光素标记重组2型腺相关病毒(AAV2)的方法,并通过凝胶电泳的银染、红外荧光成像和透射电镜分析等手段,对标记病毒的结构和形态与未标记的病毒进行了细致的比较,同时进一步鉴定了其感染293T细胞后的转导活性.结果发现,AAV2在标记后的理化性质和感染活性均未发生改变.应用狭缝印迹和激光共聚焦显微成像技术,分别对标记病毒的细胞摄取效率和在宿主细胞内的分布进行描述,为红外标记AAV2在研究中的应用提供了范例.AF647标记的AAV2为腺相关病毒的感染动力学研究提供了新的手段,具有敏感度高、抗荧光漂白和低非特异干扰等优点,并且对直接有效地结合形态学分析和生化分子生物学检测,具有重要的应用价值.; 贾书勤张凤兰丁卫; 关键词：腺相关病毒荧光标记 ALEXA FLUOR 红外成像

外泌体及其在肿瘤诊疗中的意义被引量：37: 2014年; 外泌体(exosome)是由多种活细胞分泌的囊泡小体,其中含有蛋白质和RNA等多种组分。这种机体内普遍存在的纳米级被膜结构能够参与细胞间的物质交换和信息交流,在多种生理和病理过程中发挥重要作用。外泌体在外周血、尿液、唾液、腹水、羊水等体液中具有很高的丰度,而不同组织来源的外泌体在组成和功能方面存在差异,同时这种差异受到细胞外基质和微环境的动态调控。肿瘤来源或肿瘤相关的外泌体是调控肿瘤发生发展的重要机制,对肿瘤外泌体的分析和检测可以辅助肿瘤的早期诊断、疗效评价和预后分析。此外,外泌体及其修饰加工产物还可以作为基因或药物的有效载体,用于肿瘤治疗。关于外泌体的研究是肿瘤学的一个新兴领域,在转化医学的研究模式下,将极大推动肿瘤学研究进展,为肿瘤临床诊断和治疗带来新的契机。; 张敏张晨光丁卫; 关键词：外泌体肿瘤生物标志物小RNA

AAV介导的BATF2/SARI过表达抑制肝癌细胞HepG2增殖被引量：1: 2013年; 目的探讨腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)介导的BATF2/SARI过表达对肝癌细胞HepG2细胞活力的影响及其分子机制。方法通过分子克隆技术构建AAV介导的BATF2/SARI过表达载体,用包装纯化后的AAV-BATF2感染HepG2细胞,MTT检测其对细胞活力的作用,荧光素酶分析其对NFκB转录活性的影响。结果重组AAV-BATF2载体构建成功,AAV-BATF2感染的HepG2细胞生长活力受到明显抑制,NFκB转录活性明显下调。结论重组AAV-BATF2病毒感染人肝癌细胞HepG2可抑制肿瘤细胞增殖,其对NFκB转录活性的抑制可能是其发挥作用的机制之一。; 龚嘉玲白雪佳路钊张晨光丁卫牛静; 关键词：腺相关病毒肝癌细胞细胞活力

单蓝A作为蛋白质预染色剂的用途: 本发明公开了单蓝A作为蛋白质预染色剂的用途，属于蛋白质染色领域。本发明发现，采用单蓝A作为蛋白质的预染色剂，具有染色步骤简便、染色时间短、染色剂用量少等优点，染色后的蛋白产物可以肉眼直观检测也可以在近红外激发光下采用扫描...; 丁卫窦云鹏龚嘉玲张晨光郑少鹏油红捷; 文献传递

利用重组人α乳清蛋白和油酸大量快速制备高活性的HAMLET肿瘤杀伤复合物被引量：2: 2012年; 目的可致肿瘤细胞死亡的人α乳清蛋白(human alpha-lactalbumin made lethal to tumor cells,HAMLET)是一种可导致多种癌细胞死亡的强效选择性肿瘤杀伤蛋白质-脂酸复合物。为了使HAMLET应用于肿瘤的治疗并对其杀伤机制进行探讨,我们需要建立和优化简便、快速、规模化制备与纯化HAMLET的方法。方法通过构建人α乳清蛋白分泌型细胞MCF-7的cDNA文库,PCR扩增出编码人α乳清蛋白成熟肽段的全长序列,然后克隆入pET30a(+)表达载体质粒,并转化BL21(DE3)宿主大肠杆菌。经过IPTG诱导,表达细菌的裂解,蛋白体外复性,Ni-NTA亲和层析柱纯化等步骤,获得了高纯度的重组人α乳清蛋白的C端His标签融合蛋白。纯化蛋白经EDTA脱钙后,与油酸(oleic acid,OA)在加热条件下制备HAMLET复合物。同时,对HAMLET的理化特性和生物学活性进行检测。结果通过与经典方法制备的牛α乳清蛋白和OA复合物(BAMLET)进行比较,发现我们制备的HAMLET在紫外吸收光谱、疏水性质特征及肿瘤杀伤活力方面与BAMLET活性相符,并且可引起HeLa肿瘤细胞的凋亡样程序性死亡。结论本研究自主制备的HAMLET成本经济、方法简便且具有较好的规模化放大前景,为日后临床应用奠定基础。; 张轶博曾瑞霞牛静郑少鹏贾弘禔丁卫; 关键词：肿瘤细胞程序性死亡

而今迈步从头越——2010年十大科学突破: 2011年; 在21世纪第一个十年即将结束的时刻,美国《科学》杂志编列出了2010年度的十大科学突破,以及近十年来最有影响力的十大科技领域和成就。在赞誉做出这些重要贡献的科学家及其惊艳工作的同时,全球的研究人员得以分享科技发展带来的兴奋,对未来的挑战与进展充满期待,并且激发出对追寻灵感和努力工作的热情。; 丁卫; 关键词：学术成就

BATF2/SARI通过抑制p53依赖的NF-κB转录活性诱导肿瘤细胞凋亡被引量：14: 2011年; BATF2/SARI是一种新发现的转录因子,具有与BATF和BATF3类似的碱性亮氨酸拉链结构,可抑制AP-1转录因子家族(AP-1 transcription factors)活性,从而发挥抑癌作用.但目前关于BATF2表达调节与功能尚不十分清楚.本研究证明,BATF2通过抑制p53相关的NF-κB活性诱导细胞凋亡.实时定量PCR检测mRNA揭示,BATF2/SARI在p53-野生型的A549、HeLa细胞高水平表达,但在p53-缺失型的H1299细胞表达较低.基因转染结合MTT法、TUNEL法显示,过表达BATF2可诱导凋亡,抑制肿瘤细胞增殖;这种抑制效应与细胞p53表达水平相关.采用含NF-κB或AP-1结合位点的(人工合成)启动子驱动的荧光素酶报告基因活性分析发现,过表达BATF2既可抑制AP-1,又可抑制NF-κB转录活性;抑制NF-κB活性与细胞p53状态有关.RNA干扰敲减A549、HeLa细胞的p53表达可消除过表达外源BATF2引起的NF-κB活性下降.本研究结果提示,BATF2通过抑制NF-κB及AP-1转录活性诱导凋亡,从而抑制细胞增殖;BATF2对NF-κB活性的抑制作用依赖p53.因此,BATF2作为一种抑癌基因产物,其作用机制可能比当前的认识和预期更为复杂.; 路钊郑少鹏牛静贾弘禔丁卫; 关键词：NF-ΚB P53 肿瘤凋亡

基因编码钙指示剂在药物反应性细胞核钙信号实时动态检测中的应用: 2018年; 目的探讨新型基因编码钙指示剂(genetically-encoded calcium indicators,Ge CIs)在药物反应性细胞核钙信号实时动态检测中的应用。方法将常用的Ge CI变体——GCa MP6s用核定位序列(nuclear localization sequence,NLS)标记以用于细胞核钙的检测;同时在其C端与红色荧光蛋白td Tomato融合作为分子内的定量参照。将构建的质粒分别转染至He La细胞和U87MG细胞中,利用活细胞共聚焦显微成像技术对核钙信号的实时变化进行动态监测。结果蕈青霉素(Paxilline)能够引起在40 min连续记录中核钙水平的持续增加,并且增加的动力学模式在不同的细胞系中差异存在统计学意义;同时在药物处理后细胞反应的筛选中显示,青蒿素可以引起细胞核钙浓度的明显改变,其变化的幅度与持续情况与蕈青霉素及过氧化氢的作用有所不同。此外,笔者还发现利用核钙的变化指标可以对细胞在接受应激性刺激后的异质性表现进行统计聚类分析。结论在非兴奋细胞中,不同药物刺激可以引起细胞核钙离子浓度的升高。; 龚明涛张晨光丁卫; 关键词：青蒿素

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