牛静 作品数:13 被引量:32 H指数:2 供职机构: 首都医科大学基础医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 北京市教委科技发展计划 中国高等教育学会医学教育专业委员会医学教育研究立项课题 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 文化科学 自动化与计算机技术 更多>>
处理腺相关病毒的方法及试剂盒 本发明提出了处理腺相关病毒的方法及试剂盒。所述方法包括:将腺相关病毒与连接有标签蛋白的腺相关病毒受体接触,以便得到腺相关病毒‑腺相关病毒受体‑标签蛋白复合物;以及将所述腺相关病毒‑腺相关病毒受体‑标签蛋白复合物与结合蛋白... 丁卫 崔梦甜 程杉 卢雅彬 张晨光 牛静文献传递 AAV介导的BATF2/SARI过表达抑制肝癌细胞HepG2增殖 被引量:1 2013年 目的探讨腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)介导的BATF2/SARI过表达对肝癌细胞HepG2细胞活力的影响及其分子机制。方法通过分子克隆技术构建AAV介导的BATF2/SARI过表达载体,用包装纯化后的AAV-BATF2感染HepG2细胞,MTT检测其对细胞活力的作用,荧光素酶分析其对NFκB转录活性的影响。结果重组AAV-BATF2载体构建成功,AAV-BATF2感染的HepG2细胞生长活力受到明显抑制,NFκB转录活性明显下调。结论重组AAV-BATF2病毒感染人肝癌细胞HepG2可抑制肿瘤细胞增殖,其对NFκB转录活性的抑制可能是其发挥作用的机制之一。 龚嘉玲 白雪佳 路钊 张晨光 丁卫 牛静关键词:腺相关病毒 肝癌细胞 细胞活力 Coilin参与顺铂诱导的HeLa细胞早衰 <正>Coilin是卡哈尔体(Cajal body,CB)的标志性蛋白。CB在端粒酶的成熟和端粒的维持中发挥重要作用,但coilin和CB是否参与细胞衰老进程及其作用机制目前还不清楚。化疗药物顺铂诱导的肿瘤细胞衰老是研究... 宋瑶瑶 牛静 丁卫关键词:COILIN 顺铂 细胞衰老 文献传递 中医药专业医学分子生物学教学方法的探索与实践 2015年 医学分子生物学是一门基础医学理论课,根据中医药的学科特点和培养要求,优化教学内容,采取互动式教学激发学生自主学习能力,充分利用丰富教学资源,调动学生学习积极性,教学效果得到明显改善。 付慧芳 牛静 油红捷 周妍 孔璐关键词:医学分子生物学 中医药 教学方法 基于BOPPPS教学模式的医学分子生物学混合式教学设计 2024年 随着科技的发展,传统的灌输式课堂已不能满足学生的需求和达到良好的教学效果。医学分子生物学是医学专业的基础课程,由于课程相关知识与技术发展迅猛,内容抽象复杂而繁多,导致学生在单纯的传授式课堂中兴趣不高而严重影响学习质量,亦不利于实现“一流医学本科教育”的目标和培养适应时代发展需要的高素质医学人才。BOPPPS(bridge-in,objective,pre-assessment,participatory-learning,post-assessment,summary)教学模式结合以问题为基础的教学法(problem based-learning,PBL)和以团队为基础的教学法(team based-learning,TBL)的混合式教学模式强调在教学过程中以学生为主体,注重教学多元互动和培养学生自主学习能力。文章探讨将BOPPPS教学模式结合以问题为基础的教学法(problem-based learning,PBL)、以团队为基础的教学法(team-based learning,TBL)的教学模式应用于医学分子生物学教学,旨在提高教学效果和学生的学习质量,培养学生的综合学习能力和医学素养。 褚巧云 牛静 秦琼关键词:混合式教学 利用重组人α乳清蛋白和油酸大量快速制备高活性的HAMLET肿瘤杀伤复合物 被引量:2 2012年 目的可致肿瘤细胞死亡的人α乳清蛋白(human alpha-lactalbumin made lethal to tumor cells,HAMLET)是一种可导致多种癌细胞死亡的强效选择性肿瘤杀伤蛋白质-脂酸复合物。为了使HAMLET应用于肿瘤的治疗并对其杀伤机制进行探讨,我们需要建立和优化简便、快速、规模化制备与纯化HAMLET的方法。方法通过构建人α乳清蛋白分泌型细胞MCF-7的cDNA文库,PCR扩增出编码人α乳清蛋白成熟肽段的全长序列,然后克隆入pET30a(+)表达载体质粒,并转化BL21(DE3)宿主大肠杆菌。经过IPTG诱导,表达细菌的裂解,蛋白体外复性,Ni-NTA亲和层析柱纯化等步骤,获得了高纯度的重组人α乳清蛋白的C端His标签融合蛋白。纯化蛋白经EDTA脱钙后,与油酸(oleic acid,OA)在加热条件下制备HAMLET复合物。同时,对HAMLET的理化特性和生物学活性进行检测。结果通过与经典方法制备的牛α乳清蛋白和OA复合物(BAMLET)进行比较,发现我们制备的HAMLET在紫外吸收光谱、疏水性质特征及肿瘤杀伤活力方面与BAMLET活性相符,并且可引起HeLa肿瘤细胞的凋亡样程序性死亡。结论本研究自主制备的HAMLET成本经济、方法简便且具有较好的规模化放大前景,为日后临床应用奠定基础。 张轶博 曾瑞霞 牛静 郑少鹏 贾弘禔 丁卫关键词:肿瘤细胞 程序性死亡 BATF2/SARI通过抑制p53依赖的NF-κB转录活性诱导肿瘤细胞凋亡 被引量:14 2011年 BATF2/SARI是一种新发现的转录因子,具有与BATF和BATF3类似的碱性亮氨酸拉链结构,可抑制AP-1转录因子家族(AP-1 transcription factors)活性,从而发挥抑癌作用.但目前关于BATF2表达调节与功能尚不十分清楚.本研究证明,BATF2通过抑制p53相关的NF-κB活性诱导细胞凋亡.实时定量PCR检测mRNA揭示,BATF2/SARI在p53-野生型的A549、HeLa细胞高水平表达,但在p53-缺失型的H1299细胞表达较低.基因转染结合MTT法、TUNEL法显示,过表达BATF2可诱导凋亡,抑制肿瘤细胞增殖;这种抑制效应与细胞p53表达水平相关.采用含NF-κB或AP-1结合位点的(人工合成)启动子驱动的荧光素酶报告基因活性分析发现,过表达BATF2既可抑制AP-1,又可抑制NF-κB转录活性;抑制NF-κB活性与细胞p53状态有关.RNA干扰敲减A549、HeLa细胞的p53表达可消除过表达外源BATF2引起的NF-κB活性下降.本研究结果提示,BATF2通过抑制NF-κB及AP-1转录活性诱导凋亡,从而抑制细胞增殖;BATF2对NF-κB活性的抑制作用依赖p53.因此,BATF2作为一种抑癌基因产物,其作用机制可能比当前的认识和预期更为复杂. 路钊 郑少鹏 牛静 贾弘禔 丁卫关键词:NF-ΚB P53 肿瘤 凋亡 增加腺相关病毒靶向转导效率的重组腺相关病毒及其应用 本发明公开了增加腺相关病毒靶向转导效率的重组腺相关病毒及其应用。所述重组腺相关病毒含有经过改造的腺相关病毒VP2蛋白以及腺相关病毒原始的VP1蛋白、VP2蛋白和VP3蛋白;其中,所述经过改造的腺相关病毒VP2蛋白是VP2... 丁卫 石文洁 郑少鹏 牛静 吴巍文献传递 PBL教学法在基础医学专业生物化学教学中的实践 被引量:14 2017年 PBL教学法是以问题为导向的教学方法,能够激发学生学习的兴趣和自主性,培养学生创造性思维以及解决问题的能力。基础医学专业是一门新兴专业,培养学生的科研能力是基础医学专业教学工作的中心任务。实践证明,将PBL教学法应用到基础医学专业学生生物化学课程中,既提高了学生的学习兴趣,又培养了学生的综合能力和科研素质,教学效果良好,是一种值得推广的教学方法。 程杉 牛静 余和芬 丁卫关键词:生物化学 PBL教学 教学改革 增加腺相关病毒靶向转导效率的重组腺相关病毒及其应用 本发明公开了增加腺相关病毒靶向转导效率的重组腺相关病毒及其应用。所述重组腺相关病毒含有经过改造的腺相关病毒VP2蛋白以及腺相关病毒原始的VP1蛋白、VP2蛋白和VP3蛋白;其中,所述经过改造的腺相关病毒VP2蛋白是VP2... 丁卫 石文洁 郑少鹏 牛静 吴巍文献传递