- 核酶对人巨细胞病毒mRNA片段的体外切割被引量:8
- 2003年
- 引导序列GSs(GuideSequences)是能与mRNA互补 ,引导核酶RNaseP催化核心M1RNA对互补区域特异切割的小片段游离RNA。针对人巨细胞病毒HCMV(humancytomegalovirus)DNA聚合酶mRNA序列设计GS ,共价结合到大肠杆菌来源M1RNA中 ,构建成M1GS T7核酶。通过对巨细胞病毒DNA聚合酶亚克隆片段转录产物体外切割实验 。
- 陈浩军李弘剑周天鸿周乐平何华坤魏威程华胜
- 关键词:核酶人巨细胞病毒体外切割DNA聚合酶
- 植酸酶基因突变表达及突变蛋白热稳定性的研究
- 植酸酶作为一种新型的酶制剂,由于能有效地帮助非反刍动物消化谷物、油料作物中的植酸盐,提高磷的利用率,减轻由于磷排放对环境尤其是水源的污染,另外能够改善家畜对无机盐、氨基酸等营养物质的吸收,促进其生长,所以得到了广泛的研究...
- 魏威
- 关键词:植酸酶基因突变热稳定性包涵体复性
- 文献传递
- 工程菌BL21-PET21a(+)-phy A表达植酸酶的研究被引量:5
- 2004年
- 对来源于Aspergillusniger的植酸酶基因phyA进行了改造 ,去除了内含子和信号肽编码序列后重组到表达载体PET2 1a( + )上 ,导入大肠杆菌BL2 1 (DE3)中 ,构建工程菌株BL2 1 PET2 1a( + ) phyA。植酸酶基因在工程菌株中得到了高效表达。表达产物主要以包涵体形式存在 ,表达量达到菌体蛋白的 30 %以上。改进了包涵体复性技术 ,包涵体蛋白经复性、纯化后 ,生物活性达到 1 5 0 0U mg ,并且复性蛋白具有较好的热稳定性 ,经过 75~ 95℃、30min的热处理后 ,仍然保持了生物活性 ,同时有明显的热激活现象。热激活后最高生物活性达到 5 0 0 0U mg。
- 魏威李弘剑李月琴方玲陈浩军周乐平何华坤周天鸿
- 关键词:植酸酶包涵体复性热稳定性工程菌