高红
- 作品数:10 被引量:34H指数:3
- 供职机构:华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 人结核杆菌热休克蛋白65重组卡介苗疫苗的构建、表达及鉴定被引量:1
- 2004年
- 目的 构建人结核杆菌热休克蛋白 6 5 (HSP6 5 )重组卡介苗 (BCG)疫苗。方法 用PCR技术从BCG基因组中扩增出抗原 85B (Ag85B)的信号肽DNA序列 ,从 pCMV MTHSP 6 5质粒中扩增出HSP6 5全长基因。利用DNA重组技术将以上两个片段插入质粒 pBCG 2 10 0的人结核杆菌HSP70启动子下游 ,构建一个分泌型的原核穿梭表达质粒pBCG SP HSP6 5。利用电穿孔的方法将该质粒转入BCG中 ,经热诱导后 ,用SDS PAG电泳来观察其表达水平。利用Westernblot来检验HSP6 5的生物学活性。结果 酶切鉴定、PCR和测序分析结果表明 ,所克隆的信号肽DNA片段和热休克蛋白 6 5DNA片段与报道结果完全一致 ,重组体的连接方向正确 ,阅读框与预期完全一致。热诱导后 ,重组BCG表达的 6 5kD (1kD =0 992 1ku)蛋白占菌体总蛋白的 35 6 7% ,占裂解物上清总蛋白的 74 0 9% ,表明重组的HSP6 5基因能在BCG中高效表达 ,表达的蛋白大部分以可溶状态存在。通过Westernblot证实分泌的该蛋白能与结核杆菌HSP6 5的抗体特异性结合。结论 成功构建分泌型原核穿梭表达质粒pBCG SP HSP6 5 ,重组的HSP6 5基因能在BCG中高效表达 ,表达的HSP6 5具有生物学活性 ,重组BCG疫苗构建成功。
- 高红戴五星黄海浪陈智浩梁靓程继忠皇甫永穆
- 关键词:HSP65BCG结核杆菌重组卡介苗重组体
- 分泌型原核穿梭表达质粒pBCG-SP-HSP65的构建及其表达
- 用PCR技术从BCG基因组中扩增出抗原85B(Ag85B)的信号肽(SP)DNA序列,从pCMVMTHSP65质粒中扩增出人结核杆菌HSP65全长基因。利用DNA重组技术将以上两个片段插入质粒pBCG-2100的人结核杆...
- 戴五星陈智浩高红黄海浪梁靓皇甫永穆
- 关键词:信号肽
- 文献传递
- 血吸虫多基因非融合性膜锚定表达疫苗的研究被引量:2
- 2008年
- 目的构建日本血吸虫多基因非融合性膜锚定表达疫苗pIRES-Sj97-Sj14-Sj26,并研究其免疫原性及免疫保护作用。方法构建日本血吸虫脂肪酸结合蛋白(Sj14)、谷胱甘肽-S-转移酶(Sj26)和副肌球蛋白(Sj97)的跨膜共表达质粒pIRES-Sj97-Sj14-Sj26,转染HeLa细胞。通过RT-PCR法检测Sj14、Sj26和Sj97mRNA的表达,免疫荧光(IFA)检测Sj14、Sj26和Sj97蛋白的表达。用纯化的该质粒免疫BALB/c小鼠(100μg/只),设生理盐水和空载体对照组,20只/组,每隔2周加强免疫1次,共免疫3次。末次免疫2周后,每组取10只小鼠,眼球取血并断颈处死,取脾淋巴细胞及腹腔巨噬细胞。分别检测免疫小鼠血清中总IgG抗体及脾淋巴细胞培养上清干扰素-γ(IFN-γ)水平,淋巴细胞刺激指数(SI)及NO释放量,并分析脾淋巴细胞亚群。各组中余下小鼠每只经腹部感染40±1条尾蚴,45d后剖杀,计数成虫数及肝卵数,计算减虫率和减卵率。结果构建的质粒可在体外表达。疫苗组、生理盐水组和空白质粒组血清总IgG抗体含量分别为(5.62±0.64)、(1.22±0.20)及(1.48±0.36)mg/ml,疫苗组与各对照组差异均具有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。疫苗组、生理盐水组和空白质粒组小鼠腹腔巨噬细胞NO含量分别为(321.19±18.03)、(184.12±11.05)及(213.51±15.93)nmol/ml,疫苗组与生理盐水组间差异有统计学意义(P<0.05)。疫苗组、生理盐水组、空白质粒组小鼠脾淋巴细胞刺激指数分别为(2.25±0.29)、(1.18±0.07)及(1.22±0.09),疫苗组显著升高(P<0.01)。疫苗组INF-γ水平与各对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.01);CD4+和CD8+T细胞百分比明显升高。疫苗组减虫率和肝减卵率分别为39.9%和43.94%。结论pIRES-Sj97-Sj14-Sj26疫苗具有较强的免疫原性,可对日本血吸虫感染的小鼠产生一定保护作用。
- 唐成武刘朔婕马彦彬梁靓郭萍王淑玉邹镇高红段秋红程继忠戴五星
- 关键词:日本血吸虫免疫保护作用
- 人结核杆菌HSP65重组BCG疫苗的构建、表达及鉴定
- 在结核杆菌感染中,热休克蛋白65(HSP65)是最重要的免疫保护性抗原之一。用PCR技术从卡介苗(BCG)基因组中扩增出抗原85B(Ag85B)的信号肽DNA序列,从pCMVMTHSP65质粒中扩增出人结核杆菌HSP65...
- 高红戴五星黄海浪陈智浩梁靓皇甫永穆
- 关键词:信号肽重组BCG
- 文献传递
- 2018年湖北省病案编码人员现状调查及问题分析被引量:14
- 2020年
- 目的:了解2018年湖北省病案编码人员基本情况及存在的问题,为疾病编码工作的顺利开展奠定基础。方法:对湖北省二级以上综合医院病案科(室)通过“全国医疗质量数据抽样调查”专栏进行网络调查,获得2018年1月1日至2018年12月31日病案编码人员数量、学历、职称、专业背景和工作负荷情况。结果:共调查病案专职编码人员404人,其中医学相关专业(临床、护理等)占57.67%,本科学历占53.22%,中级及以下职称人员占到87.38%,人均每日完成病案编码份数为62.28份。结论:病案编码人员数量不足、编码负荷大、人员学历偏低、职称结构不合理,应引起领导部门重视,优化病案编码人员队伍。
- 刘佩裴益高红唐锦辉何艺
- 关键词:病案病案信息
- 基于主要诊断编码正确率督导检查的编码错误分析被引量:7
- 2022年
- 目的分析某市47家医院病案首页主要诊断编码的缺陷,并针对发现的问题提出解决方案。方法某省病历质控中心组织病历督导专家,对某市47家医院各随机抽取20份病历,共940份,检查病案首页主要诊断及编码的准确性。结果通过督导检查,主要诊断选择医生填写正确率为80.32%,编码正确率为75.53%。错误类型主要集中在诊断选择错误、编码过于笼统或粗犷、肿瘤病历诊断选择不准确、患者临终状态或症状作为主诊等方面。结论通过加强临床医师和编码员的病案首页诊断编码培训,并建立有效的管理体系和考评机制,利用信息化手段,完善病案首页质量控制系统等方式,可以提高诊断编码的准确性。
- 何艺周云高红
- 关键词:病案首页疾病分类
- 人结核杆菌热休克蛋白65和Ag85A基因真核双表达质粒的构建和体外表达
- 2008年
- 目的构建人结核杆菌热休克蛋白65(Hsp65)与Ag85A基因的共表达载体pIRES-Hsp65-Ag85A,并检测其在体外的表达。方法利用聚合酶链反应(PCR)法及基因重组技术,以人结核杆菌基因组DNA为模板,扩增获得Hsp65与Ag85A的全长基因,并将其构建到真核表达质粒pIRES中获得共表达质粒pIRES-Hsp65-Ag85A。将该质粒转染Hela细胞,通过RT-PCR的方法检测目的基因的表达。结果经过测序证实重组质粒构建成功,该质粒在体外转染Hela细胞后可表达Hsp65与Ag85A两者的mRNA。结论成功构建了共表达质粒pIRES-Hsp65-Ag85A,该质粒能在人子宫颈癌细胞中表达。
- 马彦彬戴五星陈智浩高红
- 关键词:热休克蛋白65结核分枝杆菌
- 大肠杆菌-分枝杆菌分泌型穿梭表达质粒pBCG-SP-HSP65的构建及人结核杆菌HSP65的表达被引量:2
- 2004年
- 用PCR技术从BacillusCalmette gu啨rin(BCG)基因组中扩增出抗原 85B(Ag85B)的信号肽 (SP)DNA序列 ,从pCMVMTHSP65质粒中扩增出人结核杆菌HSP65全长基因。利用DNA重组技术将以上两个片段插入质粒pBCG 2 10 0的人结核杆菌HSP70启动子下游 ,构建成分泌型原核穿梭表达质粒 (pBCG SP HSP65)。酶切鉴定、PCR和测序分析结果均表明分泌型原核穿梭表达质粒pBCG SP HSP65构建成功。利用电穿孔将该质粒转入耻垢分枝杆菌(Mycobacterialsmegmatis,MS)中 ,用卡那霉素筛选出阳性重组子。经热诱导后用SDS PAGE观察到在耻垢分枝杆菌中 65kD蛋白占总蛋白的 2 0 % ,而在重组耻垢分枝杆菌表达的 65kD蛋白占菌体总蛋白的 3 4 46% ,占裂解物上清总蛋白的 68 56% ,表明重组的HSP65基因能在耻垢分枝杆菌中高效表达 ,表达的蛋白大部分以可溶状态存在。通过Western blot证实分泌的该蛋白能与结核杆菌HSP65的抗体特异性结合 ,说明该重组蛋白具有HSP65的生物学活性。
- 戴五星陈智浩高红黄海浪梁靓程继忠皇甫永穆
- 关键词:大肠杆菌分枝杆菌信号肽
- 结核分支杆菌Hsp70和Hsp65 DNA疫苗免疫原性比较研究被引量:2
- 2002年
- 戴五星黄海浪高红皇甫永穆
- 关键词:结核分支杆菌HSP70疫苗免疫原性结核病
- 新型冠状病毒肺炎期间的病案管理流程被引量:6
- 2020年
- 本文根据流行性传染病的特点,制定了新型冠状病毒肺炎期间的病案管理流程:将电子病历的打印时间延后,打印地点调整为病案科的清洁区域,对特殊纸质病历的保管和消毒流程进行了规范,以降低纸质病案的污染风险;线上办理病案复印和电子版病案复制件的运用,以消除传统病案复印环节人群聚集的感染风险;对特殊纸质病历和电子病历的三种归档方式进行比较后发现,无纸化病案管理流程是疫期阻断病案纸张的病原传播途径、降低医院感染风险的最佳方案。
- 何艺李迪吴剑宏杨奇盛葛名欢王雷张雪梅裴圣广王萍高红夏海朋裴益牟岚
- 关键词:新型冠状病毒病案管理