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陈怡韵
作品数:
1
被引量:5
H指数:1
供职机构:
复旦大学上海医学院
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发文基金:
国家自然科学基金
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相关领域:
生物学
医药卫生
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合作作者
王霞
复旦大学上海医学院
谭理
复旦大学上海医学院
李平
复旦大学上海医学院
孙兴会
复旦大学上海医学院
张宇清
复旦大学上海医学院
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1篇
复旦大学上海...
作者
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朱运松
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张宇清
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孙兴会
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李平
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谭理
1篇
陈怡韵
1篇
王霞
传媒
1篇
中国生物化学...
年份
1篇
2003
共
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Lys_(10)-PAI-1融合蛋白在大肠杆菌中的表达、纯化和凝胶阻滞实验
被引量:5
2003年
用PCR方法构建 10个赖氨酸与纤溶酶原激活剂抑制物 1的融合基因Lys10 PAI 1,并克隆于pET2 8a(+ )和pET32a(+ )原核表达载体 .将重组表达质粒pET32 PAI和pET2 8 PAI转化大肠杆菌BL2 1(DE3) .IPTG诱导后可获得分子量分别为 6 3kD和 4 3kD的目的蛋白 ,表达蛋白占菌体蛋白2 0 %以上 ,大多数重组蛋白以不溶形式存在 .表达产物经变性、复性、超滤、透析和亲和层析等步骤 ,可以得到纯化的Trx·PAI 1和rPAI 1重组蛋白 .Western印迹结果表明 ,目的蛋白具有人PAI 1的抗原性 .凝胶阻滞实验发现 ,纯化的重组蛋白在一定条件下 ,可以与质粒结合 ,使质粒的迁移率明显改变 .研究结果表明 ,Trx·PAI 1和rPAI
孙兴会
李平
张宇清
谭理
王霞
侯敏
陈怡韵
朱运松
关键词:
纤溶酶原激活剂抑制物-1
融合基因
纯化
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