- RNAi沉默Notch1基因对人胶质瘤U251细胞增殖能力的影响被引量:4
- 2010年
- 目的探讨沉默Notch1基因对人神经胶质瘤U251细胞增殖能力的影响。方法采用Notch1-shRNA慢病毒感染人胶质瘤U251细胞,筛选稳定低表达Notch1的细胞单克隆,Western blot法检测细胞Notch1蛋白的表达;CCK-8法测定细胞生长;平板克隆形成实验和软琼脂克隆形成实验检测细胞的集落形成能力;裸鼠种植瘤模型观察Notch1沉默对种植瘤生长的影响。结果成功筛选得到Notch1稳定沉默的U251细胞单克隆,其Notch1蛋白下调(65.3±5.1)%。Notch1稳定沉默细胞的生长增殖能力明显受到抑制,生长曲线与对照组相比明显减慢;Notch1沉默组的平板克隆形成率为(18.6±2.5)%,低于对照组(37.0±3.3)%;Notch1沉默组软琼脂集落形成率(51±5)%,低于对照组(80±4)%;Notch1沉默组裸鼠腋下种植瘤生长速度减慢,30d后瘤重(0.31±0.09)g,明显低于对照组(2.35±0.71)g;统计学分析差异均有显著性。结论RNAi沉默Notch1基因可致人胶质瘤U251细胞的体外增殖和体内成瘤能力下降。
- 张明芳郭亚齐元麟郑志竑
- 关键词:NOTCH1细胞增殖种植瘤
- notch1基因对人胶质瘤U251细胞增殖和周期的影响被引量:4
- 2010年
- 目的:探讨notch1基因对人胶质瘤U251细胞增殖和周期的影响。方法:体外构建notch1-shR-NA和pNL-NICD/EGFP慢病毒表达载体,采用RT-PCR和Western blotting方法行notch1沉默和高表达notch1胞内段的效果检测,MTT法和PI单染流式细胞术分析notch1对细胞增殖和细胞周期的影响。结果:notch1-shRNA慢病毒表达载体能有效下调notch1表达,而pNL-NICD/EGFP慢病毒表达载体能有效增加NICD的表达。notch1基因表达下调的细胞其细胞增殖能力受到明显抑制(P<0.01),并引起细胞G1期阻滞(P<0.01),S期减少(P<0.01);在NICD表达增加的细胞其增殖能力明显增强(P<0.01),且引起细胞G1期减少(P<0.05),S期增加(P<0.01)。结论:notch1基因与人胶质瘤U251细胞的增殖能力和周期密切相关,有望成为治疗胶质瘤的靶点。
- 郭亚赵能江林玲张明芳郑志竑
- 关键词:神经胶质瘤RNA干扰细胞增殖细胞周期
- Notch1基因对人胶质瘤U251细胞增殖和周期的影响及其机制的初步研究
- 目的:
1、检测Notch1基因对人胶质瘤U251增殖和细胞周期的影响。
2、探讨Notch1基因影响人胶质瘤U251细胞增殖和周期的可能机制。
方法:
1、利用Notch...
- 郭亚
- 关键词:神经胶质瘤细胞增殖NF-ΚB
- 文献传递