张明芳
- 作品数：26 被引量：66H指数：5
- 供职机构：福建医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金：福建省自然科学基金国家自然科学基金福建省教育厅科技项目更多>>
- 相关领域：医药卫生化学工程文化科学更多>>
- 眼镜蛇毒L-氨基酸氧化酶诱导人胃癌细胞MGC-803细胞凋亡的实验研究被引量：4
- 2012年
- 目的:研究眼镜蛇毒L-氨基酸氧化酶(NA-LAAO)对人胃癌细胞MGC-803的细胞毒性、诱导凋亡作用及可能机制。方法:采用CCK-8法测定细胞毒性;采用DNA倍体分析和An-nexin V/碘化丙啶染色测定细胞凋亡;采用发色底物法测定Caspase-3酶活性;采用Western-blot方法测定聚二磷酸腺苷核糖多聚酸-1(PARP-1)切割。结果:NA-LAAO可抑制MGC-803细胞增殖,6、12、24h的IC50分别为(2.48±0.41)、(1.74±0.27)和(0.83±0.19)mg/L;NA-LAAO可使细胞DNA分布出现亚二倍体凋亡峰,并可促使细胞膜磷脂酰丝氨酸外翻;NA-LAAO可激活Caspase-3并可促使其底物PARP-1降解。结论:NA-LAAO可能通过激活Caspase-3这一分子机制而诱导细胞凋亡,从而抑制肿瘤细胞增殖。
- 齐元麟张明芳赵蓉林建银
- 关键词：蛇毒中华眼镜蛇L-氨基酸氧化酶细胞凋亡
- 舟山眼镜蛇毒细胞毒素的分离纯化、抗肿瘤活性及毒性研究
- 该文从舟山眼镜蛇（Naja atra）毒中分离纯化得到4个CTX,并比较它们的体内外抗肿瘤活性及毒性,旨在筛选出一个高效低毒的CTX,为开发利用提供依据.结论：采用SP-Sephadex C-25阳离子交换柱层析、Sup...
- 张明芳
- 关键词：眼镜蛇毒细胞毒素抗肿瘤作用
- 文献传递
- 福建产舟山眼镜蛇毒细胞毒素的快速分离纯化及鉴定被引量：9
- 2004年
- 目的 从舟山眼镜蛇毒中分离纯化细胞毒素 (CTX) ,并鉴定其理化性质。 方法 采用 SP- SephadexC- 2 5阳离子交换色谱及 Sephasil Peptide C1 8反相高效液相色谱法从舟山眼镜蛇毒中分离纯化 CTX,SDS- PAGE(Tris- Tricine系统 )鉴定纯度 ,Edman降解法测定 N端氨基酸序列。 结果 粗毒经阳离子交换色谱 ,得到 1 4个蛋白峰 ,其中第 ～ 峰具 CTX活性 ;再分别经反相色谱纯化 ,得到 4个 CTX,总得率为 32 .4 8% ;SDS- PAGE显示为均一蛋白 ,分子量依次为 :7.2 8,7.33,7.2 4和 7.38k D;测定它们 N端 2 0个氨基酸序列。 结论 采用阳离子交换和反相高效液相色谱可快速、高效地从眼镜蛇毒中获得 4个
- 张明芳许云禄刘广芬
- 关键词：眼镜蛇毒液类细胞毒素类色谱法高压液相色谱法
- RNAi沉默Notch1基因对人胶质瘤U251细胞增殖能力的影响被引量：4
- 2010年
- 目的探讨沉默Notch1基因对人神经胶质瘤U251细胞增殖能力的影响。方法采用Notch1-shRNA慢病毒感染人胶质瘤U251细胞,筛选稳定低表达Notch1的细胞单克隆,Western blot法检测细胞Notch1蛋白的表达;CCK-8法测定细胞生长;平板克隆形成实验和软琼脂克隆形成实验检测细胞的集落形成能力;裸鼠种植瘤模型观察Notch1沉默对种植瘤生长的影响。结果成功筛选得到Notch1稳定沉默的U251细胞单克隆,其Notch1蛋白下调(65.3±5.1)%。Notch1稳定沉默细胞的生长增殖能力明显受到抑制,生长曲线与对照组相比明显减慢;Notch1沉默组的平板克隆形成率为(18.6±2.5)%,低于对照组(37.0±3.3)%;Notch1沉默组软琼脂集落形成率(51±5)%,低于对照组(80±4)%;Notch1沉默组裸鼠腋下种植瘤生长速度减慢,30d后瘤重(0.31±0.09)g,明显低于对照组(2.35±0.71)g;统计学分析差异均有显著性。结论RNAi沉默Notch1基因可致人胶质瘤U251细胞的体外增殖和体内成瘤能力下降。
- 张明芳郭亚齐元麟郑志竑
- 关键词：NOTCH1细胞增殖种植瘤
- TRPC6介导肺动脉高压大鼠肺动脉张力和肺动脉平滑肌细胞Ca^(2+)浓度的升高被引量：6
- 2010年
- 经典瞬时感受器电位通道6(transient receptor potential channel6,TRPC6)蛋白是受体操纵性Ca2+通道(ROCC)的分子基础。本文旨在研究TRPC6/ROCC在野百合碱(monocrotaline,MCT)诱发的肺动脉高压大鼠模型中的作用。Sprague-Dawley大鼠随机分为正常对照组(CON组)和MCT组,CON组正常饲养三周,而MCT组按60mg/kg剂量一次性腹腔注射2%MCT,建立MCT诱导的慢性肺动脉高压大鼠模型。通过测定右心室收缩压(RVSP)和右心室重量指数(RVMI)、HE染色观察肺动脉血管形态,分析肺动脉结构重建。半定量RT-PCR和Western blot检测大鼠肺动脉TRPC6 mRNA和蛋白表达水平。血管张力实验中用可特异性激活ROCC、可透膜的DAG拟似物1-oleoyl-2-acetyl-sn-glycerol(OAG)检测大鼠离体肺动脉环的收缩效应。用荧光探针Fluo3-AM测定OAG诱导大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)胞浆游离Ca2+浓度([Ca2+]i)。结果显示,与CON组相比,MCT组的RVSP、RVMI均明显增高(P<0.01);形态学观察可见肺小动脉平滑肌层明显增厚,管腔减小;TRPC6的mRNA和蛋白质表达无明显变化。在CON组,OAG几乎不引起肺动脉环收缩,而在MCT组,肺动脉环的收缩反应显著增强,差别有显著性意义(P<0.01)。相比较于CON组,MCT也可使OAG触发的PASMCs[Ca2+]i增量值显著升高(P<0.05)。上述结果提示,MCT预处理对肺动脉TRPC6mRNA和蛋白质水平的表达无显著增强效应,但可促进TRPC6/ROCC介导的PASMCsCa2+内流和肺动脉张力升高,诱导大鼠产生肺动脉高压,并进一步诱发肺血管及右心室重构。
- 张明芳刘晓如杨娜林默君
- 关键词：钙离子野百合碱
- 竹叶青素的基因合成、原核表达及生物学功能的初步研究
- 2013年
- 目的合成竹叶青素trigramin基因,在原核系统中表达、纯化,对其功能进行初步研究。方法缓慢退火-PCR法合成竹叶青素基因并克隆入原核表达载体;IPTG诱导表达;亲和层析法纯化重组蛋白;常规柱层析和HPLC纯化天然竹叶青素;Born法测定竹叶青素对血小板聚集的抑制能力;CCK-8法测定竹叶青素对细胞增殖的影响;划痕实验分析竹叶青素对细胞运动的影响。结果合成了竹叶青素基因并在大肠杆菌中表达;获得纯度为89.1%的重组竹叶青素;重组竹叶青素抑制血小板聚集的IC50为0.78μmol.L-1,而天然竹叶青素为0.35μmol.L-1;竹叶青素不能抑制肿瘤细胞增殖,但可抑制细胞体外运动能力。结论本研究成功合成竹叶青素基因并在大肠杆菌系统进行了有功能的表达和纯化,竹叶青素可抑制肿瘤细胞体外运动。
- 齐元麟张明芳胡建石徐剑文林建银
- 关键词：蛇毒去整合素原核表达蛋白纯化
- 慢性低氧及野百合碱诱发肺动脉高压大鼠的TRPC1表达水平及其介导肺动脉收缩的时间曲线的研究
- 目的:研究钙池操纵性钙通道在慢性低氧诱发肺动脉高压大鼠模型及野百合碱（Monocrotaline,MCT）诱发肺动脉高压大鼠模型中的作用,及其病理生理学意义。方法:制备慢性低氧及MCT诱发肺动脉高压大鼠模型,分别测定以下...
- 刘晓如朱壮丽杨娜张明芳林默君
- 关键词：慢性低氧野百合碱钙离子
- 文献传递
- 试论生理学教学中的教师主导作用被引量：1
- 2009年
- 教师主导作用和学生主体作用相结合,是教学的一条基本原则。文章从生理学教学准备、课堂教学、课后教学辅导答疑等教学环节阐述如何发挥教师的主导作用。
- 张明芳林默君
- 关键词：生理学教学教师主导作用
- 眼镜蛇毒细胞毒素的分离纯化、理化性质、抗肿瘤活性及其药代动力学研究
- 许云禄郭慕平张明芳杨丽娟吴国土仲晓燕林建忠刘广芬王晴川
- 该成果为自选课题，是对眼镜蛇（Naja atra）蛇毒细胞毒素（cyctotoxin，CTX）药学和临床前药理学研究的系列工作。应用液相色谱方法（柱层析法）对眼镜蛇毒粗毒进行成分分析，分得14个组分，对各组分的酶活性及生...
- 关键词：
- 关键词：细胞毒素抗肿瘤眼镜蛇毒
- 人notch1-shRNA慢病毒表达载体的构建与鉴定被引量：6
- 2009年
- 目的构建人notch1-shRNA慢病毒表达载体,为Notch信号通路的相关研究奠定基础。方法根据人notch1基因mRNA序列设计并合成两条互补的DNA单链寡核苷酸,将退火后形成的双链连接于pENTR/U6质粒,通过与pLenti6/BLOCK-iT-DEST载体的LR重组,构建notch1-shRNA慢病毒表达载体,经脂质体介导入293FT细胞,包装成慢病毒。用该慢病毒感染人神经母细胞瘤系SH-SY5Y细胞,RT-PCR和Westernblot法检测细胞notch1基因的表达。结果目的序列成功连接于载体并包装成较高滴度的慢病毒,细胞mRNA和蛋白质的检测均表明构建的notch1-shRNA慢病毒表达载体LR-ND-A能显著抑制SH-SY5Y细胞notch1基因的表达。结论成功构建人notch1-shRNA慢病毒表达载体。
- 张燕张明芳林玲郑志竑
- 关键词：RNA慢病毒属信号传导
