贺成业
- 作品数：8 被引量：16H指数：3
- 供职机构：辽宁医学院附属第一医院更多>>
- 发文基金：辽宁省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 大蒜素增强脑胶质瘤细胞株U87对TRAIL敏感性的机制研究
- 2014年
- 目的研究大蒜素是否能通过增加脑胶质瘤细胞U87对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)的敏感性来促进U87细胞的凋亡及其相关机制的研究。方法采用MTT法检测大蒜素联合TRAIL对U87细胞活性的影响;流式细胞术(Annexin V/FITC)评估大蒜素联合TRAIL对U87细胞凋亡的影响;Transwell实验进一步检测大蒜素联合TRAIL对U87细胞的侵袭能力的影响;Western-blot、RT-PCR和Q-RT-PCR方法检测大蒜素联合TRAIL对与U87细胞凋亡相关的基因和蛋白的表达影响。结果与其他组比较,大蒜素联合TRAIL明显降低U87细胞活力和侵袭能力,促进U87细胞凋亡。在分子水平上,与单独作用组比较,联合作用组明显增加DR4、DR5、Caspase-3和Caspase-8的活性,而AKT、pFKHR、MMP-2和MMP-9的活性明显被抑制。结论大蒜素能增强脑胶质瘤细胞U87对TRAIL的敏感性,从而促进U87凋亡。
- 张凤香孙大鹏贺成业韩冠英
- 关键词：大蒜素肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体
- c-FLIP-L影响乳腺癌MDA-MB-231细胞对TRAIL致凋亡作用的敏感性被引量：1
- 2014年
- 目的:观察c-FLIP-L对TRAIL诱导乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的影响及其具体机制。方法:构建靶向c-FLIP-L的siRNA质粒,转染乳腺癌MDA-MB-231细胞,RT-PCR、Weston blotting验证基因抑制效果。实验分空白对照组、TRAIL组、c-FLIP-L siRNA组和c-FLIP-L siRNA+TRAIL组共4组,MTT法检测各组MDA-MB-231细胞的增殖情况,流式细胞术检测MDA-MB-231细胞凋亡率,Transwell实验检测MDA-MB-231细胞侵袭能力,RT-PCR、Western blotting检测MDA-MB-231细胞中c-FLIP-L、caspase-3、caspase-8、MMP-2、MMP-9的表达。结果:靶向c-FLIP-L的siRNA质粒转染至乳腺癌细胞株可有效抑制c-FLIP-L mRNA[(37.12±3.02)vs(183.21±8.31),(174.65±10.06);P<0.05]及其蛋白的水平。c-FLIP-L siRNA和TRAIL联合处理MDA-MB-231细胞,与两者单独处理相比,细胞增殖抑制率显著升高[72 h时,(75.51±2.01)%vs(33.75±1.60)%,(34.31±2.01)%;均P<0.05],凋亡率显著升高[72 h时,(76.30±4.11)%vs(38.95±2.14)%,(29.28±1.66)%;均P<0.05],对细胞侵袭能力的抑制也显著增强。c-FLIP-L siRNA和TRAIL联合处理后,与两者单独处理相比,乳腺癌细胞中casepase-3、casepase-8的表达显著增强,而MMP-2、MMP-9的表达明显减弱。结论:抑制c-FLIP-L表达能够增强MDA-MB-231细胞对TRAIL的敏感性,从而提高诱导肿瘤细胞凋亡的能力,其机制可能与caspase-3、caspase-8的表达上调和MMP-2、MMP-9的表达下调有关。
- 孙大鹏贺成业张凤香韩冠英
- 关键词：乳腺癌MDA-MB-231细胞TRAIL凋亡
- TGF-β1/Smad7信号通路在白藜芦醇增强胆固醇酯水解酶表达中的作用被引量：2
- 2014年
- 目的探讨TGF-β1/Smad-7信号通路在白藜芦醇增强胆固醇酯水解酶(cholesteryl ester hydrolase,CEH)表达中的作用。方法用氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,oxLDL)诱导小鼠单核巨噬细胞株RAW 264.7转化为泡沫细胞,将经泡沫化处理的巨噬细胞进行2次分组,第1次分为正常对照组、白藜芦醇组、LY2157299组和白藜芦醇+LY2157299组,第2次分为正常对照组、白藜芦醇组、Ad-Smad-7组和白藜芦醇+Ad-Smad-7组,均处理48 h,通过胆固醇流出试验检测各组巨噬细胞内胆固醇流出率,油红O染色检测细胞泡沫化情况,RT-PCR法和Western blot法检测细胞中p-Smad-7和CEH基因mRNA的转录水平及蛋白的表达水平。结果与正常对照组比较,白藜芦醇组巨噬细胞内胆固醇流出率明显升高(P<0.05),白藜芦醇+LY2157299组、LY2157299组、白藜芦醇+Ad-Smad-7组和Ad-Smad-7组胆固醇流出率均明显降低(P<0.05);白藜芦醇组巨噬细胞泡沫化程度明显下降(P<0.05),白藜芦醇+LY2157299组、LY2157299组、白藜芦醇+Ad-Smad-7组和Ad-Smad-7组巨噬细胞泡沫化程度明显增强(P<0.05);白藜芦醇组巨噬细胞中CEH基因mRNA的转录水平及蛋白的表达水平明显增强(P<0.05),p-Smad-7基因mRNA的转录水平及蛋白的表达水平明显下降(P<0.05),而白藜芦醇+LY2157299组、LY2157299组、白藜芦醇+Ad-Smad-7组和Ad-Smad-7组CEH基因mRNA的转录及蛋白的表达均明显被抑制(P<0.05),p-Smad-7基因mRNA的转录及蛋白的表达均明显增强(P<0.05)。结论白藜芦醇可能是通过TGF-β1/Smad-7信号通路来增强CEH的表达。
- 张凤香贺成业李晨光司忠义
- 关键词：白藜芦醇转化生长因子-Β1
- 白藜芦醇对胆固醇酯水解酶的调节作用被引量：1
- 2013年
- 目的观察白藜芦醇对胆固醇酯水解酶(carboxylic ester hydrolase,CEH)的调节作用及对动脉粥样硬化斑块形成的影响。方法 8周龄ApoE-/-小鼠分为空白对照组、CEH siRNA组、白藜芦醇+CEH siRNA组及白藜芦醇组,高脂饲料同时给予白藜芦醇和(或)CEH siRNA干预,喂养10周后检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量;取主动脉,常规HE染色,观察主动脉形态学变化;通过qRT-PCR和Western Blot观察血管细胞黏附分子1(vascular cell adhesion molecule-1,VCAM-1)和补体因子H(complement factor H,CFH)表达情况。结果与对照组比较,白藜芦醇组LDL-C显著降低(P<0.01),CEH siRNA组LDL-C显著升高(P<0.01);与对照组比较,白藜芦醇组的内膜和中膜的厚度明显减轻(P<0.01),而CEH siRNA组内膜厚度明显增厚(P<0.01);qRT-PCR和Westernblot检测结果显示与对照组相比白藜芦醇组VCAM-1的表达被抑制,CFH的表达增强,而CEH siRNA组VCAM-1的表达明显被增强,CFH的表达明显被抑制。结论白藜芦醇可能通过对CEH表达的调节抑制LDL-C的含量,减少内膜厚度。
- 张凤香贺成业关宁李晨光罗俊生
- 关键词：白藜芦醇血管细胞黏附分子1补体因子H
- 钙敏感受体对内皮祖细胞数量及功能的影响被引量：3
- 2016年
- 目的观察钙敏感受体(Ca SR)对人外周血内皮祖细胞(EPCs)数量及功能的影响。方法培养并鉴定EPCs;RT-PCR和Western印迹检测EPCs中Ca SR的表达情况;MTT法观察Ca SR对EPCs增殖能力的影响;Tube形成和迁移实验评价Ca SR对EPCs血管新生能力和迁移能力的影响;Western印迹检测Ca SR对EPCs中血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达的影响。结果 RT-PCR和Western印迹结果显示在EPCs中有Ca SR的表达;MTT法、Tube形成和迁移实验检测结果显示与正常对照组相比较,Ca SR激动剂组EPCs增殖、迁移能力和血管形成能力明显增强(P<0.05),而Ca SR抑制剂组EPCs增殖、迁移能力和血管形成能力明显降低(P<0.05);Western印迹检测发现与正常对照组相比较,Ca SR激动剂组VEGF和Ca SR表达明显增强,而Ca SR抑制剂组VEGF和Ca SR表达明显降低。结论 EPCs中有Ca SR的表达,并且Ca SR可以影响EPCs的数量、迁徙和血管形成能力。
- 张凤香贺成业李晨光孙大鹏
- 关键词：钙敏感受体内皮祖细胞血管内皮生长因子
- 大蒜素对人外周血内皮祖细胞增殖活力及迁移能力的影响被引量：4
- 2014年
- 目的探讨大蒜素(allicin)对人外周血内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)增殖活力及迁移能力的影响。方法提取健康成人EPCs,经DiI-acLDL和FITC-UEA-I染色后,于激光共聚焦显微镜下观察染色结果;向EPCs加入5、10、15和20μg/ml的大蒜素,分别作用12、24、48和72 h,MTT法检测各组EPCs的增殖活力;Transwell小室试验及Western blot法分别检测大蒜素作用48 h后,其对各组EPCs迁移能力及EPCs中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和基质细胞衍生因子-1(stromal cells derived factor-1,SDF-1)蛋白表达水平的影响。结果 DiI-acLDL染色可见绿色荧光,FITC-UEA-I染色可见红色荧光,双重染色可见黄色荧光。作用12、24和48 h的10、15和20μg/ml大蒜素组EPCs的增殖活力显著高于空白对照组(P<0.05),且呈浓度依赖性,于48 h时达最高;10、15和20μg/ml大蒜素组EPCs的迁移能力及EPCs中VEGF和SDF-1蛋白的表达水平均明显高于空白对照组(P<0.05),且呈浓度依赖性。结论大蒜素可提高人EPCs的增殖活力及迁移能力,该作用可能是通过调节VEGF和SDF-1的表达而实现的,为动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)的防治提供了新的思路。
- 张凤香贺成业李晨光郭闻师
- 关键词：大蒜素内皮祖细胞细胞迁移血管内皮生长因子基质细胞衍生因子-1
- 钙敏感受体在颈动脉平滑肌细胞增殖和迁移中的作用被引量：4
- 2013年
- 目的观察钙敏感受体(calcium-sensing receptor,CaSR)在大鼠颈动脉平滑肌细胞中的表达情况及在颈动脉平滑肌细胞增殖和迁移中的作用。方法通过Realtime-PCR和Western Blot检测颈动脉平滑肌细胞中CaSR的表达情况;通过MTT法和Transwell法观察CaSR对颈动脉平滑肌细胞增殖和迁移能力的影响;通过Western Blot检测CaSR对MMP-9、MMP-2和PCNA表达的影响。结果 RT-PCR和Western blot结果显示在颈动脉平滑肌细胞中有CaSR的表达;MTT法和Transwell法结果显示与正常对照组相比较,CaSR激动剂组颈动脉平滑肌细胞增殖和迁移能力明显增强(P<0.05),而CaSR抑制剂组颈动脉平滑肌细胞增殖和迁移能力明显降低(P<0.05);Western Blot检测发现与正常对照组相比较,CaSR激动剂组MMP-9、MMP-2和PCNA表达明显增强,而CaSR抑制剂组MMP-9、MMP-2和PCNA表达明显降低。结论颈动脉平滑肌细胞中有CaSR的表达,并且CaSR可以影响颈动脉平滑肌细胞增殖和迁移。
- 李辛贺成业罗俊生张凤香
- 关键词：钙敏感受体迁移增殖
- 转化生长因子-β1对巨噬细胞泡沫化过程的影响及其机制被引量：1
- 2015年
- 目的研究转化生长因子(TGF)-β1是否能通过胆固醇酯水解酶(CEH)对巨噬细胞的泡沫化过程产生影响。方法 ox-LDL(100 mg/L)作用48 h,使巨噬细胞转化为泡沫细胞;Ad-TGF-β1和(或)siRNA CEH作用于巨噬细胞,作用48 h后,分别采用油红O染色检测阳性细胞数量;HPLC观察巨噬细胞内胆固醇代谢情况;Western印迹检测巨噬细胞内CD36和SR-A1蛋白的表达情况。结果油红O染色阳性细胞数量:空白对照组59.54±4.01、Ad-TGF-β1组15.12±1.23、Ad-TGF-β1+siRNA CEH组89.01±3.67、siRNA CEH组94.28±5.22。巨噬细胞内胆固醇酯(CE)、游离胆固醇(FC)和总胆固醇(TC)含量;与空白对照组比较,Ad-TGF-β1+siRNA CEH组和siRNA CEH组均增加(P<0.05);而Ad-TGF-β1组均明显下降(P<0.05)。Western印迹法检测发现:与空白对照组比较,Ad-TGF-β1组CD36和SR-A1蛋白表达均明显低于;而Ad-TGF-β1+siRNA CEH组和siRNA CEH组CD36和SR-A1蛋白表达明显增强。结论 TGF-β1是通过提高CEH的表达来抑制巨噬细胞向泡沫细胞转化。
- 张凤香贺成业李晨光罗俊生
- 关键词：转化生长因子-Β1CD36
